抑制小鼠NPFFR2基因表达的shRNA制造技术

本发明专利技术公开了一种抑制小鼠NPFFR2基因表达的shRNA。技术方案是抑制小鼠NPFFR2基因表达的shRNA序列为：8810:5’‑GGTGGGAAATACTGTCGTTTG‑3’8811:5’‑GCTATTTGCCACCATCTATCT‑3’8812:5’‑GCAGTGTCAACCCTATTATTT‑3’8813:5’‑GGAATCCTTGATAGAGGAAAT‑3’将抑制小鼠NPFFR2基因表达的shRNA序列克隆至LV3(H1/GFP&Puro)慢病毒载体，获得含有上述shRNA序列的重组慢病毒质粒；将得到的重组慢病毒质粒转染小鼠细胞，实现抑制小鼠中NPFFR2基因表达的目的。

ShRNA Inhibiting the Expression of NPFFR2 Gene in Mice

【技术实现步骤摘要】
抑制小鼠NPFFR2基因表达的shRNA
本专利技术涉及一种shRNA序列，特别涉及一种抑制小鼠NPFFR2基因表达的shRNA。
技术介绍
神经肽FF2受体(neuropeptideFFreceptor2，NPFFR2)，是一种属于G蛋白偶联受体家族的膜蛋白，定位于5-5E1，由417个氨基酸组成，具有多种生物学功能，包括参与痛觉传导、血压、摄食、内分泌、体温等。由于NPFFR2广泛分布于体内以及广泛参与体内多种生物学过程，因此，NPFFR2的研究具有重要意义。RNA干扰(RNAinterference,RNAi)发生于大多数真核细胞中，是基因转录后水平调节表达的一种方式，作用机制是双链RNA(doublestrandsRNA,dsRNA)介导同源mRNA特异性降解并最终引起目的基因表达沉默。目前，该技术已广泛应用于特定基因表达的沉默，在基因表达调控研究及特定基因相关疾病的防治方面具有重要作用。短发夹RNA(shorthairpinRNA，shRNA)是一段具有紧密发夹环的RNA序列。利用基因工程方法将shRNA克隆至各类病毒载体中，并转染入宿主细胞后转录出shRNA，进而沉默特定本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抑制小鼠NPFFR2基因表达的shRNA，其序列结构是：8810:5’‑GGTGGGAAATACTGTCGTTTG‑3’8811:5’‑GCTATTTGCCACCATCTATCT‑3’8812:5’‑GCAGTGTCAACCCTATTATTT‑3’8813:5’‑GGAATCCTTGATAGAGGAAAT‑3’。

【技术特征摘要】
1.一种抑制小鼠NPFFR2基因表达的shRNA，其序列结构是：8810:5’-GGTGGGAAATACTGTCGTTTG-3’8811:5’-GCTATTTGCCACCATCTATCT-3’8812:5’-GCAGTGTCAACCCTATTATTT-3’8813:5’-GGAATCCTTGATAGAGGAAAT-3’。2.一种权利要求1所述的抑制小鼠NPFFR2基因表达的shRNA序列的应用，其特征在于包括以下步骤：步骤一、将抑制小鼠NPFFR2基因表达的shRNA序列克隆至LV3(H1/GFP&Puro)慢病毒载体，获得重组慢病毒质粒LV3(H1/GFP&Puro)-NPFFR2-shRNA：合成相应的反义链及正义链序列，NPFFR2-shRNA-8810正义链：5’-GGTGGGAAATACTGTCGTTTG-3’NPFFR2-shRNA-8810反义链：5’-CAAACGACAGTATTTCCCACC-3’NPFFR2-shRNA-8811正义链：5’-GCTATTTGCCACCATCTATCT-3’NPFFR2-shRNA-8811反义链：5’-AGATAGATGGTGGCAAATAGC-3’NPFFR2-s...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙瑜隆，李慧娟，况媛媛，张进，梅其炳，
申请(专利权)人：西北工业大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61