一种基于Nrf2的环维黄杨星D在糖尿病心肌病中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种基于Nrf2的环维黄杨星D在糖尿病心肌病中的应用，具体涉及运用Nrf2药理学激动剂及抑制剂，以及Nrf2的shRNA及过表达质粒，证明了环维黄杨星D能够通过Nrf2信号改善氧化应激及激动自噬改善糖尿病心肌病,为扩大环维黄杨星D的临床应用范围提供研究基础。

Application of Cyclovirobuxine D in diabetic cardiomyopathy based on Nrf2

【技术实现步骤摘要】
一种基于Nrf2的环维黄杨星D在糖尿病心肌病中的应用
本专利技术涉及医药专利
，具体涉及一种基于Nrf2的环维黄杨星D在糖尿病心肌病中的应用。
技术介绍
目前全球至少有4.25亿成年人患有糖尿病，糖尿病及其并发症成为21世纪主要的公共卫生问题之一，给家庭及社会带来沉重的负担[1]。糖尿病心肌病(diabeticcardiomyopathy,DCM)是糖尿病所引起的特异性心肌病，在糖尿病患者中的发病率约为10-30％。从Lundbaek1954年首次提出了这种独特的临床现象至今，DCM通常为描述为心脏结构异常及功能障碍，早期表现为收缩及舒张功能异常，晚期则表现为心力衰竭，是糖尿病患者致死的主要原因[2]。目前尚未有治疗DCM的特异性药物，在采用常规降血糖、降血脂及降血压及针对心衰的对症治疗后，糖尿病患者心血管并发症的发生率虽有所下降，但仍然是高于普通人群[3]。因此，进一步揭示DCM潜在的发病机制，寻找有效的预防及治疗药物，是目前医药工作者的焦点问题。氧化应激(OxidativeStress，OS)被认为是糖尿病及其并发症的共同发病机制[4]。在糖尿病环境下，能量代谢紊乱及糖基化终末产物(AGE)的增加等导致心脏组织氧化与抗氧化之间失去平衡，活性氧自由基(ROS)的蓄积损伤线粒体及DNA等，引起心肌细胞的死亡[5]。核因子E2相关因子2(nuclearfactor-E2-relatedfactor2，Nrf2)是抗氧化应激反应的重要转录因子。在生理状态下，Nrf2通过与E3泛素连接酶底物衔接子(Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)结合进行泛素降解，以维持其中胞浆与胞核中的平衡[6]。当受到氧化剂/亲电试剂和生长因子刺激时，Nrf2与Keap1解偶联进而转移入核，再与其专性伴侣-肌腱膜纤维肉瘤蛋(musculoaponeuroticfibrosarcomaprotein，Maf)结合成异二聚体，然后识别并结合ARE(共识序列：TGACnnnGC，n代表任意核苷酸)启动下游HO-1、NQO-1、p62/SQSTM1(sequstosome1)等基因发挥抗氧化作用[7]，Nrf2的激活已被证明对多种心血管疾病有益，包括高血压，心力衰竭和糖尿病性心肌病[8]。当心肌细胞发生氧化损伤时，机体会激活自噬(autophagy)维持心肌细胞稳态[9]。自噬是细胞在自噬相关基因(autophagyrelatedgene，Atg)的调控下利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程，超微结构呈现吞噬泡(phagophore)-自噬小体(autophagosome)-自噬溶酶体(autolysosome)三个变化过程。虽然存在争议，但大部分研究表明高水平的ROS可通过mTOR通路抑制自噬，使心肌细胞的“自救”不能完成，自噬受抑是DCM发病的另一重要机制[10]。随着研究的深入，发现Nrf2与自噬的关系非常密切。Nrf2能促进选择性自噬接头蛋白p62/SQSTM1(sequstosome1)的表达，但同时Nrf2的释放也受到p62的调控，两者存在正反馈。同时，对自噬小体标志蛋白LC3基因启动子区域检索也发现，其同样存在ARE共识序列，提示Nrf2有可能通过ARE元件调控LC3的表达。因此，兼具抗氧化应激及激动自噬的Nrf2信号通路有望成为治疗DCM的重要分子靶点。环维黄杨星D(CVB-D，商品名：黄杨宁)是中药黄杨木的药效成分，是我国自主研发用于治疗胸痹心痛的创新药物。前期研究表明CVB-D具有抗氧化应激及激动自噬的药理作用，对心律失常、心绞痛及冠心病等多种心血管疾病具有良好的疗效[11，12]，但是其对于由糖尿病引起的心脏病变是否有效尚未见研究报道。因此，本研究通过建立DCM的体内外模型以及原代心肌细胞自噬抑制模型，从氧化应激和自噬的角度探讨CVB-D通过Nrf2信号通路改善DCM的作用机制，为扩大CVB-D的临床应用范围提供研究基础。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种基于Nrf2的环维黄杨星D在糖尿病心肌病中的应用。本专利技术具体内容如下：本专利技术提供一种基于Nrf2的环维黄杨星D在糖尿病心肌病中的应用。具体的，所述环维黄杨星D对糖尿病心肌病中心脏功能及生存率的应用。具体的，所述环维黄杨星D对糖尿病心肌病中心脏氧化应激的应用。具体的，所述环维黄杨星D对糖尿病心肌病中心脏自噬的应用。具体的，环维黄杨星D对高糖诱导原代心肌细胞氧化损伤的应用。具体的，所述环维黄杨星D对心肌细胞膜及心肌细胞氧化应激相关蛋白的应用。具体的，所述环维黄杨星D通过Nrf2改善高糖诱导的原代心肌细胞氧化损伤的应用。具体的，所述环维黄杨星D对H2O2诱导原代心肌细胞氧化损伤的应用。进一步的，所述所述环维黄杨星D在糖尿病心肌病制剂中的应用。更进一步的，所述制剂为加入药学上可接受的辅料制备成药学上可接受的制剂，所述制剂为颗粒剂、片剂、胶囊剂、注射剂、丸剂。本专利技术来源：糖尿病性心肌病是糖尿病患者的主要死亡原因，发病率高且缺乏有效的治疗药物。CVB-D-D可有效改善DCM大鼠的心脏功能障碍并增加其存活率，这与Nrf2及其靶信号的激活有是中药黄杨木的药效成分，已被证明具有多种药理活性，包括抗氧化剂，抗炎作用和调节自噬作用。但是，CVB-D对于由糖尿病引起的心脏病变是否有效尚未见研究报道。我们的研究首次证明CVB关。DCM通常被定义为心脏结构损伤及功能障碍，目前缺乏明确的诊断指标。本研究以传统的高脂饮食结合小剂量的链脲佐菌素复制2型糖尿病大鼠模型，创新性地采用无创性的心脏B超监测大鼠的射血分数，并结合外周血BNP水平监测，较好地模拟了DCM的发病过程。实验结果发现，在大鼠成模后3个月作用，其射血分数明显降低，BNP水平明显升高，提示射血分数保留型心衰模型的建立。在给予CVB-D干预后，模型大鼠心脏功能得到一定程度的改善，生存率提高，提示CVB-D具有预防治疗DCM的潜力。对模型大鼠的心脏进行病理观察发现，模型大鼠线粒体损伤，且有炎症细胞浸润；外周血提示其MDA水平升高，SOD水平降低，以上结果说明糖尿病大鼠心脏氧化应激损伤。而在给予CVB-D干预后，其氧化应激损伤程度有所改善，提示CVB-D有抗氧化应激的药理作用。同时通过免疫组化及电镜观察发现：模型大鼠3个月时心脏自噬水平降低，且自噬流不畅，而CVB-D能够提高心脏的自噬水平，并促进自噬流畅通。Nrf2信号通路是抗氧化应激的主要核转录因子，但近期研究也发现其与自噬的关系也非常密切。本研究运用Nrf2药理学激动剂及抑制剂，以及Nrf2的shRNA及过表达质粒，证明了CVB-D能够通过Nrf2信号改善氧化应激及激动自噬改善DCM。本专利技术有益效果：1、本专利技术阐述了CVB-D通过Nrf2信号通路改善DCM新的药理作用，为扩大CVB-D的临床应用范围提供了研究基础。2、本专利技术阐述了CVB-D有效改善DCM的心脏功能障碍并增加其存活率，这与Nrf2及其靶信号的激活有关。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于Nrf2的环维黄杨星D在糖尿病心肌病中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于Nrf2的环维黄杨星D在糖尿病心肌病中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，环维黄杨星D对糖尿病心肌病中心脏功能及生存率的应用。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，环维黄杨星D对糖尿病心肌病中心脏氧化应激的应用。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，环维黄杨星D对糖尿病心肌病中心脏自噬的应用。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，环维黄杨星D对高糖诱导原代心肌细胞氧化损伤的应用。


6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈祥春，蒋朝辉，付凌云，陶玲，
申请(专利权)人：贵州医科大学，
类型：发明
国别省市：贵州;52