一种孕妇外周血中胎儿细胞外游离核酸的富集装置制造方法及图纸

本实用新型专利技术提供一种孕妇外周血中胎儿细胞外游离核酸的富集装置，包括由上而下依次设置的液体储存腔、液体通道阀、反应腔、核酸样品柱和收集管，所述的液体储存腔包括分别与液体通道阀单独连通的裂解液储存腔、清洗液I储存腔和清洗液II储存腔，所述的反应腔包括反应腔上盖和反应腔本体，反应腔上盖一端通过液体通道阀连通液体储存腔，反应腔上盖另一端与反应腔连接，所述的收集管中设有纳米分子筛网。本实用新型专利技术简化传统的繁琐操作步骤，通过利用纳米级的分子筛，按照DNA片段大小进行筛选，达到分离孕妇血浆中细胞外游离的胎儿DNA的效果，更有利于早期发现胎儿在遗传信息中的异常，预防出生缺陷儿的发生。

A device for enriching fetal extracellular free nucleic acid in maternal peripheral blood

【技术实现步骤摘要】
一种孕妇外周血中胎儿细胞外游离核酸的富集装置
本技术涉及一种核酸富集装置，特别涉及一种孕妇外周血中胎儿细胞外游离核酸的富集装置，属于分子生物学领域。
技术介绍
1948年Mander和Metais发现人体外周血中存在着细胞外游离的部分降解了的人体内源性DNA片段，即循环脱氧核糖核酸(circulatingDNA)。然而受当时技术条件限制，直到近年游离核酸的检测才作为一种有效的微创性诊疗手段广泛应用于临床的各个方面，例如妊娠相关性疾病、肿瘤的发生发展、移植排斥反应等。由于循环脱氧核糖核酸检测具有早期、微创、样品容易获得、可以连续监测等特性，其检测在产前诊断，疾病的早期诊断、临床分期、疗效监测、预后判断等方面有着十分重要的作用。1997年香港中文大学卢煜明教授发现孕妇血浆中存在细胞外游离的胎儿DNA(Cell-freefetalDNA,cffDNA)，揭开了循环脱氧核糖核酸检测应用于产前诊断的序幕。细胞外游离胎儿DNA即胎儿生长发育期间，凋亡、坏死的细胞释放的源于胎儿的DNA片段，在降解成小片段之后通过胎盘屏障，进入孕妇血液循环系统。研究表明，细胞外游离胎儿DNA一般在怀孕7周后出现于孕妇的外周血中，并且在孕早期的3个月中，其含量以平均每周20%的幅度增长，直到3个月后达到相对稳定的平台期。由于细胞外游离胎儿DNA来源于胎儿凋亡、坏死的细胞，其中包含了胎儿的遗传信息，可以替代传统的羊膜穿刺、绒毛吸取等侵入性的细胞遗传学诊断。通过分析细胞外游离胎儿DNA，可以发现胎儿染色体畸变，预防出生缺陷儿的发生。通常正常人类血浆中也存在游离DNA，在孕妇的血浆中主要成分也是孕妇来源的游离DNA，而胎儿的游离DNA仅占其中的5-10%。在分析孕妇外周血中细胞外游离的胎儿DNA时，相对于孕妇本身的来源遗传信息，胎儿来源的遗传信息极其稀少，想要从大量孕妇的遗传信息背景中分析出胎儿的遗传信息对于生物信息学而言极其困难。当前分离提取孕妇血浆中细胞外游离的胎儿DNA的方法主要有：化学萃取法、硅柱吸附法以及磁珠吸附法。化学萃取法操作简便，成本低廉，但是萃取得到的DNA纯度较低，提取效率较差，DNA浓度也较低。硅柱吸附是将血浆中的游离DNA吸附在硅基固相载体上，通过洗涤后，最后洗脱获得纯度较高的游离DNA。磁珠吸附法是利用外表包被了硅质材料的磁珠，通过氢键和静电吸附力，在高盐环境中将核酸吸附在磁珠上，经过洗涤后，在低盐溶液中洗脱得到较高浓度的游离DNA。化学萃取法缺点较为明显，硅柱法虽然提取效率一般但是清洗较为彻底产物纯度较高，而磁珠法吸附法虽然清洗效果一般产物纯度较低但是提取效率较高，但是三种方法均无法很好分离孕妇的血浆中孕妇来源和胎儿来源的细胞外游离DNA。当前，提供一种分离孕妇的血浆中孕妇来源和胎儿来源的细胞外游离DNA的新型装置，对于利用孕妇外周血分析胎儿遗传信息的应用意义非凡。
技术实现思路
本技术的目的在于提供一种孕妇外周血中胎儿细胞外游离核酸的富集装置，简化传统的繁琐操作步骤，并且在此基础上，实现去除孕妇来源的细胞外游离DNA的效果，解决以上
技术介绍
中提出的问题。本技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种孕妇外周血中胎儿细胞外游离核酸的富集装置，包括由上而下依次设置的液体储存腔、液体通道阀、反应腔、核酸样品柱和收集管，所述的液体储存腔包括分别与液体通道阀单独连通的裂解液储存腔、清洗液I储存腔和清洗液II储存腔，所述的反应腔包括反应腔上盖和反应腔本体，反应腔上盖一端通过液体通道阀连通液体储存腔，反应腔上盖另一端与反应腔连接，所述的收集管中设有纳米分子筛网。作为优选，所述的反应腔、核酸样品柱和收集管之间均为可拆卸连接。作为优选，所述的液体通道阀为设有三个进口和一个出口的四通阀，三个进口分别连接裂解液储存腔、清洗液I储存腔和清洗液II储存腔，一个出口连接反应腔。作为优选，所述的反应腔上盖和反应腔本体均为锥形体，反应腔上盖的平面端和反应腔本体的平面端相接。作为优选，所述的反应腔本体两端开口分别设有上盖螺旋封口和下盖螺旋封口，反应腔上盖通过上盖螺旋封口与反应腔本体可拆卸连接，核酸样品柱通过下盖螺旋封口与反应腔本体可拆卸连接。作为优选，所述的核酸样品柱中设有用于截留游离核酸的硅基吸附柱。作为优选，所述的收集管一端端部设有收集管螺旋封口，核酸样品柱通过收集管螺旋封口与收集管可拆卸连接。本技术的有益效果是：本技术的一种孕妇外周血中胎儿细胞外游离核酸的富集装置，简化传统的繁琐操作步骤，通过利用纳米级的分子筛，按照DNA片段大小进行筛选，将片段较大的孕妇来源的细胞外游离DNA阻拦在筛网上，而片段较小的胎儿细胞外游离DNA则可以通过筛网，从而达到分离孕妇血浆中细胞外游离的胎儿DNA的效果，降低后续分析时孕妇来源的遗传信息背景，更有利于通过分析胎儿细胞外游离DNA，早期发现胎儿在遗传信息中的异常，预防出生缺陷儿的发生。附图说明图1是本技术的主视结构示意图；图2是本技术收集管的结构示意图。图中：1、裂解液储存腔，2、清洗液I储存腔，3、清洗液II储存腔，4、液体通道阀，5、反应腔上盖，6、上盖螺旋封口，7、反应腔本体，8、下盖螺旋封口，9、硅基吸附柱，10、核酸样品柱，11、收集管螺旋封口，12、纳米分子筛网，13、收集管。具体实施方式下面通过具体实施例，并结合附图，对本技术的技术方案作进一步的具体说明。应当理解，本技术的实施并不局限于下面的实施例，对本技术所做的任何形式上的变通和/或改变都将落入本技术保护范围。实施例：如图1所示的一种孕妇外周血中胎儿细胞外游离核酸的富集装置，包括由上而下依次设置的液体储存腔、液体通道阀4、反应腔、核酸样品柱10和收集管13，液体储存腔包括分别与液体通道阀单独连通的裂解液储存腔1、清洗液I储存腔2和清洗液II储存腔3。液体通道阀为设有三个进口和一个出口的四通阀，三个进口分别连接裂解液储存腔、清洗液I储存腔和清洗液II储存腔，一个出口连接反应腔。反应腔包括反应腔上盖5和反应腔本体7，反应腔上盖一端通过液体通道阀连通液体储存腔，反应腔上盖另一端与反应腔连接，反应腔上盖和反应腔本体均为锥形体，反应腔上盖的平面端和反应腔本体的平面端相接。反应腔本体两端开口分别设有上盖螺旋封口6和下盖螺旋封口8，反应腔上盖通过上盖螺旋封口与反应腔本体可拆卸连接，核酸样品柱通过下盖螺旋封口与反应腔本体可拆卸连接。核酸样品柱中设有用于截留游离核酸的硅基吸附柱9，收集管中设有纳米分子筛网12，收集管一端端部设有收集管螺旋封口11，核酸样品柱可通过收集管螺旋封口与收集管连接。反应腔、核酸样品柱和收集管之间均为可拆卸连接。本技术的具体使用方法如下：1、通过下盖螺旋封口8将反应腔本体7与核酸样品柱10连接在一起。2、向反应腔本体7中加入待提取的孕妇血浆样品。3、通过上盖螺旋封口6将反应腔本体7与反应腔上盖5连接在一起。4、通过液体通道阀4使得反应腔本体7与裂解液储存腔1相连通。5、裂解液储存腔1中裂解液在重力作用下流入反应腔7中，室温孵育10分钟，使得胍盐、蛋白酶充分消化血浆中大分子蛋白质。6、将核酸样品柱10与外部的真空泵相连通，打开真空泵，抽吸反应腔本体7中的液体，反应液通过硅基吸附本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种孕妇外周血中胎儿细胞外游离核酸的富集装置，其特征在于：该孕妇外周血中胎儿细胞外游离核酸的富集装置包括由上而下依次设置的液体储存腔、液体通道阀、反应腔、核酸样品柱和收集管，所述的液体储存腔包括分别与液体通道阀单独连通的裂解液储存腔、清洗液I储存腔和清洗液II储存腔，所述的反应腔包括反应腔上盖和反应腔本体，反应腔上盖一端通过液体通道阀连通液体储存腔，反应腔上盖另一端与反应腔连接，所述的收集管中设有纳米分子筛网。

【技术特征摘要】
1.一种孕妇外周血中胎儿细胞外游离核酸的富集装置，其特征在于：该孕妇外周血中胎儿细胞外游离核酸的富集装置包括由上而下依次设置的液体储存腔、液体通道阀、反应腔、核酸样品柱和收集管，所述的液体储存腔包括分别与液体通道阀单独连通的裂解液储存腔、清洗液I储存腔和清洗液II储存腔，所述的反应腔包括反应腔上盖和反应腔本体，反应腔上盖一端通过液体通道阀连通液体储存腔，反应腔上盖另一端与反应腔连接，所述的收集管中设有纳米分子筛网。2.根据权利要求1所述的一种孕妇外周血中胎儿细胞外游离核酸的富集装置，其特征在于：所述的反应腔、核酸样品柱和收集管之间均为可拆卸连接。3.根据权利要求1所述的一种孕妇外周血中胎儿细胞外游离核酸的富集装置，其特征在于：所述的液体通道阀为设有三个进口和一个出口的四通阀，三个进口分别连接裂解液储存腔、清洗液I储存腔和清洗液II...

【专利技术属性】
技术研发人员：张惠丹，戴敬，节淳皓，
申请(专利权)人：苏州恩科金生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：江苏,32