【技术实现步骤摘要】
一种用于原代细胞培养的试剂盒及其应用
本专利技术属于动物细胞培养领域,具体地,涉及一种用于原代细胞培养的试剂盒及其应用。
技术介绍
原代培养也叫初代培养,指直接从体内取出的细胞、组织和器官进行的首次培养,较为严格地说,原代培养是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。原代培养的细胞因为组织刚刚离体,其生物学特性未发生很大变化,仍保留原二倍体遗传性,基因保留量在90%以上,适用于药物敏感性试验及机制探究相关试验,其数据更具有说服力,同时通过原代培养技术建立相应病变细胞系或株,研究其病变、分子遗传以及转移演变机制等,对多种疾病研究与治疗起着举足轻重的作用。原代细胞作为分子生物学研究中的重要工具细胞,随着生物科学研究的急速发展,原代细胞在生物学实验中使用越来越广泛,与之相适应,原代细胞的需求量也呈现持续增长的趋势。因此,有必要发展能够快速培养原大量代细胞的方法以适应当今的科学发展需求。专利技术内 ...
【技术保护点】
1.一种用于原代细胞培养的试剂盒,其特征在于,包括:培养液A、胎牛血清、GlutaMAX
【技术特征摘要】
1.一种用于原代细胞培养的试剂盒,其特征在于,包括:培养液A、胎牛血清、GlutaMAXTM补充液、青霉素-链霉素-新霉素溶液、EGF、bFGF、胶原酶IV、DNA酶I、青霉素-链霉素-两性霉素B混合溶液;
所述培养液A中添加有无机盐、氨基酸和维生素;
所述无机盐包括氯化钙、硫酸铜、硝酸铁、硫酸亚铁、硫酸镁、氯化钾、碳酸氢钠、氯化钠、磷酸一钠,磷酸二钠、硫酸锌中的至少一种;
所述氨基酸包括L-丙氨酸、L-精氨酸盐酸盐、L-天门冬酰胺一水物、L-天冬氨酸、L-半胱氨酸盐酸盐一水物、L-胱氨酸二盐酸盐、L-谷氨酸、L-谷氨酰胺、甘氨酸、L-组氨酸盐酸盐一水物、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸盐酸盐、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸二钠盐二水物、L-缬氨酸中的至少一种;
所述维生素包括维生素H、氯化胆碱、叶酸、肌醇、烟酰胺、维生素B5、维生素B6、维生素B2、维生素B1、维生素B12中的至少一种。
2.如权利要求1所述用于原代细胞培养的试剂盒,其特征在于,所述无机盐包括的种类及其对应的在所述培养液A中的浓度如下:
氯化钙0.1–0.15g/L,硫酸铜0.5–1μg/L,硝酸铁10–80μg/L,硫酸亚铁0.2–0.5mg/L,硫酸镁0.05–1g/L,氯化钾0.2–0.5g/L,碳酸氢钠1–1.5g/L,氯化钠5–10g/L,磷酸一钠0.05–0.1g/L,磷酸二钠0.05–0.1g/L,硫酸锌0.3–0.7mg/L。
3.如权利要求1所述用于原代细胞培养的试剂盒,其特征在于,所述氨基酸包括的种类及其对应的在所述培养液A中的浓度如下:
L-丙氨酸3–4mg/L,L-精氨酸盐酸盐0.1–0.2g/L,L-天门冬酰胺一水物5–10mg/L,L-天冬氨酸5–8mg/L,L-半胱氨酸盐酸盐一水物0.01–0.02g/L,L-胱氨酸二盐酸盐0.02–0.05g/L,L-谷氨酸5–10mg/L,L-谷氨酰胺0.2–0.5g/L,甘氨酸0.01–0.03g/L,L-组氨酸盐酸盐一水物0.02–0.05g/L,L-异亮氨酸0.03–0.07g/L,L-亮氨酸0.03–0.07g/L,L-赖氨酸盐酸盐0.07–0.12g/L,L-蛋氨酸15–20mg/L,L-苯丙氨酸0.02-0.05g/L,L-脯氨酸0.01–0.03g/L,L-丝氨酸0.02–0.05g/L,L-苏氨酸0.04–0.06g/L,L-色氨酸8–10mg/L,L-酪氨酸二钠盐二水物0.04–0.06g/L,L-缬氨酸0.04–0.06g/L。
4.如权利要求1所述用于原代细胞培养的试剂盒,其特征在于,所述维生素包括的种类及其对应的在所述培养液A中的浓度如下:
维生素H2–5μg/L,氯化胆碱7–10mg/L,叶酸1.5–3mg/L,肌醇0.1–0.2g/L,烟酰胺1–4mg/L,维生素B51–4mg/L,维生素B61–4mg/L,维生素...
【专利技术属性】
技术研发人员:黄诚坤,钟国亮,劳海金,
申请(专利权)人:广东依浦赛生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:广东;44
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。