丹参药材脂溶性成分提取物及其提取方法和含量测定方法技术

本发明专利技术公开了一种丹参药材脂溶性成分提取物的提取方法：将丹参药材放入乙醇或乙醇水溶液中，常温下进行超声提取；及由该方法所得的丹参药材脂溶性成分提取物；以及一种丹参药材提取物中脂溶性成分的含量测定方法：采用反相高效液相色谱法测定；色谱柱为反相色谱柱；流动相为甲醇和水的梯度洗脱；紫外检测。本发明专利技术的提取方法采用超声提取，避免了现有技术采用加热回流对脂溶性成分破坏较大的缺点，使脂溶性成分提取率更高，药物活性更高，且操作简便，设备要求低；采用乙醇作提取溶剂，提取效率更高。本发明专利技术的含量测定方法可同时测定丹参酮ⅡＡ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ三种主要脂溶性成分的含量，更加全面的控制产品质量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种中药材提取物及其提取方法和一种质量检测方法，具体的 涉及一种丹参药材脂溶性成分提取物及其提取方法和一种丹参药材提取物中脂 溶性成分的含量测定方法。
技术介绍
中药丹参为唇形科植物丹参(SalviamiltiorrhizaBag)的干燥根及根茎，是中药 中应用最早最广泛的药物之一。丹参始载于《神农本草经》，列为上品，性微寒， 味苦，是中医常用的活血化瘀药，具有活血通经，除烦清心，凉血消肿等功效。有关丹参的研究工作始于20世纪30年代，丹参的成分主要分为两大类 一类为水溶性酚酸类成分，在心脑血管疾病方面具有显著疗效； 一类为脂溶性 二萜醌类成分，具有很好的抗真菌，抗炎，改善血液循环及保护心脏等作用。 因这两类成分的理化性质差别较大，所以提取方法，分析测定等都不相同。随 着对丹参中的有效成分研究的不断深入，丹参的药用价值得到不断发掘。2005版《中国药典》以测定丹参酮IlA的含量为标准来控制丹参药材脂溶 性成分质量。具体的提取方法和含量测定方法为丹参药材粉末(过三号筛)， 置于锥形瓶中，加入50ml甲醇，加热回流l小时，放冷补足减失的重量。含量 测定的方法为十八垸基硅胶键合硅胶柱，以甲醇一水(75: 25)为流动相， 检测波长为270nm。采用外标法测定规定药材含丹参酮IIA的不得少于质量百分比0.20%。2005版《中国药典》中的方法的不足之处在于①提取方法采用甲醇为提 取溶剂，加热回流60分钟。因为丹参酮IIA、隐丹参酮、丹参酮I等脂溶性成 分很不稳定，加热易分解，所以加热回流的提取方法会造成对提取成分的破坏。② 作为检测药材质量的方法，该方法仅仅检测脂溶性成分中的一种成分丹参酮 IIA的含量，单一成分的含量并不能反映出整个药材的质量，所以比较片面。③ 采用等度洗脱，在流动相为甲醇水=75: 25的条件下，有两种脂溶性成分 没有分离，有色谱峰部分重叠。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是为了克服现有技术的丹参药材脂溶性成分的 提取方法对脂溶性成分破坏性较大的问题，而提供一种条件更加优化，活性成 分提取率更高的丹参药材脂溶性成分提取物的提取方法。本专利技术的丹参药材脂溶性成分提取物的提取方法，包括如下步骤将丹参 药材放入乙醇或乙醇水溶液中，常温下进行超声提取。其中，所述的乙醇或乙醇水溶液的用量较佳的为丹参药材重量的10~20倍， 更佳的为15倍；所述的乙醇水溶液的体积百分比较佳的为大于或等于80%，更 佳的为95%;所述的提取时间较佳的为30 60分钟，更佳的为30 45分钟；所 述的"常温"指自然室内温度， 一般为20 45t，较佳的温度范围为20 35'C。 提取结束后，可取上层清液经微孔滤膜过滤，即为含量测定的供试液。 本专利技术还涉及由上述方法提取制得的丹参药材脂溶性成分提取物。 本专利技术另一要解决的技术问题是为了克服现有技术的丹参药材脂溶性成分的脂溶性成分含量测定方法较片面，不能反映整体产品质量，且采用的高效液 相色谱方法分离效果不佳的问题，而提供一种条件更加优化，能更加全面的反 映药材质量、且采用的高效液相色谱方法分离效果好，检测灵敏度更高的的丹 参药材提取物中脂溶性成分的含量测定方法。本专利技术的丹参药材提取物中脂溶性成分的含量测定方法，其特征在于采 用反相高效液相色谱法测定；色谱柱为反相色谱柱；采用流动相为甲醇和水的 梯度洗脱；紫外检测；与脂溶性成分标准品平行实验，计算得各脂溶性成分的其中，所述的色谱柱较佳的为十八垸基硅烷键合硅胶色谱柱，优选具体产 品为色谱柱为Phenomenex公司的5|im、 <D4.6x 150mm的Luna-C,8柱或Agilent 公司的5ixm、 (D4.6xl50mm的Zorbax-C,8柱，其中更加优选Phenomenex公司的 5|imi、 cM.6x^0mm的Luna-ds柱。所述的流动相OTF^水的梯度洗脱的参数 较佳的为体积百分比55% 95%之间的甲醇水溶液梯度，梯度洗脱的时间为 50~60分钟；更佳的参数为体积百分比62%至95%的甲醇水溶液线性梯度， 梯度洗脱的时间为50分钟。所述的反相高效液相色谱法测定的柱温较佳的为 4(TC。所述的紫外检测的波长较佳的为255nm。本专利技术的含量测定方法，以脂溶性成分标准品(丹参酮IlA、隐丹参酮、丹 参酮I)与产品平行实验，量取色谱峰面积，按下式计算得产品中各脂溶性成 分的含量。标准品称样量x供试品峰面积含量=-xioo%供试品称样量x标准品峰面积注含量为"某种酯溶性成分的含量"，供试品峰面积为"供试品中该种酯溶性成分的峰面积"。 本专利技术所用试剂及原料均市售可得。本专利技术中，乙醇水溶液或色谱流动相 溶液的百分比均指体积百分比。本专利技术的积极进步效果在于与现有技术相比，1. 本专利技术的丹参药材脂溶性成分提取物的提取方法采用超声提取，避免了 现有技术采用加热回流对脂溶性成分破坏较大的缺点，且操作更加简 便，设备要求更低，只需带塞锥形瓶和超声波仪器即可；采用乙醇作提 取溶剂，使得提取效率更高，且提取溶剂的用量大为减少，操作更加方 便，节约了成本。2. 本专利技术的丹参药材脂溶性成分提取物中，三种主要脂溶性成分丹参酮II A、隐丹参酮、丹参酮I保留更多，提取率更高，药物活性更高。3. 本专利技术的丹参药材提取物中脂溶性成分的含量测定方法对丹参药材中 脂溶性成分有很好的分离效果，可同时测定丹参酮IIA、隐丹参酮、丹 参酮I三种主要脂溶性成分的含量，能够更全面的控制产品质量。本专利技术较佳的的提取和含量测定方法与2005版《中国药典》中的标准方法的技术方案及技术效果对比如表1所示<table>table see original document page 7</column></row><table><table>table see original document page 8</column></row><table>使用255nm作为检测波长，是使用270nm作为检测波长，三种脂溶性成分都有较大吸收的波仅是丹参酮IlA的最大吸收波长，此方法的灵敏度高。长。附图说明图1为实施例1的丹参药材脂溶性成分提取物的HPLC谱图。 图2为实施例2的丹参药材脂溶性成分提取物的HPLC谱图。 图3为实施例3的丹参药材脂溶性成分提取物的HPLC谱图。 图4为实施例4的丹参药材脂溶性成分提取物的HPLC谱图。 图5为实施例5的丹参药材脂溶性成分提取物的HPLC谱图。 图6为实施例6的丹参药材脂溶性成分提取物的HPLC谱图。 图7为实施例7的丹参药材脂溶性成分提取物的HPLC谱图。 图8为实施例8的丹参药材脂溶性成分提取物的HPLC谱图。 图9为效果实施例1中1.1采用室温超声提取法制得的丹参药材脂溶性成分提取物的HPLC谱图。图IO为效果实施例1 -1.1中，采用加热回流提取法制得的的丹参药材脂溶性成分提取物的HPLC谱图。图11为效果实施例1-1.2中，采用甲醇为提取溶剂制得的丹参药材脂溶性成分提取物的HPLC谱图。图12为效果实施例1-1.2中，采用乙醇为提取溶剂制得的丹参药材脂溶性成分提取物的HPLC谱图。图13为效果实本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种丹参药材脂溶性成分提取物的提取方法，其特征在于：将丹参药材放入乙醇或乙醇水溶液中，常温下进行超声提取。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘莉，张敏如，潘红娟，周一萌，
申请(专利权)人：上海医药工业研究院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]