禽蛋中氟苯尼考及其代谢产物总量的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种禽蛋中氟苯尼考及其代谢产物总量的检测方法，本发明专利技术利用酸化水解原理将氟苯尼考及其代谢物全部转化为氟苯尼考胺，并利用特定条件活化后的磁性MCX固相萃取珠对待测物进行净化，从而检测禽蛋中氟苯尼考及其代谢产物的总残留量，可以实现将禽蛋内结合态、非结合态氟苯尼考及其代谢物全部转化为氟苯尼考胺，实现禽蛋中氟苯尼考风险的全面评估；同时，在检测方面，将两种检测标示物转化为一种，放大了检测信号，更便于检测人员对检出量的确定，对定量更加准确；本发明专利技术方法利用特定条件活化后的磁性MCX固相萃取珠对待测物进行净化，干扰峰明显减少，基质效应减小，更利于检测人员准确定性与定量检测。

Determination of florfenicol and its metabolites in eggs

【技术实现步骤摘要】
禽蛋中氟苯尼考及其代谢产物总量的检测方法
本专利技术涉及食品中兽药检测领域，具体涉及一种禽蛋中氟苯尼考及其代谢产物总量的检测方法。
技术介绍
氟苯尼考是一种酰胺醇类广谱抗菌药物，于20世纪80年代末由美国公司研发，主要用于敏感细菌所致的猪、鸡、鱼的细菌性疾病，具有广谱、高效的抗菌特点，其毒性作用小于同类的氯霉素、甲砜霉素，因此被广泛用于畜牧业及水产养殖中。但氟苯尼考对胚胎有毒性，长期摄入会使人体肠道细菌产生耐药性，进而危害人类健康。中华人民共和国农业部公告第235号《动物性食品中兽药最高残留限量》中规定了氟苯尼考在动物性食品中的最高残留限量，并明确规定“家禽类(产蛋禁用)”，此外公告中还规定氟苯尼考胺为氟苯尼考残留标志物。因为动物被注射氟苯尼考药物后，大部分药物会排出体外，体内代谢产物主要有：氟苯尼考胺、氟苯尼考醇、氟苯尼考草氨酸和单氯氟苯尼考等。其中部分代谢物会与动物组织结合，以结合态存在。目前禽蛋中氟苯尼考检出率较高，严重影响了禽蛋的产品质量安全。近年来，针对禽蛋中氟苯尼考及氟苯尼考胺的检测方法主要有酶联免疫法、毛细管电泳法、高效液本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种禽蛋中氟苯尼考及其代谢产物总量的检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：/n(1)取禽蛋样品，加入浓盐酸混合均匀，在90～100℃孵育6h以上，冷却至室温，调节pH≥12，加入乙酸乙酯提取，得到乙酸乙酯提取液；/n(2)在乙酸乙酯提取液中加入5％乙酸水溶液，吹干后残留物质再用5％乙酸水溶液溶解，然后加入正己烷脱脂，得到脱脂液；/n(3)MCX固相萃取珠依次用甲醇和水活化，然后将活化后的MCX固相萃取珠加到步骤(2)的脱脂液中，混匀后磁性分离，弃去液体，MCX固相萃取珠用5％乙酸水溶液清洗后，再用5％氨化甲醇溶液洗脱，洗脱液吹干后残留物质用甲醇溶解，得到待测液，待测液经0.22μmP...

【技术特征摘要】
1.一种禽蛋中氟苯尼考及其代谢产物总量的检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
(1)取禽蛋样品，加入浓盐酸混合均匀，在90～100℃孵育6h以上，冷却至室温，调节pH≥12，加入乙酸乙酯提取，得到乙酸乙酯提取液；
(2)在乙酸乙酯提取液中加入5％乙酸水溶液，吹干后残留物质再用5％乙酸水溶液溶解，然后加入正己烷脱脂，得到脱脂液；
(3)MCX固相萃取珠依次用甲醇和水活化，然后将活化后的MCX固相萃取珠加到步骤(2)的脱脂液中，混匀后磁性分离，弃去液体，MCX固相萃取珠用5％乙酸水溶液清洗后，再用5％氨化甲醇溶液洗脱，洗脱液吹干后残留物质用甲醇溶解，得到待测液，待测液经0.22μmPTFE过滤后，采用超高效液相色谱-串联四级杆质谱分析，外标法定量，检测得到禽蛋中氟苯尼考及其代谢产物的总含量；
超高效液相色谱-串联四级杆质谱分析条件为：
超高效液相色谱条件：C18色谱柱；柱温：40℃；进样量：5μL；流速：0.25mL/min；流动相A：2mmol/L甲酸铵水溶液，含0.1％甲酸，B：甲醇，梯度洗脱程序：0-1min，90％A，1-2min，90％-10％A，2-4min，10％A，4-4.1min，10％-0％A，4.1-5min，0％A，5-5.1min，0％-90％A，5.1-7min，90％A，各阶段流动相A与B合计100％；
所述质谱条件为：离子源模式：电喷雾电离源；扫描方式：多...

【专利技术属性】
技术研发人员：李祖光，张校铭，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33