【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于中药活性成分筛选及作用机制研究领域,特别涉及一种筛选中 药镇痛活性成分和确定其结合的阿片受体亚型的细胞膜色谱模型的建立方法。
技术介绍
传统的中药活性成分筛选模式,如整体动物、系统、器官模型,存在着研 究周期长、花费高、效率低的缺点;酶、受体模型无法反映中药多组分、多靶 点的特点。在众多模型中,细胞膜色谱法脱颖而出,成为高效筛选中药活性成 分的新方法。细胞膜色谱法(Cell Membrane Chromatography, CMC)是将人或动物的 活性组织细胞膜固定在特定载体表面,制备成细胞膜固定相,通过紫外在线检 测被分析成分在细胞膜固定相上的保留特性,所得色谱参数与药物和细胞膜及 膜受体特异性结合密切相关,已成功用于多种中药的活性成分筛选,克服了以 往先从中药中分离有效部位或单体,再分析其药效,从而使成分分离与效应筛 选脱节的弊端,是一种化学成分——效应——作用机制联动的药物研究方法。 但此法同时也存在着不能满足细胞膜所需要的温度、压力、离子强度及溶液 pH等要求,且不能完全排除非特异性结合的问题。现代研究表明阿片类药物是通过作用于阿片受体而产 ...
【技术保护点】
一种筛选镇痛中药活性成分的细胞膜色谱法,其特征在于包括如下步骤: (1)白芷醇提液指纹图谱的建立:称取20g白芷药材,加入160ml95%乙醇,回流提取1~2h,挥干乙醇,残渣用甲醇溶解定容至20ml,从中取250μl用甲醇稀释至7.5ml,过0.45μm微孔滤膜,得到滤液即为白芷醇提液;吸取滤液20μl,采用高效液相色谱方法进行测定,得到白芷醇提液有效成分群指纹图谱,确定13个共有指纹峰; 所述高效液相色谱分析条件:以甲醇-水为流动相系统,柱温30℃,进样量20μl,波长254nm,长度为250mm、直径为4.6mm的Lichrospher5-C18色谱柱,流 ...
【技术特征摘要】
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