一种检测利什曼原虫的引物对、探针及检测方法和试剂盒技术

技术编号:23210005 阅读:30 留言:0更新日期:2020-01-31 20:54
本发明专利技术公开了一种检测利什曼原虫的引物对、探针及检测方法和试剂盒,通过针对利什曼原虫动基体小环的保守区域设计出一对能特异性检测利什曼原虫的引物对和探针;所述引物对的序列如SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示,所述探针的序列如SEQ ID No:3;该引物对和探针能特异性扩增出利什曼原虫的部分片段,且灵敏度高,能检测出仅含有0.001copies/μl的样本;利用该引物对、探针和检测方法能够绝对定量出人外周血、骨髓以及皮肤中利什曼原虫的含量,检测安全、快速方便,可用于利什曼原虫的检测,以及跟踪监测患者药物的治疗效果,有利于开展流行病学调查,预防和控制利什曼原虫的传播。

A primer pair, probe, detection method and kit for Leishmania detection

【技术实现步骤摘要】
一种检测利什曼原虫的引物对、探针及检测方法和试剂盒
本专利技术属于寄生虫分子检测
,更具体地,涉及一种检测利什曼原虫的引物对、探针及检测方法和试剂盒。
技术介绍
利什曼病是由利什曼原虫(Leishmania,Lspp.)引起,主要经白蛉传播的一种人兽共患疾病。利什曼病的诊断是预防及治疗的关键环节。病原学检查是利什曼病诊断的“金标准”,然而,病原学检查的敏感度因取样部位的不同而有所差异,脾脏穿刺物镜检和培养的敏感性分别为95%和100%,但由于脾脏穿刺的风险较高在临床中应用具有一定的局限性。骨髓穿刺相对安全,但灵敏度较低(52-69%),因此,临床上亟需高敏感性,采样便捷的方法来解决这一问题。专利CN101613752A公开了一种快速检测杜氏利什曼原虫的荧光定量PCR试剂盒,采用杜氏利什曼原虫kDNA基因特异性引物,以SYBR-Green染料收集荧光定量。Hossainetal.2017公开了荧光定量PCR法用于检测和定量内脏利什曼病,采用利什曼原虫REPL重复的保守区特异性引物和探针进行定量。<br>但上述方法仍然本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测利什曼原虫的试剂盒,其特征在于,包含所述引物-F、引物-R和探针Probe,所述的引物-F序列为SEQ ID No:1,所述的引物-R 序列为SEQ ID No:2,所述的探针Probe序列为SEQ ID No:3。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测利什曼原虫的试剂盒,其特征在于,包含所述引物-F、引物-R和探针Probe,所述的引物-F序列为SEQIDNo:1,所述的引物-R序列为SEQIDNo:2,所述的探针Probe序列为SEQIDNo:3。


2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒内还含有PCR扩增反应试剂。


3.引物-F、引物-R和探针Probe的组合在制备检测利什曼原虫产品中的应用,所述的引物-F序列为SEQIDNo:1,所述的引物-R序列为SEQIDNo:2,所述的探针Probe序列为SEQIDNo:3。


4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述的检测利什曼原虫的产品的检测方法包括如下步骤:以待测样品的DNA为模板,利用引物-F、引物-R和探针Probe进行荧光定量PCR扩增,通过标...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨国威吴云王磊
申请(专利权)人:首都医科大学附属北京友谊医院
类型:发明
国别省市:北京;11

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