孕激素在抑制血管内皮生长因子表达中的应用制造技术

本发明专利技术公开了孕激素在抑制血管内皮生长因子表达中的应用。抑制血管内皮生长因子表达通过抑制血管内皮生长因子的启动子和/或5’UTR的活性来实现。血管内皮生长因子为血管内皮生长因子C。血管内皮生长因子C的启动子和5’UTR的核苷酸序列如序列表中序列1所示。本发明专利技术具有重要的应用价值。

The application of progesterone in inhibiting the expression of vascular endothelial growth factor

【技术实现步骤摘要】
孕激素在抑制血管内皮生长因子表达中的应用
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及孕激素在抑制血管内皮生长因子表达中的应用。
技术介绍
雌激素和孕激素(progesterone)严格调控正常子宫内膜腺上皮细胞的生长和分化。雌激素可促进子宫内膜腺上皮细胞增生，而内源性孕激素具有保护腺上皮细胞过度增生的作用。雌激素替代疗法中，孕激素与雌激素联合使用可以预防子宫内膜腺癌的发生，但高剂量的孕激素也可诱发细胞凋亡。血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)是血管内皮细胞特异性的肝素结合生长因子，可在体内诱导血管新生。VEGF-C(vascularendothelialgrowthfactorC，VEGF-C)是VEGF家族成员之一，其通过结合酪氨酸激酶受体和非酪氨酸激酶受体来激发信号传导通路，参与淋巴血管内皮细胞的增生、迁移及新生淋巴血管的生成。
技术实现思路
本专利技术的目的是抑制血管内皮生长因子表达。本专利技术首先保护一种产品，其可含有孕激素；所述产品的功能可为抑制血管内皮生长因子表达。上述产品中，所述“抑制血管内皮生长因子表达”可通过抑制血管内皮生长因子的启动子和/或5’UTR的活性来实现。上述任一所述的产品中，所述血管内皮生长因子可为血管内皮生长因子C。上述任一所述的产品中，所述血管内皮生长因子C的启动子和5’UTR的核苷酸序列可如序列表中序列1所示。本专利技术还保护孕激素在抑制血管内皮生长因子表达中的应用。本专利技术还保护孕激素在制备抑制血管内皮生长因子表达的产品中的应用。上述任一所述的应用中，所述“抑制血管内皮生长因子表达”可通过抑制血管内皮生长因子的启动子和/或5’UTR的活性来实现。上述任一所述的应用中，所述血管内皮生长因子可为血管内皮生长因子C。上述任一所述的应用中，所述血管内皮生长因子C的启动子和5’UTR的核苷酸序列可如序列表中序列1所示。上述任一所述血管内皮生长因子C可为如下a1)或a2)或a3)：a1)氨基酸序列是序列表中序列3所示的蛋白质；a2)在序列表中序列3所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；a3)将a1)或a2)所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质。其中，序列表中序列3由714个氨基酸残基组成。为了使a1)中的蛋白质便于纯化，可在序列表中序列3所示的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。表1.标签的序列标签残基序列Poly-Arg5-6(通常为5个)RRRRRPoly-His2-10(通常为6个)HHHHHHFLAG8DYKDDDDKStrep-tagII8WSHPQFEKc-myc10EQKLISEEDL上述a3)中的蛋白质，所述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。上述a3)中的蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。上述a3)中的蛋白质的编码基因可通过将序列表中序列2所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端和/或3′端连上表1所示的标签的编码序列得到。编码上述任一所述血管内皮生长因子C的核酸分子可为如下b1)或b2)或b3)或b4)所示的DNA分子：b1)编码区是序列表中序列2所示的DNA分子；b2)核苷酸序列是序列表中序列2所示的DNA分子；b3)与b1)或b2)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，来源于人且编码所述血管内皮生长因子C的DNA分子；b4)在严格条件下与b1)或b2)限定的核苷酸序列杂交，来源于人且编码所述血管内皮生长因子C的DNA分子。其中，所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA或hnRNA等。其中，序列表中序列2由2145个核苷酸组成，序列表中序列2的核苷酸编码序列表中序列3所示的氨基酸序列。本领域普通技术人员可以很容易地采用已知的方法，例如定向进化和点突变的方法，对本专利技术的血管内皮生长因子C的核苷酸序列进行突变。那些经过人工修饰的，具有与本专利技术提供的血管内皮生长因子C的核苷酸序列80％或者更高同一性的核苷酸，只要编码血管内皮生长因子C，均是衍生于本专利技术的核苷酸序列并且等同于本专利技术的序列。这里使用的术语“同一性”指与天然核酸序列的序列相似性。“同一性”包括与本专利技术的编码序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质的核苷酸序列具有80％或更高，或85％或更高，或90％或更高，或95％或更高同一性的核苷酸序列。同一性可以用肉眼或计算机软件进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同一性可以用百分比(％)表示，其可以用来评价相关序列之间的同一性。本专利技术还保护A1)或A2)。A1)孕激素在预防和/或治疗子宫内膜癌中的应用。A2)孕激素在制备用于预防和/或治疗子宫内膜癌的产品中的应用。上述任一所述孕激素具体可为Sigma-Alorich公司产品。具体的，孕激素为Sigma-Alorich公司的、产品目录号为P0130的产品。实验证明，孕激素通过抑制VEGF-C启动子和/或5’UTR的活性，下调VEGF-C基因和VEGF-C蛋白的表达。本专利技术具有重要的应用价值。附图说明图1为孕激素抑制VEGF-C基因的表达。图2为孕激素对VEGF-CmRNA稳定性的影响。图3为荧光酶活性检测结果。具体实施方式以下的实施例便于更好地理解本专利技术，但并不限定本专利技术。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。下面结合具体实施方式对本专利技术进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本专利技术，而不是为了限制本专利技术的范围。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。Ishikawa细胞为Sigma-Alorich公司产品，产品目录号为99040201-1VL。pGL3basic载体中为Promega公司的产品，产品目录号为E1741。孕激素为Sigma-Alorich公司产品，产品目录号为P0130。雌激素为Sigma-Al本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种产品，其含有孕激素；所述产品的功能为抑制血管内皮生长因子表达。/n

【技术特征摘要】
1.一种产品，其含有孕激素；所述产品的功能为抑制血管内皮生长因子表达。


2.如权利要求1所述的产品，其特征在于：所述“抑制血管内皮生长因子表达”通过抑制血管内皮生长因子的启动子和/或5’UTR的活性来实现。


3.如权利要求1或2所述的产品，其特征在于：所述血管内皮生长因子为血管内皮生长因子C。


4.如权利要求1至3任一所述的产品，其特征在于：所述血管内皮生长因子C的启动子和5’UTR的核苷酸序列如序列表中序列1所示。


5.孕激素在抑制血管内皮生长因子表达中的应用。


6.孕激素在制备抑制血管内皮生长因子...

【专利技术属性】
技术研发人员：李金萍，王建浩，
申请(专利权)人：常州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32