一种精氨酸脱羧酶基因工程菌及其高密度发酵培养方法技术

本发明专利技术属于生物工程技术领域，涉及一种高密度细胞发酵方法，尤其涉及一种精氨酸脱羧酶基因工程菌及其高密度发酵培养方法。所述基因工程菌以E.coliK12为宿主，以pET28A为载体，表达adiA基因；所述adiA基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述工程菌可分泌高活性重组精氨酸脱羧酶，并且该工程菌可应用于中试高密度发酵培养，使重组精氨酸脱羧酶工业化生产成为可能。本发明专利技术发酵培养方法通过对发酵培养基的筛选及发酵诱导培养条件的优化，通过控制甘油、氨水的补加时间、补加速率及用量控制碳源与氮源的供应，通过调整搅拌转速，通气量控制氧的供应，从而实现菌体高密度生长和目标蛋白酶大量表达。

A Genetically Engineered Arginine Decarboxylase Strain and Its High Density Fermentation Culture Method

【技术实现步骤摘要】
一种精氨酸脱羧酶基因工程菌及其高密度发酵培养方法
本专利技术属于生物工程
，涉及一种高密度细胞发酵方法，尤其涉及一种精氨酸脱羧酶基因工程菌及其高密度发酵培养方法。
技术介绍
精氨酸脱羧酶(Argininedecarboxylase,ADC)，是一种磷酸吡哆醛(PLP)依赖型脱羧酶，以L-精氨酸为底物，脱去羧基后生成胍基丁胺(见图1)。胍基丁胺作为一种重要的生物胺，具有很大的生理功能和医药价值，而目前企业主要采用化学法生产胍丁胺，生产过程复杂，对环境污染严重。生物酶法具有环保、高效等特点，如何采用精氨酸脱羧酶大规模生产胍基丁胺，是人们研究的热点。大肠杆菌(Escherichiacoli,E.coli)体内存在两种精氨酸脱羧酶基因，一种编码基因为adiA；另一种编码基因为speA。中国专利申请(CN105062943A)公开了一种利用高产精氨酸脱羧酶的重组菌生产胍基丁胺的方法，所述重组菌以E.coliBL21(DE3)为宿主、pET20b(+)为表达载体，表达来源于E.coliBL21的精氨酸脱羧酶基因speA。利用所述重组菌生产精氨酸脱羧酶的方法，是将重组菌种子液接种至发酵培养基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种精氨酸脱羧酶基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌以E.ColiK12为宿主，以pET28A为载体，表达adiA基因；所述adiA基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种精氨酸脱羧酶基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌以E.ColiK12为宿主，以pET28A为载体，表达adiA基因；所述adiA基因核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.权利要求1所述精氨酸脱羧酶基因工程菌的高密度发酵培养方法，其特征在于，所述方法包括：种子液培养；将种子液接种到发酵培养基中，发酵诱导培养；补加碳源、氮源；控制溶氧量；碳源为甘油或葡萄糖，优选的，碳源为甘油；氮源为氨水。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，发酵培养基由以下成分及配比组成：甘油5～52g/L，蛋白胨8～45g/L，酵母粉2～36g/L，Na2HPO4·12H2O6～50g/L，K2HPO4·3H2O3～46g/L，磷酸二氢钾3～35g/L，氯化钠0.5～18g/L，硫酸镁0.5～15g/L，余量为水。4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，发酵诱导培养过程中，诱导剂为IPTG或...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁建国，张言慧，高先岭，
申请(专利权)人：山东国力生物科技有限公司，山东国力生物技术研究院，
类型：发明
国别省市：山东,37