一种同时测定孟鲁司特钠及其制剂多种有关物质的方法技术

本发明专利技术涉及分析化学技术领域，尤其是一种同时测定孟鲁司特及多种有关物质的方法。采用HPLC测定，以苯基键合硅胶为填料的色谱柱；以0.15％三氟乙酸水溶液(A)‑0.15％三氟乙酸乙腈溶液(B)为流动相，进行梯度洗脱。检测波长为250～260nm，柱温为38～42℃；洗脱流速为1.0～2.0mL/min。本发明专利技术操作简便，能够快速、有效、准确地测定孟鲁司特及多种有关物质的含量。

A method for simultaneous determination of various related substances in montelukast sodium and its preparations

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定孟鲁司特钠及其制剂多种有关物质的方法
本专利技术属于医药分析化学
，更具体地说，本专利技术涉及一种同时测定孟鲁司特钠及其制剂多种有关物质的方法。
技术介绍
孟鲁司特钠(MontelukastSodium)是一种能显著改善哮喘炎症指标的强效口服药物。生物化学和药理学的生物测定显示，孟鲁司特对CysLT1受体有高度的亲和性和选择性(与其它有药理学重要意义的气道受体如类前列腺素、胆碱能和β-肾上腺能受体相比)。孟鲁司特能有效地抑制LTC4，LTD4、LTE4与CysLT1受体结合所产生的生理效应而无任何受体激动活性。目前的研究认为孟鲁司特并不拮抗CysLT2受体。该药物是由美国Merck公司开发，商品名为“Singulair”，上市剂型有薄膜衣片、咀嚼片及颗粒剂，规格分别为10mg、5mg、4mg。孟鲁司特钠为光敏性药物，易光解和氧化，主要杂质有亚砜及异构体、顺式异构体、迈克加成物、酮基甲醇、甲基酮和甲基苯乙烯。其中降解杂质亚砜及异构体、顺式异构体酮基甲醇和未知杂质，工艺杂质有迈克加成物、甲基酮、甲基苯乙烯和MT8。这些杂质可能会影响孟鲁司特钠的药效，这对于药品的安全性、有效性、质量可控性和稳定性都是极为不利的。因此，准确测定孟鲁司特钠原料及其制剂中有关物质的含量，是评价孟鲁司特钠原料药及其制剂质量的重要指标。探明降解杂质的降解途径，对于原料药的合成、储藏以及制剂相关辅料的选择、制剂工艺、包装材料和储藏条件的选择都是至关重要的。目前，孟鲁司特钠及其制剂的有关物质检测方法收载于美国药典、英国药典、欧洲药典、日本药典和印度药典，美国药典、英国药典和日本药典中收载的孟鲁司特钠制剂中有关物质测定方法均相同。但经专利技术人方法重现检验，国外药典方法不能有效分离亚砜及其异构体，而该杂质是孟鲁司特钠原料和制剂中降解杂质，也是主要控制杂质，亚砜及其异构体完全分离后对探明该物质的降解途径有着重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种更为简便、灵敏高效的测定孟鲁司特钠多种有关物质的方法，以能够快速、准确地、全面的同时测定孟鲁司特钠原料药及其制剂中有关物质含量。为实现本专利技术目的，本专利技术的技术方案如下：提供一种高效液相色谱法同时测定孟鲁司特钠及其制剂多种有关物质，色谱条件为：固定相是以苯基键合硅胶为填料的色谱柱；流动相A是0.15％三氟乙酸水溶液，流动相B是0.15％三氟乙酸乙腈溶液；进行梯度洗脱，梯度条件为：梯度1流动相的体积比为：A：B＝57～63％：43～37％，进样3～16min后流动相变化为梯度2，梯度2流动相的体积比为：A：B＝46～51％：54～49％，进样30～35min后流动相变化为梯度1，总运行时间为35～40min；检测波长250～260nm，柱温为38～42℃；洗脱流速为1.0～2.0mL/min。在一些实施例中，梯度1流动相优选的体积比为：A：B＝60：40。在一些实施例中，梯度2流动相优选的体积比为：A：B＝49：51。在一些实施例中，检测波长优选255nm。在一些实施例中，洗脱流速优选1.5mL/min。在一些实施例中，进样样品检测过程中，样品进样量为20～100μL。在一些实施例中，所述总运行时间35min后，再在梯度1条件下运行5min。在一些实施例中，所述色谱柱填料粒径为2～5μm；颗粒平均直径为4.6mm。在一些实施例中，所述色谱柱的填料粒径为3.5μm。在一些实施例中，配制过程中选用良溶剂对孟鲁司特钠、孟鲁司特二环己胺盐对照品及相关杂质进行溶解，所述良溶剂是甲醇或甲醇和水的混合物。优选甲醇：水＝3：1。本专利技术提到的测定方法，其洗脱流速设定为一般技术人员公知的常识，常见的范围一般为0.5mL/min至2mL/min，本专利技术优选1.4～1.6mL/min，更优选1.5mL/min。本专利技术的方法与现有技术相比具有以下优点和积极效果：(1)采用水-乙腈二元体系，两段洗脱，更简便，更高效；(2)本专利技术可将孟鲁司特钠原料和制剂中的亚砜及异构体完全分离；(3)本专利技术对于孟鲁司特钠原料和制剂中顺式异构体检测更灵敏，采用各种破坏条件下的孟鲁司特钠原料溶液和片粉溶液作为供试品进行色谱条件的筛选，除孟鲁司特外，可以同时检测6种有关物质，且各有关物质之间的分离度均可大于1.5，因此本专利技术的适用范围更广。附图说明图1为孟鲁司特各混合杂质溶液的HPLC色谱图；图2为孟鲁司特钠片有关物质测定系统适用性溶液的HPLC色谱图；图3为孟鲁司特钠片有关物质测定未经破坏的片粉溶液的HPLC色谱图；图4为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经强碱破坏后的HPLC色谱图；图5为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经强酸破坏后的HPLC色谱图；图6为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经氧化破坏后的HPLC色谱图；图7为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经光照坏后的测HPLC色谱图；图8为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经高温破坏后的HPLC色谱图；图9为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(柱温38℃)的HPLC色谱图；图10为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(柱温42℃)的HPLC色谱图；图11为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流动相比例为105％)的HPLC色谱图；图12为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流动相比例为95％)的HPLC色谱图；图13为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流速为1.4ml/min)的HPLC色谱图；图14为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流速为1.6ml/min)的HPLC色谱图；图15为美国药典方法测定孟鲁司特钠片有关物质系统适用性溶液的HPLC色谱图；图16为美国药典方法测定孟鲁司特钠片有关物质片粉溶液的HPLC色谱图；图17为印度药典原料方法测定孟鲁司特各混合杂质溶液的HPLC色谱图；图18为印度药典孟鲁司特片方法测定各杂质混合溶液的HPLC色谱图；具体实施方式下述是结合具体实施例进一步阐述本专利技术。但这些实施例仅限于说明本专利技术而不是用于限制本专利技术的保护范围。下列实施例中未注明具体实验条件的实验方法，通常按照常规条件。下述实施例中，所述孟鲁司特钠原料药来自印度Morepen公司，纯度大于99.5％。孟鲁司特二环己胺盐对照品来源于欧洲药典委员会，纯度99.5％；孟鲁司特亚砜对照品来源于TorontoReseachChemicals公司，纯度98％；MT8对照品来源于印度Morepen公司，纯度98.9％；酮基甲醇对照品来源于TorontoReseachChemicals公司，纯度96％；甲基酮对照品来源于TorontoReseachChemicals公司，纯度98％；甲基苯乙烯对照品来源于印度Morepen公司，纯度95％。下述实施例中，检测采用的仪器设备为：Waters高效液相色谱仪(2695e)(美国沃特世公司)；PDA检测器(美国沃特世公司)。实施例1孟鲁司特及各杂质混合溶液测定，精密量取孟鲁司特二环己胺盐对照品溶液和各种已知杂质对照品溶液适量，用甲醇∶水＝3∶1的混合溶液配制成约含有孟鲁司特40μg/ml、亚砜1μg/ml、MT81μg/ml、酮基甲醇1μg/ml、甲基酮1μg/ml和甲基苯乙烯0.6μg/ml的主药+已知杂质的混合溶液。色谱条件如下：色谱柱为安捷伦苯基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种同时测定孟鲁司特钠及其制剂的多种有关物质的方法，其特征在于：采用高效液相色谱法，色谱条件为：固定相是以苯基键合硅胶为填料的色谱柱；流动相A是0.15％三氟乙酸水溶液，流动相B是0.15％三氟乙酸乙腈溶液；进行梯度洗脱，梯度洗脱条件为：梯度1流动相的体积比为：A：B＝57～63％：43～37％，进样3～16min后流动相变化为梯度2；梯度2流动相的体积比为：A：B＝46～51％：54～49％；总运行时间为25～40min；检测波长250～260nm；柱温为38～42℃；洗脱流速为1.0～2.0mL/min。

【技术特征摘要】
1.一种同时测定孟鲁司特钠及其制剂的多种有关物质的方法，其特征在于：采用高效液相色谱法，色谱条件为：固定相是以苯基键合硅胶为填料的色谱柱；流动相A是0.15％三氟乙酸水溶液，流动相B是0.15％三氟乙酸乙腈溶液；进行梯度洗脱，梯度洗脱条件为：梯度1流动相的体积比为：A：B＝57～63％：43～37％，进样3～16min后流动相变化为梯度2；梯度2流动相的体积比为：A：B＝46～51％：54～49％；总运行时间为25～40min；检测波长250～260nm；柱温为38～42℃；洗脱流速为1.0～2.0mL/min。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的梯度1流动相的体积比为：A：B＝60：40。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的梯度...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘欢，池慧波，王杏林，韩锋，王安，刘钫，高静，
申请(专利权)人：天津药物研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12