一种螺旋霉素产生菌、可利霉素产生菌、构建方法、应用及提高产物产量的方法技术

本发明专利技术属于微生物基因工程领域，公开了一种螺旋霉素产生菌、可利霉素产生菌、构建方法、应用及提高产物产量的方法。本发明专利技术提供的螺旋霉素产生菌的菌株中的Lrp基因失活(Δlrp‑SP)，菌株的保藏号为CGMCC No.16056；本发明专利技术提供的可利霉素产生菌的菌株中的Lrp基因失活(Δlrp‑BT)，菌株的保藏号为CGMCC No.16055。本发明专利技术通过使Lrp基因失活，提高了螺旋霉素和可利霉素的产量，尤其是可利霉素的主组分4”‑异戊酰螺旋霉素Ⅲ的产量和比例明显提高。

The invention relates to a spiramycin producing strain, a clindamycin producing strain, a construction method, an application and a method for increasing the product yield

【技术实现步骤摘要】
一种螺旋霉素产生菌、可利霉素产生菌、构建方法、应用及提高产物产量的方法
本专利技术属于微生物基因工程领域，涉及一种螺旋霉素产生菌、可利霉素产生菌、构建方法、应用及提高产物产量的方法，具体涉及调控基因的运作与提高抗生素产量及有效组分的方法及其应用。
技术介绍
可利霉素曾用名生技霉素、必特螺旋霉素，是利用合成生物学技术，将碳霉素产生菌(Streptomycesthermotolerans)中4”-异戊酰基转移酶基因(ist)在螺旋霉素产生菌(StreptomycesspiramyceticusF21)中进行克隆表达，获得的基因工程菌(StreptomycesspiramyceticusWSJ-1)的发酵产物[专利号：ZL971044406、ZL021487715]。可利霉素为多组分抗生素，以4”-异戊酰螺旋霉素Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ为主组分，其中Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ组分以3位OR基团，依次为丙酰基、乙酰基、羟基而命名。可利霉素结构式如下：可利霉素结构式异戊酰螺旋霉素Ⅲ：R＝COCH2CH3R′＝COCH2CH(CH3)2异戊酰螺旋本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种螺旋霉素产生菌，其特征在于，菌株中的Lrp基因失活，所述菌株的保藏号为CGMCC No.16056。/n

【技术特征摘要】
1.一种螺旋霉素产生菌，其特征在于，菌株中的Lrp基因失活，所述菌株的保藏号为CGMCCNo.16056。


2.一种可利霉素产生菌，其特征在于，菌株中的Lrp基因失活，所述菌株的保藏号为CGMCCNo.16055。


3.根据权利要求1所述的螺旋霉素产生菌，或者权利要求2所述的可利霉素产生菌，其特征在于，所述的Lrp蛋白的氨基酸序列如Seq.2所示；
优选的，Lrp基因的核苷酸序列如Seq.1所示。


4.一种螺旋霉素产生菌和/或可利霉素产生菌的构建方法，其特征在于，包括：
(1)构建用于将Lrp基因失活的重组载体，导入到螺旋霉素产生菌和/或可利霉素产生菌中；
(2)筛选获得Lrp基因失活的重组菌。


5.根据权利要求4中所述的构建方法，其特征在于，以螺旋霉素产生菌或可利霉素产生菌基因组为模板，以完全或部分敲除Lrp基因为原则，在适合位点设计引物，PCR扩增左右臂基因片段，克隆至敲除载体，构建重组载体，导入螺旋霉素产生菌和/或可利霉素产生菌中，通过抗性和传代筛选获得Lrp基因失活的重组菌。


6.一种螺旋霉素产生菌在提高螺旋霉素产量中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：赫卫清，赵小峰，姜勋雷，姜勋东，
申请(专利权)人：沈阳福洋医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁;21