一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法技术

技术编号:24325230 阅读:27 留言:0更新日期:2020-05-29 17:53
本发明专利技术公开了一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法,包括以下步骤:S1:使用者裁剪装有膜条的反应试剂板条一侧,装有膜条的反应试剂板条透明空腔一端出现开口,并在对应膜条旁边按照样本号编号;S2:将反应试剂板条空腔开口水平向上,并通过医用无菌注射液依次向各个膜条所在空腔注射A液,然后再依次通过空腔顶端开口用加样枪加入PCR产物至装有膜条内部的空腔中,此时使用者将试剂板条放入沸水浴中加热10分钟,加热过程中沸水液面低于空腔顶端开口处。通过该操作方法能够省去传统操作过程中膜条反复夹取夹出检测试剂管中的操作步骤,方便使用者按照顺序对膜条编号,在实验中不会打乱膜条顺序,且减少膜条与外界接触几率。

【技术实现步骤摘要】
一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法
本专利技术涉及医学检测
,更具体地说,涉及一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法。
技术介绍
地中海贫血(以下简称“地贫”)以一种因珠蛋白合成障碍所致的遗传性溶血性疾病,全球约1.67%的人群携带地贫基因。地贫的临床表现呈多样性,轻者本人多无自觉症状而不易察觉,常因体检时发现轻度贫血或家系分析时才诊断,未在婚前进行有关地贫检查的夫妇,要求怀孕后早筛查,早诊断,确诊后流产是目前防止重型地贫胎儿出生、保障母体安全的唯一办法。对遗传咨询后确认为高风险地贫胎儿时,应尽早通过羊水穿刺或绒毛取样后,进行基因检测,可诊断地贫胎儿的基因型,地中海贫血基因检测为通过抽血进行PCR的DNA检测,地贫的诊断主要依据临床表现、实验室检查和基因诊断,通过采集受检者外周血进行DNA提取PCR扩增,扩增产物在膜条上进行杂交,经过A液、B液、POD和显色液等过程,得出受检者是否携带地贫基因,为疾病防控及治疗提供检测依据目前,地贫基因检测方式多采用实验室检查和基因诊断,在实验室检查和基因诊断中首先是将上百个膜条放置到对应的反应管中(一张膜条需一管反应管)变性,杂交;然后再从上百个反应管子中把膜条夹出放置实验瓶中,再使用专用设备对其进一步经过A液、B液、POD和显色液等杂交过程,之后实验人员再将膜条逐一排列按1---N进行排列分析,然而这一整个过程中需要把上百张膜条放置到对应的反应管子中,然后又反复夹出,放进,需要大量的时间和精力来转移膜条,并且实验最后一步需实验人员将无毫无顺序膜条逐一排列,这一过程也是耗时,整个实验过程设计不合理,使用不方便,影响试验效率,故不能满足使用需求。为此,提出一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法。本
技术实现思路
1.要解决的技术问题针对现有技术中存在的问题,本专利技术的目的在于提供一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法,通过该操作方法能够省去传统操作过程中膜条反复夹取夹出检测试剂管中的操作步骤,实验前期通过特制的试剂板条空腔包裹膜条结构,方便使用者按照顺序对膜条编号,在实验中不会打乱膜条顺序,且减少膜条与外界接触几率,从而增加试验检测的精确度,实验后期也无需将膜条按照顺序再次排布,降低人为干扰造成检测结果误差,该方式方法优化传统杂交检测方法,有效的提高实验人员的工作效率。2.技术方案为解决上述问题,本专利技术采用如下的技术方案。一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法,包括以下步骤:S1:使用者裁剪装有膜条的反应试剂板条一侧,装有膜条的反应试剂板条透明空腔一端出现开口,并在对应膜条旁边按照样本号编号;S2:将反应试剂板条空腔开口水平向上,并通过医用无菌注射液依次向各个膜条所在空腔注射A液,然后再依次通过空腔顶端开口用加样枪加入PCR产物至装有膜条内部的空腔中,此时使用者将试剂板条放入沸水浴中加热10分钟,加热过程中沸水液面低于空腔顶端开口处,避免沸水倒灌造成交叉感染;S3:加热十分钟后取出沸水浴中的试剂板条,并放入杂交箱42.7℃杂交1.5—5小时;S4:取出杂交箱内的试剂板条,使用者再次裁剪另一侧试剂板条,将膜条所在空腔另一侧开口打开,并将空腔中大部分杂交液排出;S5:将试剂板条加入含有B液的试剂管中清洗20分钟实现洗膜工作,再次转移至含有A液及POD孵育液的试剂管中孵育30分钟,孵育结束后再次利用A液洗涤两次;S6:最后将试剂板条转入含有显色液的试剂管中5至10分钟进行显色工作,显色后的膜条在纯水中漂洗一次,清洗试剂板条及膜条即可,使用者观察判读结果。进一步的,所述S2中在注入A液以及PCR产物使要求完全没过膜条本体。进一步的,所述S5中洗涤两次要求每次5分钟室温洗涤。进一步的,所述S6在膜条显色工作中要求避光显色避免影响实验精确度。进一步的,在所述S1与S4中对试剂板条两侧裁剪过程中空腔剪切后的缺口要求直降小于膜条宽度,避免膜条掉落至外部。一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法的试剂板条,所述试剂板条由空腔、板条主体以及膜条三者构成,其中板条主体采用医用塑料材质构成。3.有益效果相比于现有技术,本专利技术的优点在于:本专利技术的目的在于提供一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法,通过该操作方法能够省去传统操作过程中膜条反复夹取夹出检测试剂管中的操作步骤,实验前期通过特制的试剂板条空腔包裹膜条结构,方便使用者按照顺序对膜条编号,在实验中不会打乱膜条顺序,且减少膜条与外界接触几率,从而增加试验检测的精确度,实验后期也无需将膜条按照顺序再次排布,降低人为干扰造成检测结果误差,该方式方法优化传统杂交检测方法,有效的提高实验人员的工作效率。附图说明图1为本专利技术试剂板条结构示意图。图中:1、板条主体;2、空腔;3、膜条。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图,对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述;显然,所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例,而不是全部的实施例,基于本专利技术中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本专利技术保护的范围。实施例1:请参阅图1,一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法,包括以下步骤:一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:使用者裁剪装有膜条的反应试剂板条一侧,装有膜条的反应试剂板条透明空腔一端出现开口,并在对应膜条旁边按照样本号编号,裁剪后的空腔开口小于膜条宽度;S2:将反应试剂板条空腔开口水平向上,并通过医用无菌注射液依次向各个膜条所在空腔注射A液,然后再依次通过空腔顶端开口用加样枪加入PCR产物至装有膜条内部的空腔中,此时使用者将试剂板条放入沸水浴中加热10分钟,加热过程中沸水液面低于空腔顶端开口处,避免沸水倒灌造成交叉感染,在注入A液以及PCR产物使要求完全没过膜条本体;S3:加热十分钟后取出沸水浴中的试剂板条,并放入杂交箱42.7℃杂交1.5—5小时;S4:取出杂交箱内的试剂板条,使用者再次裁剪另一侧试剂板条,将膜条所在空腔另一侧开口打开,并将空腔中大部分杂交液排出,裁剪后的空腔开口小于膜条宽度;S5:将试剂板条加入含有B液的试剂管中清洗20分钟实现洗膜工作,再次转移至含有A液及POD孵育液的试剂管中孵育30分钟,孵育结束后再次利用A液洗涤两次,每次5分钟室温洗涤。一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法的试剂板条,所述试剂板条由空腔、板条主体以及膜条三者构成,其中板条主体采用医用塑料材质构成。本专利技术的目的在于提供一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法,通过该操作方法能够省去传统操作过程中膜条反复夹取夹出检测试剂管中的操作步骤,实验前期通过特制的试剂板条空腔包裹膜条结构,方便使用者按照顺序对膜条编号,在实验中不会打乱膜条顺序,且减少膜条与外界接触几率,从而增加试验检测的精确度,实验后期也无需将膜条按照顺序再次排布,降低人本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法,其特征在于,包括以下步骤:/nS1:使用者裁剪装有膜条的反应试剂板条一侧,装有膜条的反应试剂板条透明空腔一端出现开口,并在对应膜条旁边按照样本号编号;/nS2:将反应试剂板条空腔开口水平向上,并通过医用无菌注射液依次向各个膜条所在空腔注射A液,然后再依次通过空腔顶端开口用加样枪加入PCR产物至装有膜条内部的空腔中,此时使用者将试剂板条放入沸水浴中加热10分钟,加热过程中沸水液面低于空腔顶端开口处,避免沸水倒灌造成交叉感染;/nS3:加热十分钟后取出沸水浴中的试剂板条,并放入杂交箱42.7℃杂交1.5—5小时;/nS4:取出杂交箱内的试剂板条,使用者再次裁剪另一侧试剂板条,将膜条所在空腔另一侧开口打开,并将空腔中大部分杂交液排出;/nS5:将试剂板条加入含有B液的试剂管中清洗20分钟实现洗膜工作,再次转移至含有A液及POD孵育液的试剂管中孵育30分钟,孵育结束后再次利用A液洗涤两次;/nS6:最后将试剂板条转入含有显色液的试剂管中5至10分钟进行显色工作,显色后的膜条在纯水中漂洗一次,清洗试剂板条及膜条即可,使用者观察判读结果。/n

【技术特征摘要】
1.一种新型地中海贫血基因RDB杂交方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:使用者裁剪装有膜条的反应试剂板条一侧,装有膜条的反应试剂板条透明空腔一端出现开口,并在对应膜条旁边按照样本号编号;
S2:将反应试剂板条空腔开口水平向上,并通过医用无菌注射液依次向各个膜条所在空腔注射A液,然后再依次通过空腔顶端开口用加样枪加入PCR产物至装有膜条内部的空腔中,此时使用者将试剂板条放入沸水浴中加热10分钟,加热过程中沸水液面低于空腔顶端开口处,避免沸水倒灌造成交叉感染;
S3:加热十分钟后取出沸水浴中的试剂板条,并放入杂交箱42.7℃杂交1.5—5小时;
S4:取出杂交箱内的试剂板条,使用者再次裁剪另一侧试剂板条,将膜条所在空腔另一侧开口打开,并将空腔中大部分杂交液排出;
S5:将试剂板条加入含有B液的试剂管中清洗20分钟实现洗膜工作,再次转移至含有A液及POD孵育液的试剂管中孵育30分钟,孵育结束后再次利用A液洗涤两次;
S6:最后将试剂板条转入含有显色液的试剂管中5至10分钟进行显...

【专利技术属性】
技术研发人员:王秋华钟青燕罗世强王敬仁钟鑫张玲许泽辉
申请(专利权)人:柳州市妇幼保健院
类型:发明
国别省市:广西;45

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