一种基于酿酒酵母的双链RNA合成优化与应用制造技术

本发明专利技术提供了一种基于酿酒酵母的双链RNA合成优化与应用。具体地，提供了一种核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物的结构(5’‑3’)如式I所示：Z1‑Z2‑Z3‑L1‑Z4‑Z5式I；其中，各“‑”独立地为键或核苷酸连接序列；Z1为无或酶切位点；Z2为TDH3启动子；Z3为正向的ofslc35b1基因的核酸序列；L1为无或核苷酸连接序列；Z4为反向的ofslc35b1基因的核酸序列；和Z5为无或酶切位点。本发明专利技术还提供了含有此核酸构建物的载体、宿主细胞，及利用此方法产生玉米螟虫致死基因dsRNA的方法。相对于现有技术，本发明专利技术显著提高了玉米螟虫致死基因dsRNA的生产效率，并促进了生物农药的广泛应用。

Optimization and application of double stranded RNA synthesis based on Saccharomyces cerevisiae

【技术实现步骤摘要】
一种基于酿酒酵母的双链RNA合成优化与应用
本专利技术涉及转基因应用领域，具体地，涉及一种基于酿酒酵母的双链RNA合成优化与应用。
技术介绍
生物农药是一种利用活性生物体或是代谢产物，有针对性地在农业生产中应用，以此来实现病虫害防治目的。生物农药以其自身独特的优势，被广泛应用在农业病虫害防治中，相较于以往的高毒副农药而言，病虫害防治效果更为突出，还能够有效降低对生态环境的污染。针对我国种植业而言，开发生物农药具有极大的商业价值和市场前景。RNA干扰(RNAinterferencre，RNA干扰)可以作为一种最具潜力的害虫防治新技术、新策略加入到害虫综合防治策略中，从而减少化学农药带来的环境压力，改善传统农药作用靶标单一，污染严重，害虫抗药性增长快的现状。目前通过喂食或注射dsRNA，已经发现在多种昆虫中发现了RNA干扰效应，包括蜚蠊目，双翅目，半翅目等。因此，本领域急需一种高效且稳定发挥昆虫RNA干扰作用的生产方案。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种高效且稳定发挥昆虫RNA干扰作用的生产方案。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物的结构(5'-3')如式I所示：/nZ1-Z2-Z3-L1-Z4-Z5式I/n其中，/nZ1为无或酶切位点；/nZ2为TDH3启动子；/nZ3为正向的、编码dsRNA分子的核酸序列；/nL1为无或核苷酸连接序列；/nZ4为反向的、用于编码所述dsRNA分子的核酸序列，其中，Z3和Z4是互补形成所述的dsRNA；和/nZ5为无或酶切位点，/n各“-”独立地为键或核苷酸连接序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物的结构(5'-3')如式I所示：
Z1-Z2-Z3-L1-Z4-Z5式I
其中，
Z1为无或酶切位点；
Z2为TDH3启动子；
Z3为正向的、编码dsRNA分子的核酸序列；
L1为无或核苷酸连接序列；
Z4为反向的、用于编码所述dsRNA分子的核酸序列，其中，Z3和Z4是互补形成所述的dsRNA；和
Z5为无或酶切位点，
各“-”独立地为键或核苷酸连接序列。


2.如权利要求1所述的核酸构建物，其特征在于，所述的编码dsRNA分子的核酸序列为ofslc35b1基因。
在另一优选例中，所述的ofslc35b1基因的核酸序列选自下组：
(a)所述核酸序列如SEQIDNO.:1所示；
(b)所述核酸序列与SEQIDNO.:1所示的核苷酸序列有≥95％相同性，优选地≥98％，更优选地≥99％；和
(c)与(a)或(b)所述的核苷酸序列互补的核苷酸序列。


3.如权利要求1所述的核酸构建物，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨月，陈贤情，卓炳照，朱文博，夏文豪，蒿飞，李琪，刘毅，李子鹤，王筱，
申请(专利权)人：西北工业大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61