一种创伤弧菌的菌蜕疫苗及其制备、应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，涉及一种创伤弧菌的菌蜕疫苗的制备方法，所述方法包括如下步骤：(1)制备温控表达载体；(2)将稳定转染所述温控表达载的体创伤弧菌低温增殖培养后升温诱导，至OD600趋于平稳后，收集菌蜕即得所述菌蜕疫苗；所述的温控表达载体为插入了SEQ ID NO.1所示序列的pRK415质粒。本发明专利技术还涉及以所述的方法制备获得的创伤弧菌的菌蜕疫苗，及所述的创伤弧菌的菌蜕疫苗在制备防治鱼类创伤弧菌感染的产品中的应用。

A Vibrio vulnificus molt vaccine and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种创伤弧菌的菌蜕疫苗及其制备、应用
本专利技术属于生物
，具体而言，涉及一种创伤弧菌的菌蜕疫苗及其制备、应用。
技术介绍
创伤弧菌(Vibriovulnificus)是一种广泛存在于近海的革兰氏阴性菌，嗜盐、嗜温、嗜碱，形态呈弧状、杆状等，有极端鞭毛，最适生长温度为28℃，兼性厌氧，在无NaCl及超过8％NaCl的培养基中不生长，可在0.5％NaCl及3％NaCl的蛋白胨水中生长，在含6％NaCl的蛋白胨水中生长良好。创伤弧菌与鳗弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌等同属弧菌属。创伤弧菌最早由Hollis分离培养，由Farner于1979年命名，是水生动物中最为常见且致病性较强的细菌之一，其中，海洋创伤弧菌弧菌更被称作“海洋中的无形杀手”。在创伤弧菌被命名之前，Roland曾发表过因人类创伤弧菌感染，引起小腿坏疽及休克的报道[1]。创伤弧菌是“人鱼共患病”的致病菌感染创伤弧菌的途径有两种，通过消化道或皮肤感染人类：食入含有创伤弧菌食物，例如生蚝、蚌类的海产及生鱼片，主要为未煮熟的海鲜；从皮肤直接感染，当皮肤或粘膜存在伤口时，创伤弧菌就侵入体内，诱发败血症及坏死性伤口感染等疾本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种创伤弧菌的菌蜕疫苗的制备方法，所述方法包括如下步骤：(1)制备温控表达载体；(2)将稳定转染所述温控表达载的体创伤弧菌低温增殖培养后升温诱导，至OD600趋于平稳后，收集菌蜕即得所述菌蜕疫苗；所述的温控表达载体为插入了SEQ ID NO.1所示序列的pRK415质粒。

【技术特征摘要】
1.一种创伤弧菌的菌蜕疫苗的制备方法，所述方法包括如下步骤：(1)制备温控表达载体；(2)将稳定转染所述温控表达载的体创伤弧菌低温增殖培养后升温诱导，至OD600趋于平稳后，收集菌蜕即得所述菌蜕疫苗；所述的温控表达载体为插入了SEQIDNO.1所示序列的pRK415质粒。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述的低温增殖培养的条件为：取正确转染所述温控表达载体的创伤弧菌重组子，接种于5mL含Tc(终浓度为15μg/mL)的LB液体培养基，28℃恒温摇床180rpm过夜培养后，转接至50mL含Tc(终浓度为15μg/mL...

【专利技术属性】
技术研发人员：周顺，刘丹阳，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：山东,37