生物样品的成像方法和相应的探针技术

使用显微镜的生物样品的成像方法，例如荧光光学显微镜、电子显微镜或关联显微镜，其提供了使用成像探针来获得图像，在图像中可能可以识别成像探针和/或与它们相关的分子。本发明专利技术还涉及可以功能化的成像探针，所述探针可以用于CLEM实验和免疫细胞化学实验中。

Imaging methods and corresponding probes of biological samples

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】生物样品的成像方法和相应的探针
本专利技术的制剂涉及使用可用于显微镜，特别是荧光光学显微镜、电子显微镜或关联显微镜(CLEM光电关联显微镜)，中的成像探针对生物样品进行成像的方法。此处和下文中，成像我们指获取生物样品或其一部分(例如细胞)的图像，其中可以识别成像探针和/或与之相关的分子。本专利技术还涉及用于通过显微镜对生物样品进行实验的成像探针，例如免疫细胞化学实验或鉴定目标特定分子的实验。
技术介绍
CLEM是生物领域的主要显微镜技术之一，因为它通常可以可视化、识别和跟踪生物样品中特定分子在由几十微米到几纳米定义的空间尺度上的运动。该技术结合了荧光光学显微镜(FOM)和透射电子显微镜(TEM)的优势，从而能够高精度地在生物样品中定位目标特定分子。其他电子显微镜技术提供了进行免疫细胞化学实验的机会，在该特定领域中也称为免疫金，在纳米尺度上定位生物样品中的特定抗原。在这些实验中，使用的探针通常由胶体金纳米颗粒与能识别并结合特定抗原的抗体或蛋白质共轭而成。在这种情况下，变得有必要能够使用可用于CLEM本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种使用显微镜对生物样品进行成像的方法，其特征在于，提供在所述生物样品中使用铂纳米颗粒、氧化剂和可氧化底物，以获得定位在所述铂纳米颗粒周围的电子致密的亲锇性沉淀物，所述亲锇性沉淀物通过所述可氧化底物的氧化相获得，所述可氧化底物被所述铂纳米颗粒和所述氧化剂激活。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170728 IT 1020170000872911.一种使用显微镜对生物样品进行成像的方法，其特征在于，提供在所述生物样品中使用铂纳米颗粒、氧化剂和可氧化底物，以获得定位在所述铂纳米颗粒周围的电子致密的亲锇性沉淀物，所述亲锇性沉淀物通过所述可氧化底物的氧化相获得，所述可氧化底物被所述铂纳米颗粒和所述氧化剂激活。


2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述可氧化底物包括：选自由3,3’,5,5'-四甲基联苯胺(TMB)、3,3'-二氨基联苯胺(DAB))、对苯二胺-邻苯二酚和高香草酸所组成的组中的至少一种化合物。


3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述氧化剂选自：由过氧化氢、叔丁基过氧化物、叔丁基过氧化氢、过氧乙酸、过氧化苯甲酰、过氧化氢异丙苯、花生四烯酸5-氢过氧化物和十二烷基2-甲氧基丙烷-2-偶酰过氧化物组成的组。


4.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述氧化剂是过氧化氢。


5.如前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述铂纳米颗粒直接或间接地与至少一个能够与所述生物样品中存在的特定物质依次结合的相关分子结合，所述相关分子选自：由抗体、蛋白质、适体、肽、糖、多糖、生物分子和化合物组成的组。


6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法提供在生物样品中使用金和/或银纳米颗粒，所述金和/或银纳米颗粒与至少一个相关分子直接或间接结合，所述至少一个相关分子不同于与铂纳米颗粒结合的所述相关分子中的至少一个。


7.如前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述铂纳米颗粒的尺寸等于或小于100nm。

【专利技术属性】
技术研发人员：罗伯托·马洛塔，蒂齐亚诺·卡特拉尼，毛罗·莫格利亚内蒂，埃莉莎·德卢卡，皮尔·保罗·皮穆帕，
申请(专利权)人：意大利学院科技基金会，
类型：发明
国别省市：意大利;IT