重组酿酒酵母菌及其构建方法以及生产羟基脂肪酸的应用技术

本发明专利技术公开了一种重组酿酒酵母菌及其构建方法以及生产羟基脂肪酸的应用。通过同源重组的方法，将酿酒酵母中脂肪酸分解代谢相关的β氧化途径中的关键基因酰基辅酶A氧化酶POX1敲除，再敲除酰基辅酶A活化酶FAA1和FAA4，得到重组菌(一)，再向重组菌(一)中导入细胞色素P450氧化酶CYP52M1和细胞色素P450还原酶SbCPR，得到重组菌株(二)，或者向重组菌(一)中导入细胞色素P450氧化酶CYP52M1和细胞色素P450还原酶AtCPR1，得到重组菌(三)，或向重组菌(一)中导入细胞色素P450氧化酶和细胞色素P450还原酶融合蛋白基因CYP52M1‑AtCPR1，得到重组菌(四)。

Recombinant Saccharomyces cerevisiae and its construction and application in the production of hydroxy fatty acids

【技术实现步骤摘要】
重组酿酒酵母菌及其构建方法以及生产羟基脂肪酸的应用
本专利技术涉及生物
，尤其涉及重组酿酒酵母菌及其构建方法以及生产羟基脂肪酸的应用。
技术介绍
羟基脂肪酸是一类具有羧基和羟基的小分子化合物，与脂肪酸相比具有更好的反应活性、稳定性和粘度。由于其独特的性质，长链羟基脂肪酸广泛用于各种领域，如食品、化学、化妆品工业，以及作为神经酰胺、聚酯和环内酯的合成中间体。羟基脂肪酸的药物属性，包括抗生物，抗炎和抗糖尿病作用也被揭示。特别是，羟基脂肪酸分子中羟基的不同位置对生理性质和化学工业起着至关重要的影响作用。靠近羧基发生的羟基化可产生α-或β-羟基化，这种结构对于人类健康有着重大影响[9]。ω-羟基脂肪酸是末端带有羟基的脂肪酸，是具有广泛应用的多功能化合物，如粘合剂、润滑剂和潜在的抗癌剂，并作为材料用于生物塑料等聚合物的合成，生产的生物塑料具有更好的耐水性、无毒性、生物相容性和化学多功能性。鉴于羟基脂肪酸具有广泛的商业用途，研究者们进行了大量努力通过化学或生物学的方法生产羟基脂肪酸。由于选择性碳原子的限制和苛刻的反应条件，通过化学催化直接合成本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生产羟基脂肪酸的重组酿酒酵母菌(一)构建方法，其特征是包括如下步骤：通过同源重组的方法，将酿酒酵母中脂肪酸分解代谢相关的β氧化途径中的关键基因酰基辅酶A氧化酶POX1敲除，再敲除酰基辅酶A活化酶FAA1和FAA4，得到重组酿酒酵母菌(一)；/n酰基辅酶A氧化酶基因POX1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；/n酰基辅酶A合成酶基因FAA1的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；/n酰基辅酶A合成酶基因FAA4的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种生产羟基脂肪酸的重组酿酒酵母菌(一)构建方法，其特征是包括如下步骤：通过同源重组的方法，将酿酒酵母中脂肪酸分解代谢相关的β氧化途径中的关键基因酰基辅酶A氧化酶POX1敲除，再敲除酰基辅酶A活化酶FAA1和FAA4，得到重组酿酒酵母菌(一)；
酰基辅酶A氧化酶基因POX1的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；
酰基辅酶A合成酶基因FAA1的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；
酰基辅酶A合成酶基因FAA4的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。


2.如权利要求1所述的方法构建的生产羟基脂肪酸的重组酿酒酵母菌(一)。


3.一种生产羟基脂肪酸的重组酿酒酵母菌(二)构建方法，其特征是包括如下步骤：通过同源重组的方法，向重组酿酒酵母菌(一)的HO位点导入细胞色素P450氧化酶基因CYP52M1表达盒和细胞色素P450还原酶基因SbCPR表达盒，得到生产羟基脂肪酸的重组酿酒酵母菌(二)，得到的羟基脂肪酸种类包括ω-1-羟基-十六烷酸，ω-1-羟基-油酸；
细胞色素P450氧化酶基因CYP52M1的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示；
细胞色素P450还原酶基因SbCPR的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示。


4.如权利要求3所述的方法构建的生产羟基脂肪酸的重组酿酒酵母菌(二)。


5.一种生产羟基脂肪酸的重组酿酒酵母菌(...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢文玉，李冰，刘静静，张传波，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津;12