本发明专利技术提出了一种凝结芽孢杆菌菌株及其应用。该凝结芽孢杆菌菌株(Bacillus coagulans)，其保藏编号为CGMCC No.17374。其应用于微生物制剂领域。本发明专利技术筛选的菌株具有高产芽孢、高产酸的特性；与其他同属菌株具有明显的差异，芽孢形成率非常高，耐热性能好，发酵水平高；其是一种益生菌，具有一般乳酸菌维持肠道平衡，刺激免疫，提高机体健康水平等作用。本发明专利技术中以其为核心成分制备的胶囊制剂，具有良好的治疗、调节多种肠道不适症状的功能。
A Bacillus coagulans strain and its application
【技术实现步骤摘要】
一种凝结芽孢杆菌菌株及其应用
本专利技术涉及微生物学领域，特别是指一种凝结芽孢杆菌菌株及其应用。
技术介绍
肠道，被称为人体的第二大脑，肠道健康的重要性不言而喻。对肠道功能的认知，除了常见的消化、营养吸收两项外，还有一直被大多数人忽视的免疫、排毒功能。人一生中摄入的食物大约为70吨，是体重的1000多倍，这些食物都是靠肠道处理。成年人大肠与小肠的总长度约有6至7米，是我们进行营养吸收的重要器官，人体所需的各种营养物质中有99％是从肠道吸收进入。再者，肠道是人体最大的免疫器官，肠道树突细胞等众多免疫细胞和粘液层、上皮抗菌蛋白等一些免疫效应器参与肠道黏膜免疫应答，抵御大量摄入或体内产生的毒素及有害物质。同时，其也是人体最大的排毒器官，人体80％以上的毒素有肠道排出。基于肠道健康对人体整体健康举足轻重的作用，世界胃肠病学组织(WGO)在2005年设立了“世界肠道健康日”。然而，随着我国社会经济发展，众多社会因素都威胁到了肠道的健康——父母焦虑症背后的儿童抗生素滥用、以瘦为美审美观下的女性泻药依赖、工作生活压力下肠易激综合征(ibs)发病率上升等等。研究显示，我国54.5％的人口存在肠道问题，成人慢性便秘的患病率平均为14％，女性较男性高，可达17.4％，育龄期慢性便秘女性排便次数减少的发生率明显高于中老年组。不当使用促排泄药物，加重便秘、增加肠癌风险和肠道功能紊乱；临床上不遵医嘱随意使用药物，患者也易形成泻药依赖。除此之外，现代生活方式更催生了肠易激综合征(Ibs)：整个肠道对刺激的生理性反应有过度或反常现象，如腹痛、腹泻、便秘或腹泻与便秘反复交替。人群Ibs患病率为11.2％，近68％的Ibs患者症状持续存在超过12年，造成生活质量下降，甚至伴随精神心理障碍。权威调查显示，我国儿童肠道健康现状不佳，2周腹泻发病率为7％、便秘总体患病率为4.7％。家长对抗生素效果的依赖，使得儿童滥用抗生素率高达19.9％，64.4％的儿童应用抗生素后将出现肠道菌群失调。长期的肠道不健康，使得恶性疾病的发生率持续走高。以结直肠癌为例，2015年统计数据显示，我国结直肠癌发生率、死亡率在所有恶性肿瘤中均居第5位，且结肠癌发病率上升显著。我国已成为全球结直肠癌年均新发病例数最多的国家。上述肠道问题的出现，肠道菌群失衡是主要原因。人体肠道的内腔布满绒毛、微绒毛，其全部展开的总面积可以达到200平方米。在肠道巨大的表面积上，布满了种类超过1000种、数量高达100万亿个肠道细菌，几乎是人体细胞总数的10倍。肠道菌群分为三种：对人体有益的有益菌(乳酸菌、双歧杆菌、酵母菌为代表)、随着人体状况的变化而变化的数量较多的中性菌、容易引发身体疾病的有害菌(产气荚膜梭菌等)。这些细菌连同周围环境构成肠道微生态系统。睡眠质量差、压力大、饮食缺乏蔬果膳食纤维、缺乏运动、依赖泻药造成蒽醌类物质摄入过多、抗生素滥用等主客观原因，造成肠道微生态系统被改变，机体的“体外器官”—肠道菌群的稳定性被破坏，有益菌数量下降，有害菌数量增多。肠道菌群的不稳定直接导致人体健康受损，长期积累引发机体的较大病变，并恶性循环。对症下药，有益菌的补充成为肠道健康的相当重要及热门的研究方向。2001年，联合国粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)共同提出益生菌的定义：益生菌是活的微生物，当摄入足够数量时，能对宿主发挥有益健康的作用。其代表性菌株包括：乳酸杆菌、双歧杆菌、凝结芽孢杆菌。乳酸杆菌、双歧杆菌是目前大众认知最多的益生菌，食品、动物饲料、临床上等方向均有广泛应用。因其不产芽孢的细菌结构限定，乳酸杆菌、双歧杆菌存在不耐高温、对外界环境抵抗能力差的特性，常温条件下的较短贮藏时间就会造成大量活菌凋亡。人体对益生菌的补充大多从消化道摄入，经过胃部强酸性环境及消化酶的处理后到达肠道的双歧杆菌和乳酸杆菌，存活率分别只有5.2％，和5.5％。因此，双歧杆菌和乳酸杆菌的应用，即使做到保持低温储存的外部环境，经人体摄入后其益生效果也会大打折扣，无法达到各类产品包装宣传的效果。J.R.Endres等对凝结芽孢杆菌GenedenBC30TM进行了毒理学安全性评估，得到“可安全用于长期人类食用”的结论。美国食品药品监督管理局(FDA)与欧洲欧盟食品安全局(EFSA)均对凝结芽孢杆菌通过了安全资格认定(QPS)。在日本、美国、欧洲等地，凝结芽孢杆菌已经被应用于药品、食品和饲料添加剂等行业。我国农业部亦于2004年在第372号公告中，批准了天津市新星兽药厂将凝结芽孢杆菌TQ33作为仔鸡和生长育肥猪的食品添加剂的申请。2005年，由青岛东海药业有限公司生产的凝结芽孢杆菌活菌片，也获得国家食品和药品监督管理局新药证书。凝结芽孢杆菌与双歧杆菌和乳酸杆菌最大不同之处在于，它生成的芽孢能生存于强酸或强碱等恶劣环境中。有数据显示凝结芽孢杆菌体外100度高温测试10分钟后的存活率达96％以上。研究表明，凝结芽孢杆菌菌株可以在高温、胃酸和胆汁酸等极端条件下生存，而通常食用的益生菌在此条件下会大量死亡。凝结芽孢杆菌在口服后能顺利通过胃酸和消化酶等多重关口并进入肠道“定居”。它们在那里能快速复苏，重新成为活菌。科学研究也表明，凝结芽孢杆菌在缺氧环境下依然可以保持足够的活性，在人或动物肠道内的低氧环境中生长良好，而且能将食物中的糖类物质充分转化为D-型或D，L-型乳酸，而这些乳酸能有效杀死或抑制肠道中的有害微生物。定植后的凝结芽孢杆菌及其产物(包括乳酸、细菌素等)调节肠道内环境，抑制致病菌生长，促进其他有益菌的增加并带动中性菌的有益功能，提高机体免疫能力，健康状态得到改善，发挥减少使用或者替代抗生素的药用作用，从而有效解决泻药依赖及抗生素滥用引起的长期肠道问题。
技术实现思路
本专利技术提出一种凝结芽孢杆菌菌株及其应用。本专利技术的技术方案是这样实现的：一种凝结芽孢杆菌菌株(Bacilluscoagulans)，其保藏编号为CGMCCNo.17374。所述的菌株，其16SrDNA序列如SEQIDNO:1所示。培养所述的凝结芽孢杆菌菌株得到的发酵产物。一种发酵产物的制备方法，包括：一级培养、二级培养、三级扩大培养和固体发酵。所述的一级培养包括：将原始菌种接种至一级斜面培养基上，30℃～45℃培养20～48h；所述一级斜面培养基为按下述比例配制的混合液(g/L)：酵母粉6.0～15.0g/L蛋白胨6.0～15.0g/L葡萄糖2.0～10.0g/L氯化钠5.0～10.0g/L磷酸氢二钾1.0～5.0g/L硫酸锰0.1～3.0g/LpH6.6～7.2。所述二级培养包括：将所述一级培养的凝结芽孢杆菌单菌落接种于二级培养液中，装液量为50～100mL/200mL/300mL/500mL，30℃～45℃、150～300rpm/min条件下培养20～48h得到二级凝结芽孢杆菌种子液；所述的二级液体培养基为按下述比例配制的混合液(g/L)：葡萄糖10.0～20.0g/L氯化钠1.0～5.0g/L酵母粉3.0～12.0g/L胰蛋白胨10.0～本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种凝结芽孢杆菌菌株(Bacillus coagulans)，其保藏编号为CGMCC No.17374。/n
【技术特征摘要】
1.一种凝结芽孢杆菌菌株(Bacilluscoagulans)，其保藏编号为CGMCCNo.17374。
2.如权利要求1所述的菌株，其特征在于，其16SrDNA序列如SEQIDNO:1所示。
3.培养权利要求1所述的凝结芽孢杆菌菌株得到的发酵产物。
4.一种如权利要求3所述的发酵产物的制备方法，包括：
一级培养、二级培养、三级扩大培养和固体发酵。
5.含有如权利要求3所述的发酵产物的微生物制...
【专利技术属性】
技术研发人员：王云龙，吴勃，王天珍，徐永雷，王云祥，
申请(专利权)人：杭州保安康生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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