新冠病毒核酸重组酶介导等温扩增侧向层析胶体金快速检测方法及试纸条技术

一种新冠病毒核酸重组酶介导等温扩增侧向层析胶体金快速检测用试纸条，包括衬板和在衬板上依次衔接的样品垫、金标结合垫、硝酸纤维膜和吸水垫；所述硝酸纤维膜上设有检测线和质控线；质控线上喷涂羊抗鼠抗体，检测线上喷涂链霉亲和素；金标结合垫上喷涂有胶体金标记的鼠抗异硫氰荧光素抗体。样品经过酶介导等温扩增获得的扩增产物滴加到样品垫，根据颜色反应即可获得检测结果。本发明专利技术的检测结果的判读是根据胶体金试纸条上的检测线是否显色进行判别，无需复杂的专业背景，通过肉眼判读即可完成。

Rapid detection method and test strip of colloidal gold for isotherm amplification lateral chromatography mediated by new coronavirus RNA recombinase

【技术实现步骤摘要】
新冠病毒核酸重组酶介导等温扩增侧向层析胶体金快速检测方法及试纸条
本专利技术属于病毒检测
，涉及一种新冠病毒核酸重组酶介导等温扩增侧向层析胶体金快速检测方法及试纸条。
技术介绍
目前新型冠状病毒的核酸检测是对病例确诊的唯一手段，实时荧光定量RT-PCR技术被广泛运用，获批的检测试剂生产厂家很多,产能也满足实际需求，但该方法需要BSL-2级实验室、实时荧光定量PCR仪和核酸提取仪等苛刻条件和昂贵设备，且检测周期较长(3-4小时)，试剂耗材成本高。目前只能在部分市级疾控中心和三甲医疗机构中开展，检测能力不能满足实际需求，急需一种能在普通实验室操作、无需高档设备、快速检测、直接判读的核酸检测方法。等温扩增是指在特殊的重组酶的作用下，对目标模板基因在等温的条件下实现指数级扩增的反应。因等温扩增反应是在等温的条件下实现的扩增反应，因此，无需专业的扩增仪器即可实现目标基因的扩增，从而有利于快速定性和下游的定量分析。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种新冠病毒核酸重组酶介导等温扩增侧向层析胶体金快速检测方法及本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新冠病毒核酸重组酶介导等温扩增侧向层析胶体金快速检测用试纸条，包括衬板和在衬板上依次衔接的样品垫、金标结合垫、硝酸纤维膜和吸水垫；其特征在于：所述硝酸纤维膜上设有检测线和质控线；质控线上喷涂羊抗鼠抗体，检测线上喷涂链霉亲和素；金标结合垫上喷涂有胶体金标记的鼠抗异硫氰荧光素抗体；所述金标结合垫的制备方法包括：/n步骤1：用柠檬酸三钠还原剂将氯金酸还原制成胶体金溶液；/n步骤2：用0.1mol/L的K

【技术特征摘要】
1.一种新冠病毒核酸重组酶介导等温扩增侧向层析胶体金快速检测用试纸条，包括衬板和在衬板上依次衔接的样品垫、金标结合垫、硝酸纤维膜和吸水垫；其特征在于：所述硝酸纤维膜上设有检测线和质控线；质控线上喷涂羊抗鼠抗体，检测线上喷涂链霉亲和素；金标结合垫上喷涂有胶体金标记的鼠抗异硫氰荧光素抗体；所述金标结合垫的制备方法包括：
步骤1：用柠檬酸三钠还原剂将氯金酸还原制成胶体金溶液；
步骤2：用0.1mol/L的K2CO3调节胶体金溶液的pH值为8.0，将1mLpH值为8.0的胶体金溶液加入1.5mL离心管中，然后加入1μL浓度为1mg/mL的抗异硫氰荧光素单克隆抗体溶液，在旋转混合仪上室温反应1h，然后加入80μL的质量分数为10％的BSA溶液，继续在旋转混合仪上室温反应30min，得到金标抗体溶液；将金标抗体溶液10000rpm离心10min；吸取凝聚的金颗粒形成的沉淀20μL，最后用80μL重悬液将吸取出的沉淀重悬，4℃保存备用，获得异硫氰荧光素胶体金标记抗体；
步骤3：将6μL的异硫氰荧光素胶体金标记抗体，吸附于玻璃纤维棉中，37℃干燥，制备的异硫氰荧光素金标结合垫为金标结合垫。


2.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：李卫东，孙永，何军，陈伟，张竹慧，史永林，撒楠，俞俊岭，
申请(专利权)人：安徽省疾病预防控制中心省健康教育所，
类型：发明
国别省市：安徽;34