一种合成DNA-PK抑制剂STL127705的方法技术

本发明专利技术公开了一种合成DNA‑PK抑制剂STL127705的方法。本发明专利技术采用逆合成分析，以2‑甲硫醚‑4‑氯嘧啶‑5‑甲酸乙酯为起始原料，先后经过氨化，水解，酰胺缩合，合环，氧化，取代等6步反应制备得到目标化合物，总收率为36.8％，纯度达到95.5％，产物结构通过

A METHOD FOR SYNTHESIS OF DNA-PK INHIBITOR STL127705

【技术实现步骤摘要】
一种合成DNA-PK抑制剂STL127705的方法
本专利技术属于生物领域，涉及一种合成DNA-PK抑制剂STL127705的方法。
技术介绍
DNA依赖的蛋白激酶(DNA-PK)是由DNA依赖的蛋白激酶催化亚单位(DNA-PKcs)与Ku蛋白(由Ku70和Ku80组成的蛋白异构体)组成的一种蛋白复合物，其功能是启动DNA双链断裂的非同源末端连接修复(NHEJ)[1-4]。DNA损伤诱导剂和放疗已经广泛的应用于临床肿瘤治疗，其抗肿瘤机制为诱导肿瘤细胞发生致死性的DNA双链断裂(DSB)，DSB主要是通过非同源末端连接来修复的，因此在此修复过程中起关键作用的DNA-PK的抑制剂就具有增强放化疗敏感性的作用[5,6]。奥拉帕尼是一种多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)抑制剂，其可阻断参与修复受损DNA的酶[7-9]。2014年，美国FDA批准奥拉帕尼应用于BRCA基因缺陷相关的卵巢癌的治疗。随着奥拉帕尼的临床获批，DNA修复抑制剂引起了广大研究者的注意，越来越多的新型DNA修复抑制剂被研发并投入到临床试验当中。研究发现，STL127705是一种具有嘧啶并嘧啶二酮骨架结构的DNA-PK的抑制剂，其对肿瘤细胞的杀伤效应不大，但其能够通过阻断DNA修复通路，极大地增强DNA损伤诱导剂或放疗的抗肿瘤功效[10]。有关STL127705的合成方法之前未见报道，从其化学结构分析，可由3,4-二甲氧基苯乙胺与含有嘧啶并嘧啶二酮结构的衍生物缩合而成；嘧啶并嘧啶二酮结构化合物可由4-氨基嘧啶-5-酰胺衍生结构合环反应制备而得；4-氨基嘧啶-5-酰胺衍生物可由相应的4-氨基-5-嘧啶甲酸衍生物与3-氟苯胺酯化缩合制备(图1)。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种合成DNA-PK抑制剂STL127705的方法。本专利技术要求保护一种合成STL127705的方法，如图2所示，包括：将化合物5与3,4-二甲氧基苯乙胺于有机溶剂中进行取代反应，反应完毕得到所述STL127705；上述方法中，所述化合物5与3,4-二甲氧基苯乙胺的投料摩尔比为1：1-4；具体为1:1.5；所述取代反应步骤中，温度为20-100℃；具体为80℃；时间为1-6h；具体为2h；所述有机溶剂选自N,N-二甲基乙酰胺(DMA)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)和二氧六环中至少一种。本专利技术还要求保护合成STL127705所用中间体化合物，也即化合物5，本专利技术提供的制备化合物5的方法，包括：将化合物4在氧化剂存在的条件下进行氧化反应，反应完毕得到所述化合物5；上述方法中，所述氧化剂选自间氯过氧苯甲酸(m-CPBA)、双氧水、高锰酸钾和重铬酸钾中至少一种；所述化合物4与氧化剂的投料摩尔比为1：2-10；具体为1:5；所述氧化反应步骤中，温度为0-80℃；具体为室温；时间为4-24h；具体为12h；所述反应在有机溶剂中进行；所述有机溶剂具体选自二氯甲烷、四氢呋喃和丙酮中至少一种。本专利技术采用逆合成分析，以2-甲硫醚-4-氯嘧啶-5-甲酸乙酯为起始原料，先后经过氨化，水解，酰胺缩合，合环，氧化，取代等6步反应制备得到目标化合物，总收率为36.8％，纯度达到95.5％，产物结构通过1H-NMR、13C-NMR、MS等表征，证明结构正确。附图说明图1为目标化合物STL127705的逆合成路线分析。图2为本专利技术提供的目标化合物STL127705的合成路线。图3为目标化合物的互变异构现象。图4为化合物1的质谱。图5为化合物2的质谱。图6为化合物2的氢谱。图7为化合物3的氢谱。图8为化合物4的质谱。图9为化合物4的氢谱。图10为化合物5的质谱。图11为化合物5的氢谱。图12为目标化合物STL127705的质谱。图13为目标化合物STL127705的氢谱(室温)。图14为目标化合物STL127705的氢谱(80℃)。图15为目标化合物STL127705的纯度。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术并不限于以下实施例。所述方法如无特别说明均为常规方法。所述原材料如无特别说明均能从公开商业途径获得。实施例1、1实验部分1.1仪器与试剂实验中相关化学试剂均为国产分析纯，无水溶剂用常规方法干燥处理。反应监测采用TLC法，薄层层析硅胶板的型号为0.25mmE.Merck(GF254)；柱层析分离纯化采用快速制备仪器BiotageIsoleraI，所用的硅胶为300-400mesh。反应收率为过柱纯化后计算而得。熔点采用X4型显微熔点仪测定，质谱采用LCQ-DecaXP/Ad型(ThermoElectron)，离子源采用电喷雾离子化(ESI)，1H-NMR和13C-NMR采用400MHz型BrukerAvanceⅢ核磁共振波谱仪器。1.2实验方法1.2.1化合物1的合成将5.00g(21.5mmol)2-甲硫醚-4-氯嘧啶-5-甲酸乙酯溶于20mL四氢呋喃中，向反应液中加入5mL25％氨水溶液，在室温下反应2h，TLC监测反应，待反应结束后向反应液中加入30mL饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残留物过柱分离纯化(PE/EA,1:1)得到白色固体4.12g，收率89.3％，熔点130-131℃。ESI-MSm/z:214.0[M+H]+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.61(s,1H,H-4),7.84(s,2H,-NH2),3.47–3.41(q,J＝6.8Hz,2H,-OCH2CH3),2.45(s,3H,-SCH3),1.04–1.00(t,J＝6.8Hz,3H,-OCH2CH3).质谱图如图4所示。1.2.2化合物2的合成将4.12g(19.3mmol)化合物1溶于15mL甲醇中，向反应液中滴加入3mL0.50g/mL氢氧化锂水溶液，在50℃的条件下反应5h，TLC监测反应进行，待反应结束后向反应液中加入30mL饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残留物过柱分离纯化(PE/EA,1:3)得到白色固体3.25g，收率91.0％，熔点122-124℃。ESI-MSm/z:183.9[M-H]-.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.17(s,1H,-COOH),8.54(s,1H,H-4),7.89(s,1H,-NH2),7.82(s,1H,-NH2),2.47(s,3H,-SCH3).化合物2的质谱图和氢谱图如图5和图6所示。1.2.3化合物3的合成将3.25g(17.6mmol)化合物2和8.01g(21.1mmol)2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)溶于20mL干燥的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中，在氮气保护和室温的条件下，向反应液中加入4.6mL(26.4mmol)N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)，滴加完毕后反应10min，再向反应液中加入2.40g(21.1mmol)3-氟苯胺，在室温下反应12h后，TLC监测反应进行，待反应结束后向反应液中加入30mL饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙酸乙酯(20mL×4)萃取，合并有机相，经无水硫酸钠干燥，过滤，滤本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种合成STL127705的方法，包括：将化合物5与3,4‑二甲氧基苯乙胺于有机溶剂中进行取代反应，反应完毕得到所述STL127705；

【技术特征摘要】
1.一种合成STL127705的方法，包括：将化合物5与3,4-二甲氧基苯乙胺于有机溶剂中进行取代反应，反应完毕得到所述STL127705；2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述化合物5与3,4-二甲氧基苯乙胺的投料摩尔比为1：1-4；具体为1:1.5；所述取代反应步骤中，温度为20-100℃；具体为80℃；时间为1-6h；具体为2h；所述有机溶剂选自N,N-二甲基乙酰胺、N,N-二甲基甲酰胺和二氧六环中至少一种。3.化合物5，4.一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：景云荣，魏继承，郝婧玮，
申请(专利权)人：牡丹江师范学院，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23