【技术实现步骤摘要】
一种提高哺乳动物细胞附着体载体转基因表达水平的方法
[0001]本专利技术涉及基因工程
,尤其涉及一种提高哺乳动物细胞附着体载体转基因表达水平的方法。
技术介绍
[0002]基因转移载体在基因治疗中起着关键的作用,非病毒附着体载体可以附着而非整合到宿主细胞染色体上,克服了病毒载体及整合载体带来的副作用,是目前安全、理想的用于基因治疗的表达载体。非病毒附着体载体是以附着在染色体外的形式存在的一类不含编码病毒蛋白序列的载体。1999年研究者将由猿猴病毒40(simianvirus 40,SV 40)编码的大T抗原介导的病毒附着体载体中的SV 40替换为人β
‑
干扰素核基质附着区(matrix attachment region,MAR),成功构建基于MAR的pEPI质粒载体,这是第一个完全采用哺乳动物序列的非病毒附着体载体。自第一代非病毒附着体载体构建以来,研究者通过截短核基质附着区元件、减少CpG岛的数量、选择合适的启动子、使用调控元件等一系列措施调控其表达水平和稳定性。如申请公布号为CN1064979 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种介导载体附着的辅助基因,其特征在于,所述辅助基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。2.一种包含权利要求1所述介导载体附着的辅助基因的真核表达载体。3.根据权利要求2所述的真核表达载体,其特征在于,所述真核表达载体包括基础载体,所述基础载体包括pIRES
‑
neo。4.权利要求1所述的一种介导载体附着的辅助基因在提高哺乳动物细胞附着体载体转基因表达水平中的应用。5.一种提高哺乳动物细胞附着体载体转基因表达水平的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将权利要求1所述的介导载体附着的辅助基因克隆于pIRES
‑
neo载体中,得辅助基因重组表达载体;(2)将...
【专利技术属性】
技术研发人员:王小引,王天云,张玺,王耀坤,李树军,王浩民,朱嘉懿,姬梦莹,杨献军,
申请(专利权)人:河南普诺易生物制品研究院有限公司,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。