一种外周血胎儿游离DNA提取方法技术

技术编号:10686333 阅读:527 留言:0更新日期:2014-11-26 16:18
本发明专利技术涉及一种外周血胎儿游离DNA提取方法,包括1)取孕妇外周血,离心取上清液;2)取步骤1)得到的上清液于离心管中,加等体积消化液和蛋白酶复合物,55~62℃孵育;3)把步骤2)得到的样品在冰上冷却,沉淀蛋白,离心;4)转移步骤3)上清液与0.8倍体积磁珠混悬液混合,室温孵育;5)将步骤4)得到的样品置于磁力架上静置吸附后,吸取上清;6)将步骤5)得到的上清与磁珠混悬液室温孵育,置于磁力架上静置吸附后,弃掉上清,75%酒精洗涤2次,即得磁珠-目的DNA复合体;7)采用DNA洗脱液,将步骤6)获得的磁珠-目的DNA复合体在DNA洗脱液中旋涡振荡,置于磁力架上静置,吸取上清液,得到目的DNA。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种外周血胎儿游离DNA提取方法,其特征在于包括以下步骤:1)取2~10ml孕妇外周血,3~6℃1600g 离心8‑12min,将上清液于3~6℃16000g 离心8‑12min后再取上清液;2)取步骤1)中经16000g离心得到的上清液于离心管中,加等体积消化液和蛋白酶复合物,55~62℃孵育30min;3)把步骤2)得到的样品在冰上冷却,然后加入NH4AC沉淀蛋白,并充分混匀,5000g离心4‑6min;4)转移步骤3)上清液与0.8倍体积磁珠混悬液混合,室温孵育10min;5)将步骤4)得到样品置于磁力架上静置吸附后,吸取上清;6)将步骤5)得到的上清与1.5倍体积磁珠混悬液室温孵育10min,置于磁力架上静置吸附后,弃掉上清液,用75%酒精洗涤2次,即得磁珠‑目的DNA复合体;7)采用DNA洗脱液,将步骤6)获得的磁珠‑目的DNA复合体在DNA洗脱液中旋涡振荡,置于磁力架上静置,吸取上清液,得到目的DNA。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张丹丹叶桦陆庆宇阎贺张广春
申请(专利权)人:北京圣谷同创科技发展有限公司
类型:发明
国别省市:北京;11

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