一种抗胶质瘤的多肽分子及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抗胶质瘤的多肽分子，由前导肽TAT和PICK1组成。还公开了一种所述的抗胶质瘤的多肽分子在制备抗胶质瘤药物中的应用，以及所述的抗胶质瘤的多肽分子在裸鼠皮下胶质瘤模型中的应用。本发明专利技术公开的多肽分子穿透细胞膜与胞内TLR4结合，导致其内吞，进而阻断其炎症通路，实现抑制胶质瘤的发生和发展，从而为药物导向以及治疗方法相关研究领域提供指导，为胶质瘤的靶向诊断和治疗药物的制备提供理论依据。

【技术实现步骤摘要】
一种抗胶质瘤的多肽分子及其应用
本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种抗胶质瘤的多肽分子及其应用。
技术介绍
胶质瘤是最常见的神经系统原发性恶性肿瘤，占中枢神经系统肿瘤45％以上，严重威胁人类健康。世界卫生组织将其分为4级，Ⅰ、Ⅱ级为低级别胶质瘤，Ⅲ、Ⅳ级为高级别恶性胶质瘤(神经母细胞瘤)，恶性胶质瘤发病率为3/10000，但其浸润能力强，易侵袭，高复发率和死亡率的特点，患者平均生存期只有12-15个月。目前恶性胶质瘤主要采取手术切除、放疗、化疗等治疗方式，但患者的预后仍较差，生存期短。随着脑肿瘤研究的发展，如何准确、靶向的针对脑胶质瘤治疗成为一个重大问题。针对现存问题，亟需一种能够准确靶向脑胶质瘤的分子或药物，成为如何有效治疗脑肿瘤的一个重要研究方向，也是解决现有问题的重要途径之一。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种抗胶质瘤的多肽分子，以解决上述现有技术存在的问题，该多肽分子具有靶向作用，大部分脑胶质瘤中PICK1基因都属于低表达，通过穿透细胞膜与胞内TLR4结合，导致其内吞，进而阻断其炎症通路，影响胶质瘤的发生和发展。本专利技术还有一个目的是提供一种抗胶质瘤的多肽分子在制备抗胶质瘤药物中的应用，由于该多肽分子能够准确靶向脑胶质瘤，解决当前的不能准确靶向胶质瘤的问题，实现了脑胶质瘤的诊断或指导临床用药。本专利技术还提供一种抗胶质瘤的多肽分子在裸鼠皮下胶质瘤模型中的应用，在动物水平上验证了多肽分子可以准确靶向脑胶质瘤，抑制脑胶质瘤细胞的生长。为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：本专利技术提供一种抗胶质瘤的多肽分子，由前导肽TAT和PICK1通过酰胺键连接组成。该多肽委托金斯瑞生物科技有限公司合成，多肽分子的化学结构特征见如图1，图2所示。优选的是，所述前导肽TAT氨基酸序列为YGRKKRRQRRR，所述PICK1的氨基酸序列为YGRKKRRQRRRVPGKVTLQKDAQ。本专利技术还提供一种所述的抗胶质瘤的多肽分子在制备抗胶质瘤药物中的应用，所述多肽分子穿透细胞膜与胞内TLR4结合，导致其内吞，阻断炎症通路以抑制胶质瘤。优选的是，所述多肽分子用于抑制胶质瘤细胞C6迁移。优选的是，所述多肽分子用于抑制胶质瘤细胞C6的增殖。本专利技术还提供一种所述的抗胶质瘤的多肽分子在裸鼠皮下胶质瘤模型中的应用，用于抑制裸鼠皮下胶质瘤模型中胶质瘤细胞的生长。本专利技术公开了以下技术效果：本专利技术公开的PICK1是一种多功能结合蛋白，与中枢神经系统疾病、疼痛、胰岛素分泌、肿瘤发生发展密切相关，PICK1能够与磷脂双分子层及多种跨膜受体的C末端结合，调控受体的细胞膜上的表达和内吞。PICK1在脑胶质瘤组织中存在低表达现象，并通过TLR4/MyD88/NF-κB通路维持胶质瘤细胞炎症反应。而本专利技术通过TAT前导肽作为穿透肽，设计合成的TAT-PICK1多肽，该多肽能够穿透细胞膜与胞内的TLR4相结合，导致其部分发生内吞，从而阻断MyD88依赖的炎症通路，影响胶质瘤的发生和发展，该多肽以其能够快速转导并激活肿瘤细胞内已失活的转录因子，激活转录因子相关信号通路，从而抑制肿瘤的生长，为药物导向以及治疗方法相关研究领域提供指导。本专利技术所涉及的TAT-PICK1多肽分子可穿透细胞膜、在胞内作用影响胶质瘤的发展，可用于胶质瘤的靶向诊断和治疗药物。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术TAT-PICK1多肽的合成高效液相色谱图；图2为本专利技术TAT-PICK1多肽的合成质谱图；图3为本专利技术TAT-PICK1多肽对胶质瘤细胞C6抑制迁移的结果；A：对照组染色结果；B：实验组染色结果；C：对照组和实验组中细胞数量的变化情况；图4为本专利技术TAT-PICK1多肽对胶质瘤细胞C6抑制增殖的结果；图5为本专利技术TAT-PICK1多肽在裸鼠皮下移植瘤模型中，抑制肿瘤生长的效果。具体实施方式现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。在不背离本专利技术的范围或精神的情况下，可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本专利技术的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。实施例1TAT-PICK1纯度用分析型高效液相色谱仪(流速：1ml/min)分析。具体为：分析性高效液相色谱仪的型号：安捷伦1200，所采用色谱柱的型号：AngilentEclipseXDB-C18Analytical,5um,4.6X150006Dm。色谱操作条件：线性梯度洗脱，洗脱液由流动相A液和B液组成。流动相A液：体积百分浓度为0.1％的三氟乙酸水溶液(水为溶剂)，流动相B液：体积百分浓度为0.1％的三氟乙酸乙腈溶液(乙腈为溶剂)。洗脱时间共12min，洗脱流速为1mL/min，紫外检测波长220nm。分析型高效液相色谱仪检测结果显示：所得TAT-PICK1的纯度为97.2％。实施例2TAT-PICK1化学结构由MALDI-TOF质谱进行表征，TAT-PICK1的质谱表征结果如图2所示。分子量(Mw)：2825.30，其他三个峰值同样能够证明TAT-PICK1的分子量都是一致的。实施例3TAT-PICK1多肽分子抑制胶质瘤细胞C6的迁移利用Transwellplate(Corning公司，产品号#3422)检测TAT-PICK1多肽对胶质瘤细胞C6迁移能力的影响。细胞迁移实验根据Transwellplate说明书进行操作。主要操作步骤如下：1)将已消化计数好的胶质瘤细胞C6及TAT-PI本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗胶质瘤的多肽分子，其特征在于，由前导肽TAT和PICK1通过酰胺键连接组成。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗胶质瘤的多肽分子，其特征在于，由前导肽TAT和PICK1通过酰胺键连接组成。


2.如权利要求1所述的抗胶质瘤的多肽分子，其特征在于，所述前导肽TAT氨基酸序列为YGRKKRRQRRR，所述PICK1的氨基酸序列为YGRKKRRQRRRVPGKVTLQKDAQ。


3.一种如权利要求1-2任一项所述的抗胶质瘤的多肽分子在制备抗胶质瘤药物中的应用，其特征在于，所述多肽分子穿透细胞膜与胞内TLR4结合，导致其内吞，阻断炎症...

【专利技术属性】
技术研发人员：王震，张威，李凯强，王倩妮，陈秉宇，郝珂，程晶晶，吴玲玲，
申请(专利权)人：浙江省人民医院，
类型：发明
国别省市：浙江;33