一种吡咯喹啉醌的纯化方法技术

本发明专利技术提供一种吡咯喹啉醌的纯化方法，该方法包括以下步骤：将含有吡咯喹啉醌的发酵液进行预处理得到滤液；将所得滤液通过聚酰胺树脂，然后用酸性水溶液冲洗，漏出液废弃；用酸和盐的混合水溶液进行解吸，收集色谱纯度90％以上的解吸液；调整解吸液的pH，先进行超滤，再进行纳滤浓缩；最后进行结晶、干燥。本发明专利技术采用聚酰胺树脂分离吡咯喹啉醌发酵液，再配合结晶能得到HPLC纯度≥98％，含量≥96％的吡咯喹啉醌晶体，且使用的聚酰胺树脂廉价易得，提纯工艺简单，有效降低成本。此外，本发明专利技术使用过后的聚酰胺树脂用碱液即可完成树脂再生，整个过程中使用的有机溶剂大大减少，则废水COD大幅度减少，同时也降低了厂房设施的防爆要求。

A purification method of pyrroloquinoline quinone

【技术实现步骤摘要】
一种吡咯喹啉醌的纯化方法
本专利技术涉及微生物发酵制药领域，更具体地，涉及一种吡咯喹啉醌的纯化方法。
技术介绍
吡咯喹啉醌(Pyrroloquinolinequinone，PQQ)，化学名称为4，5-二氢-4，5-二氧化-1-氢吡咯(2，3f)醌-2，7，9-三羧酸，别名Methaxatin，是一种新型辅酶。1979年Salisbury等人首次从甲基营养菌中分离，并确定其为在细菌细胞中作为膜结合脱氢酶的氧化还原辅因子，它与呼吸链电子传递，也是一种新的B族维生素。新近一些研究发现PQQ具有异常高的氧化还原循环能力，在抗神经细胞衰老和抗癌等方面有很大应用潜力。同时，2008年，美国食品和药物管理局(FDA)批准了以PQQ为主要成分的促进认知功能食品。因此，PQQ作为药物或功能食品具有很好的应用前景。其结构式如下所示：目前，PQQ的生产方法主要是化学合成法及发酵法，化学合成法步骤多、副产物多且难以去除，在国内安全环保越来越严格的情况下，微生物发酵法生产PQQ具有巨大的成本优势。现阶段重点则为从发酵液中提纯PQQ，已经报道的有，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种吡咯喹啉醌的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)将含有吡咯喹啉醌的发酵液进行预处理，得到滤液；/n(2)将步骤(1)所得滤液通过聚酰胺树脂，然后用酸性水溶液冲洗，漏出液废弃；/n(3)将步骤(2)所得聚酰胺树脂用酸和盐的混合水溶液进行解吸，收集色谱纯度90％以上的解吸液；/n(4)调整步骤(3)所得解吸液的pH，先进行超滤，再进行纳滤浓缩；/n(5)将步骤(4)所得浓缩液进行结晶、干燥，即得纯化后的吡咯喹啉醌。/n

【技术特征摘要】
1.一种吡咯喹啉醌的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将含有吡咯喹啉醌的发酵液进行预处理，得到滤液；
(2)将步骤(1)所得滤液通过聚酰胺树脂，然后用酸性水溶液冲洗，漏出液废弃；
(3)将步骤(2)所得聚酰胺树脂用酸和盐的混合水溶液进行解吸，收集色谱纯度90％以上的解吸液；
(4)调整步骤(3)所得解吸液的pH，先进行超滤，再进行纳滤浓缩；
(5)将步骤(4)所得浓缩液进行结晶、干燥，即得纯化后的吡咯喹啉醌。


2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，步骤(1)中，所述预处理具体包括：
将所述发酵液进行固液分离，所得滤液用酸调节至pH为2.0～2.5，再加入盐至其浓度以滤液体积计为5～15g/L，最后进行过滤，所得滤液进行步骤(2)的处理。


3.根据权利要求2所述的纯化方法，其特征在于，所述固液分离采用陶瓷膜过滤法，优选陶瓷膜的孔径为50nm；
和/或，所述盐为氯化钙、醋酸钙中的一种或多种，优选氯化钙；
和/或，最后进行过滤时，过滤介质为平均孔径为0.2～0.6μm的过滤纸板或过滤膜。


4.根据权利要求1～3任一项所述的纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，所述聚酰胺树脂的粒径为200～500目，优选为300～400目；
和/或，所述酸性水溶液的pH...

【专利技术属性】
技术研发人员：何勇崴，赵燕，张葵，
申请(专利权)人：北大方正集团有限公司，北大医药重庆大新药业股份有限公司，北大医疗产业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11