柳兰萃取物用于提升基因表现量的用途制造技术

本发明专利技术是关于柳兰萃取物的用途，尤其是柳兰萃取物用于提升基因表现量的用途。本发明专利技术提供一种柳兰萃取物用于制备提升TGM、KRT、AQP及FLG基因表现量，以及促进角质细胞分泌玻尿酸并舒缓皮肤敏感、泛红的医药组合物的用途，能有效维持角质细胞排列，使皮肤角质层结构完整，以提升皮肤屏障功能以及使皮肤形成更多保湿因子。其中该柳兰萃取物是柳兰以水、醇、或醇水混合物的溶剂所萃取而得。

【技术实现步骤摘要】
柳兰萃取物用于提升基因表现量的用途
本专利技术是关于柳兰萃取物的用途，尤其是一种柳兰萃取物用于提升转谷氨酰胺酶(Transglutaminase，TGM)基因、角蛋白(Keratin，KRT)基因、水通道蛋白(Aquaporin，AQP)基因及聚角蛋白微丝(Filaggrin，FLG)基因表现量的医药组合物的用途。
技术介绍
表皮层为皮肤的最外层，由外往内依序为角质层、颗粒层、有棘层及基底层，表皮层主要由基底层中未分化的圆柱型角质细胞持续向上进行分化形成，此过程称为角质化。角质细胞内含水量高，随着细胞向上代谢分化，角质细胞形状会逐渐变成扁平状，且细胞核及胞器开始退化萎缩，并在角质层形成不具细胞核与胞器的死细胞。表皮层的主要功能为使皮肤保水，并形成皮肤屏障以抵御各种外来伤害，其中表皮层最外层由一弱酸性的皮脂膜以及如砖墙结构的角质层所构成，此屏障能锁住皮肤的水分和油脂、抵抗皮肤表面病菌入侵，及对抗外界异物及紫外光等伤害，对人体有非常重要的保护作用。表皮层中的角质层，其角质细胞虽然为死细胞，但其主要成分为角蛋白(keratin)，角蛋白能吸收水分使皮肤保持湿润，角质细胞也会分泌如玻尿酸等物质作为细胞间质，以维持表皮层皮肤屏障的结构完整，以防止皮肤水分散失及形成完整防护。当皮肤接触过冷或过热的环境以及照射紫外光等刺激，会导致角质细胞无法维持正常的代谢循环，并使得皮肤表皮层屏障受损，而让皮肤变得粗糙、干燥脱屑、脆弱易受刺激、敏感泛红且会使皮肤保水能力下降，因此角质层的健康对于皮肤保湿以及抵御外来伤害着实非常重要。综合上面所述，为了改善因角质细胞受损导致皮肤变得脆弱、易敏，以及皮肤保水能力下降的问题，开发一种能有效维持角质细胞排列、维持角质层结构完整以及使角质细胞分泌更多保湿因子，以提升皮肤屏障以及保湿功能的医药组成物，着实有其必要性。
技术实现思路
缘此，本专利技术的一目的在提供一种柳兰萃取物用于制备提升转谷氨酰胺酶(Transglutaminase，TGM)基因、角蛋白(Keratin，KRT)基因、水通道蛋白(Aquaporin，AQP)基因及聚角蛋白微丝(Filaggrin，FLG)基因表现量的医药组合物的用途。本专利技术的又一目的在提供一种柳兰萃取物用于制备提升角质细胞中水通道蛋白的蛋白质表现的医药组合物的用途。本专利技术的又一目的在提供一种柳兰萃取物用于制备促进角质细胞分泌玻尿酸的医药组合物的用途。本专利技术的另一目的在提供一种柳兰萃取物用于制备舒缓皮肤敏感、泛红的医药组合物的用途。本专利技术的柳兰萃取物是以一溶剂萃取一柳兰所获得，该溶剂为水、醇、或醇水混合物，该溶剂与该柳兰的液固比为5～20∶1～5，且该萃取步骤是在50℃～100℃进行。在本专利技术的一实施例中，该转谷氨酰胺酶基因是转谷氨酰胺酶1(Transglutaminase1，TGM1)基因；该角蛋白基因包含角蛋白1(Keratin1，KRT1)基因、角蛋白10(Keratin10，KRT10)基因及角蛋白14(Keratin14，KRT14)基因；该水通道蛋白是水通道蛋白3(Aquaporin3，AQP3)。在本专利技术的一实施例中，该医药组合物会维持角质细胞的排列，使皮肤角质层结构完整。同时，本专利技术用于提升TGM、KRT、AQP及FLG基因表现量，以及促进角质细胞分泌玻尿酸并舒缓皮肤敏感、泛红的医药组合物，亦可包含一有效量的柳兰萃取物及一医药上可接受的载体，该组合物是以粉末状、颗粒状、液状、胶状或膏状存在。以下将配合图式进一步说明本专利技术的实施方式，下述所列举的实施例是用以阐明本专利技术，并非用以限定本专利技术的范围，任何熟习此技艺者，在不脱离本专利技术的精神和范围内，当可做些许更动与润饰，因此本专利技术的保护范围当视后附的申请专利范围所界定者为准。附图说明图1是本专利技术实施例的柳兰萃取物于提升转谷氨酰胺酶1(Transglutaminase1，TGM1)基因、角蛋白1(Keratin1，KRT1)基因、角蛋白10(Keratin10，KRT10)基因及角蛋白14(Keratin14，KRT14)基因表现量的直方图；图2是本专利技术实施例的柳兰萃取物于提升水通道蛋白3(Aquaporin3，AQP3)基因表现量的直方图；图3是本专利技术实施例的柳兰萃取物于提升聚角蛋白微丝(Filaggrin，FLG)基因表现量的直方图；图4是本专利技术实施例的柳兰萃取物于角质细胞中提升水通道蛋白的蛋白质表现的免疫荧光染色图；图5是为本专利技术实施例的柳兰萃取物于促进角质细胞分泌玻尿酸的效果的直方图；图6是为；本专利技术实施例的柳兰萃取物于舒缓皮肤泛红的效果的直方图。具体实施方式实施例1本专利技术的柳兰萃取物的制备方法柳兰(Epilobiumangustifolium)为柳叶菜科(Onagraceae)多年生草本植物，生于海拔3100～4250米的山坡林缘、林下及河谷湿草地，茎为直立状高约1米，叶为披针形且无叶柄，边缘有细锯齿，两面被微毛，花穗长且为红紫或淡红色，花期为6～8月，是理想的夏季花卉，目前已知柳兰具有调经活血、消肿止痛、治疗月经不顺、骨折、关节扭伤的功效。在本专利技术一实施例中，将柳兰整株清洗，取洗净后的柳兰整株与水的萃取溶剂以5～20∶1～5的液固比混合，在溶剂中进行萃取0.5～3小时后，加入酒精去除悬浮物质，以获得粗萃取物。萃取后冷却至室温，将该粗萃取物经由0.45～0.2微米的滤网过滤以获得滤液。最后，将该滤液于45～70℃进行减压浓缩并加入防腐剂，得到本专利技术的柳兰萃取物。实施例2本专利技术柳兰萃取物提升角质细胞中TGM1、KRT1、KRT10、KRT14、APQ3及FLG的基因表现量本专利技术以人类初代皮肤角质细胞(humanprimaryepidermalkeratinocytes，HPEK)进行TGM1、KRT1、KRT10、KRT14、APQ3及FLG的基因分析。该人类初级皮肤角质细胞购自CELLnTEC公司(瑞士)编号HPEK-50，将该细胞培养于无血清的角质细胞培养液(keratinocyte-SFM)(Gibco公司，编号为#10724-011，美国)。将人类初代角质细胞分成两组：(1)加入本专利技术的柳兰萃取物的实验组以及(2)空白控制组，接着将角质细胞加入裂解液(lysisbuffer)收集成管后，使用RNA萃取试剂套组(购自Geneaid公司，中国台湾，LotNo.FC24015-G)分别收集两组角质细胞内的RNA，接着利用III反转录酶(购自Invitrogene公司，美国，编号18080-051)以2000ng的萃取RNA为模板并以引物产生mRNA反转录的相应cDNA产物，接着利用ABIStepOnePlusTMReal-TimePCRsystem(ThermoFisherScientific公司，美国)以及KAPASYBRFAST(购自Sigma公司，美国，编号38220000000)将两组反转录后产物分别以表一的组合引物进行定量实时反转录聚合酶连锁反应(quantitativereal-timereversetranscriptionpolymerasechainreaction)试验，定量TGM1基因、KRT1基因、KRT10基因、KRT14基因、APQ3基因及FLG基因的mRNA表现量，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种柳兰萃取物用于制备提升转谷氨酰胺酶(Transglutaminase，TGM)基因、角蛋白(Keratin，KRT)基因、水通道蛋白(Aquaporin，AQP)基因及聚角蛋白微丝(Filaggrin，FLG)基因表现量的医药组合物的用途，其中该柳兰萃取物是以一溶剂萃取一柳兰所获得，该溶剂为水、醇、或醇水混合物，该溶剂与该柳兰的液固比为5～20∶1～5，且该萃取步骤是在50℃～100℃进行。

【技术特征摘要】
2018.04.02 TW 1071116921.一种柳兰萃取物用于制备提升转谷氨酰胺酶(Transglutaminase，TGM)基因、角蛋白(Keratin，KRT)基因、水通道蛋白(Aquaporin，AQP)基因及聚角蛋白微丝(Filaggrin，FLG)基因表现量的医药组合物的用途，其中该柳兰萃取物是以一溶剂萃取一柳兰所获得，该溶剂为水、醇、或醇水混合物，该溶剂与该柳兰的液固比为5～20∶1～5，且该萃取步骤是在50℃～100℃进行。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述转谷氨酰胺酶基因是转谷氨酰胺酶1(Transglutaminase1，TGM1)基因。3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述角蛋白基因包含角蛋白1(Keratin1，KRT1)基因、角蛋白10(Keratin10，KRT10)基因及角蛋白14(Keratin14，KRT14)基因。4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述医药组合物会维持角质细胞的排列，使皮肤角质层结构完整。5.一种柳兰萃取物用于制备提升角质细胞中水通道...

【专利技术属性】
技术研发人员：林咏翔，张蓉，
申请(专利权)人：大江生医股份有限公司，
类型：发明
国别省市：中国台湾,71