一株具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术属于微生物技术领域。本发明专利技术公开了一株具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌，其命名为WHH2580，于2019年10月23日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心保藏，其微生物保藏编号为：CGMCC No.18730。微生物分类命名为瑞士乳杆菌Lactobacillus helveticus。本发明专利技术还公开了一种具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌的应用。本发明专利技术中菌株活菌形式和灭活形式均具备优良的黏附性能，且通过提高调节机体的脏器指数、非特异性免疫及特异性免疫反应来提高机体免疫力；本发明专利技术的乳杆菌具有免疫调节作用，如摄取相应组合物，则可通过赋活免疫功能来改善免疫功能下降。

A high adhesive Lactobacillus suis with enhanced immunity and its application

【技术实现步骤摘要】
一株具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌及其应用
本专利技术涉及微生物
，尤其是涉及一株具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌及其应用。
技术介绍
益生菌是能够在人体肠道内发挥生理功能而有助于健康的有益微生物，它们被宿主摄入后黏附于肠道粘膜上皮细胞，定殖形成稳定菌群。经大量研究证明，一些乳酸菌种属可对宿主产生有益作用，不仅有助于维持肠道微生态的平衡，营养物质的吸收，还可以调节宿主免疫功能，促进肠道粘膜屏障功能完善以及增强抗感染的能力。黏附不仅是益生菌在肠道中定殖的前提，还能引起宿主细胞发挥一定的生物学效应，参与正常菌群生物屏障形成的机制，具有重要的生态学意义。在益生菌制品的开发过程中，外源性的益生菌能否在肠道中黏附和定殖时评价其效果的重要指标之一。随着人们生活和工作节奏的加快，很大一部分人群由于饮食营养不均衡、工作压力大、缺乏运动等，不同程度上出现体质虚弱、营养不良、精神萎靡、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍等免疫力低下的现象。预防疾病最重要的手段是增强机体免疫力。对于免疫力低下的人群来说，尤其是儿童，由于其生理结构和功能发育的不完善，更容易受到外来病原菌的威胁，再加上一些抗生素的滥用，则更需要较为安全的微生态食品(益生菌产品)为其增强免疫力。目前对于免疫力的调节手段主要是通过补充各种各样的维生素、氨基酸等，服用期间是有效果的，但停用很短一段时间后，免疫力又会下降，没有达到从根本上改善人体脏器机能，使人体自身具备免疫力的功效。近年，大量的研究表明，肠道微生物对于调节人体健康有着重要的作用。肠道是机体最大的免疫器官，机体50％以上的淋巴组织分布于肠黏膜，并且，益生菌可以通过抑制病原微生物的生长来平衡局部微生物群，或益生菌通过分泌各种酶和酸刺激肠道黏膜和肠上皮细胞代谢，进而增强局部和全身免疫反应。因此，或许可从肠道微生物入手，尝试找到调节免疫力的新方法，以克服现有治疗药物以及治疗方法副作用的缺陷。益生菌可以冻干菌粉、乳制品发酵剂等形式应用于食品、保健品、膳食补充剂和药品中，并以多种产品形式呈现，满足消费者的营养健康需求。目前，市场上多数声称可提高免疫力的益生菌产品中所用的菌株多为国外益生菌。许多研究显示乳酸菌具有免疫调节功效。然而益生菌功效具有菌株特异性，且自然界尚有许多乳酸菌未被发现或予以充分的研究。我国地大物博，发酵传统食品资源丰富，从中进行可提高免疫力益生菌的挖掘和筛选，开发自主知识产权菌株，从而制造适合国人体质和提高免疫力需要的益生菌产品显得意义重大。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一株具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌。该菌株具有优良的黏附性能，可提高体外脾淋巴细胞增殖和脾淋巴细胞分泌白细胞介素IL-12，促进人结肠癌上皮细胞HT-29分泌白细胞介素IL-8；此外，在免疫低下动物模型中，该菌株还可显著提高小鼠脏器指数、促进脾淋巴细胞增殖和提高NK细胞活性。本专利技术还提供了具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌的应用。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一株具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌，其命名为WHH2580，于2019年10月23日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心保藏，其微生物保藏编号为：CGMCCNo.18730。保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，微生物分类命名为瑞士乳杆菌Lactobacillushelveticus。其具有如SEQIDNO.1所示的16srRNA基因序列。该菌株是专利技术人在前期工作中从新疆那拉提红山沟采集的酸奶中筛选得到。同时，该具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌具备黏附特性，具备耐酸耐胆盐特性。本专利技术所提供的瑞士乳杆菌WHH2580菌株(活体和非活体)具备优良的黏附特性。在人结肠癌上皮细胞HT-29细胞模型试验中表现出优良的黏附能力，单细胞黏附活体菌数达15.69±5.94个，单细胞黏附非活体菌数达11.59±4.02个，显著优于阳性对照菌株鼠李糖乳杆菌LGG和干酪乳杆菌代田株LcS的黏附性能。该菌株可与肠道上皮细胞发生黏附，发挥生理功效。本专利技术所提供的瑞士乳杆菌WHH2580菌株具备良好的耐酸耐胆盐特性。PBSpH3.0、PBS+0.3％pepsinpH2.0体系中3h降低一个数量级。0.1％Trypsin体系中3h降低0.8个数量级，0.3％BS体系中3h降低2.8个数量级，0.5％BS体系中3h降低3.6个数量级。一种具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌的应用，将具有增强免疫力功能和高黏附性能瑞士乳杆菌的活菌形式、灭活形式或菌株衍生物用于制备药品、食品、保健品或膳食补充剂。作为优选，药品为胶囊、粉剂或片剂。作为优选，食品为发酵乳、乳酪、含乳饮料、乳粉或发酵果蔬。本专利技术同时提供了具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌的应用，其是将瑞士乳杆菌WHH2580菌株的活菌形式、灭活形式或菌株衍生物与生理上可接受的赋形剂或稀释剂相结合，可以是食品或药品。其中的食品可以是发酵乳、乳酪、含乳饮料、乳粉、发酵果蔬或其他含有该菌株或该菌株衍生物的食品的任何一种，药品可以是胶囊、粉剂、片剂或其他药学上可以接受的赋形剂或稀释剂的任何一种。上述由瑞士乳杆菌WHH2580菌株的活菌形式、灭活形式或菌株衍生物与生理上可接受的赋形剂或稀释剂相结合制得的食品、药品、保健品或膳食补充剂用于提高机体的免疫脏器指数、非特异性免疫及特异性免疫反应来提高机体免疫力。因此，本专利技术具有以下有益效果：(1)本专利技术所提供的瑞士乳杆菌WHH2580菌株(活体和非活体)具备优良的黏附特性。在人结肠癌上皮细胞HT-29细胞模型试验中表现出优良的黏附能力，单细胞黏附活体菌数达15.69±5.94个，单细胞黏附非活体菌数达11.59±4.02个，显著优于阳性对照菌株鼠李糖乳杆菌LGG和代田株LcS的黏附性能。该菌株可与肠道上皮细胞发生黏附，发挥生理功效。(2)本专利技术所提供的瑞士乳杆菌WHH2580菌株在体外细胞试验中，可促进体外脾淋巴细胞增殖，不加诱导剂的增值倍数为1.912±0.087，加诱导剂的增值倍数为1.533±0.109。本专利技术所提供的瑞士乳杆菌WHH2580菌株在体外细胞试验中，可促进体外脾淋巴细胞分泌白细胞介素IL-12。瑞士乳杆菌WHH2580IL-12/IL-10比值与鼠李糖乳杆菌LGG无显差。本专利技术所提供的瑞士乳杆菌WHH2580菌株在体外细胞试验中，可促进人结肠癌上皮细胞HT-29分泌白细胞介素IL-8。瑞士乳杆菌WHH2580刺激分泌的IL-8显著高于商业菌株LGG。本专利技术所提供的瑞士乳杆菌WHH2580菌株在体内免疫低下动物试验中，活性和非活性菌体均可显著提高小鼠脾淋巴细胞增殖和NK细胞活性。(3)本专利技术所提供的瑞士乳杆菌WHH2580菌株相关的产品可以是其活体形式，也可以是其非活体形式。目前对于非活体益生菌的研究相对较少。与活本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌，其特征在于：/n其命名为WHH2580，于2019年10月23日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心保藏，其微生物保藏编号为：CGMCC No.18730，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，微生物分类命名为瑞士乳杆菌Lactobacillus helveticus。/n

【技术特征摘要】
1.一株具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌，其特征在于：
其命名为WHH2580，于2019年10月23日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心保藏，其微生物保藏编号为：CGMCCNo.18730，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，微生物分类命名为瑞士乳杆菌Lactobacillushelveticus。


2.根据权利要求1所述的具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌，其特征在于：
其具有如SEQIDNO.1所示的16srRNA基因序列。


3.根据权利要求1或2所述的具有增强免疫力功能的高黏附性能瑞士乳杆菌，其特征在于：其具备黏附特性。

...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈丽娥，陈苏，孙盛，俞赟霞，陈彩玲，李言郡，任学良，翁璐溦，郑志瑶，朱珺，李理，
申请(专利权)人：杭州娃哈哈科技有限公司，杭州娃哈哈集团有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33