一种昆虫细胞培养基及其制备方法技术

本发明专利技术涉及生物制药技术领域，具体涉及一种昆虫细胞培养基及其制备方法。该培养基有效成分包括氨基酸、维生素、无机盐、碳源、脂类物质和功能添加剂；其中功能添加剂包括腐胺、抗坏血酸磷酸酯镁、乙醇胺、次黄嘌呤、酵母提取物、棉籽水解物、丙酸钠、泊洛沙姆188、柠檬酸铁、柠檬酸钠、丙酮酸钠。本发明专利技术公开的培养基无血清、无蛋白，能避免添加血清带来的潜在风险及利于下游重组蛋白的纯化；同时培养基不含动物源添加物，适合生物药物的生产；本发明专利技术公开的培养基活细胞密度与细胞存活率高，蛋白表达量高，适合重组蛋白和疫苗的生产。

An insect cell culture medium and its preparation

【技术实现步骤摘要】
一种昆虫细胞培养基及其制备方法
本专利技术涉及生物制药
，具体涉及一种昆虫细胞培养基及其制备方法。
技术介绍
昆虫细胞表达系统是重组蛋白生产的一种重要表达系统，以杆状病毒为载体，昆虫细胞表达系统已经被广泛应用于重组蛋白的表达，此外，昆虫细胞表达系统还是表达病毒样颗粒疫苗的最佳系统，已成功开发了多种人用和动物用疫苗。常用的昆虫细胞有Sf-9细胞和HighFive细胞，常用于杆状病毒表达系统的重组蛋白表达。传统的商业化昆虫细胞培养基需要添加大量的血清或血清白蛋白用于辅助细胞生长。但培养基添加血清存在血清价格昂贵、易被支原体及病毒污染、血清批次不一致等缺点；此外血清中含有大量的蛋白质不利于重组蛋白的下游分离纯化，造成重组蛋白的回收率和纯度较低，不能满足下游的需求。总体而言，培养基添加蛋白成分，一方面增加培养基成本，另外一方面给下游蛋白纯化带来困难，用无血清无蛋白培养基培养昆虫细胞成为规模化培养的趋势。目前虽然已经开发出一些用于培养昆虫细胞的无血清培养基，但这些培养基往往添加有蛋白成分，导致成本过高，下游蛋白纯化困难，并且不能适用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种昆虫细胞培养基，其特征在于，其有效成分包括氨基酸、维生素、无机盐、碳源、脂类物质和功能添加剂；其中功能添加剂包括腐胺、抗坏血酸磷酸酯镁、乙醇胺、次黄嘌呤、酵母提取物、棉籽水解物、丙酸钠、泊洛沙姆188、柠檬酸铁、柠檬酸钠、丙酮酸钠。/n

【技术特征摘要】
1.一种昆虫细胞培养基，其特征在于，其有效成分包括氨基酸、维生素、无机盐、碳源、脂类物质和功能添加剂；其中功能添加剂包括腐胺、抗坏血酸磷酸酯镁、乙醇胺、次黄嘌呤、酵母提取物、棉籽水解物、丙酸钠、泊洛沙姆188、柠檬酸铁、柠檬酸钠、丙酮酸钠。


2.如权利要求1所述的昆虫细胞培养基，其特征在于，所述功能添加剂各组分的浓度为：腐胺0.15～0.6mg/L、抗坏血酸磷酸酯镁0.5～3mg/L、乙醇胺3.5～10.0mg/L、次黄嘌呤3.5～10.5mg/L、酵母提取物3000～8000mg/L、棉籽水解物1000～3000mg/L、丙酸钠90～900mg/L、泊洛沙姆1881000～2500mg/L、柠檬酸铁50～150mg/L、柠檬酸钠70～200mg/L、丙酮酸钠600～1800mg/L。


3.如权利要求2所述的昆虫细胞培养基，其特征在于，所述氨基酸的组成及各组分含量包括，甘氨酸250～650mg/L、丙氨酸150～370mg/L、精氨酸盐酸盐400～885mg/L、天冬酰胺150～600mg/L、天冬氨酸150～600mg/L、半胱氨酸20～75mg/L、谷氨酸200～600mg/L、谷氨酰胺300～800mg/L、组氨酸1500～3500mg/L、异亮氨酸20～75mg/L、亮氨酸50～150mg/L、赖氨酸盐酸盐350～850mg/L、蛋氨酸25～75mg/L、苯丙氨酸100～175mg/L、脯氨酸250～400mg/L、丝氨酸450～600mg/L、苏氨酸100～250mg/L、色氨酸50～150mg/L、酪氨酸二钠盐30～80mg/L、缬氨酸70～150mg/L、β-丙氨酸150～300mg/L。


4.如权利要求3所述的昆虫细胞培养基，其特征在于，所述维生素的组成及各组分含量包括，维生素H0.02～0.08mg/L、D-泛酸钙0.3～1.0mg/L、叶酸0.03～0.1mg/L、烟酸0.03～0.1mg/L、对氨基苯酸0.03～0.1mg/L、、维生素B60.03～0.1mg/L、维生素B20.03～0.1mg/L、维生素B10.03～0.1mg/L、i-肌醇...

【专利技术属性】
技术研发人员：王天云，赵春鹏，林艳，米春柳，杨献军，
申请(专利权)人：河南普诺易生物制品研究院有限公司，新乡医学院，
类型：发明
国别省市：河南;41