一种组织型纤溶酶原激活剂的重组蛋白及其制备方法与用途技术

本发明专利技术提出了一种组织型纤溶酶原激活剂的重组蛋白及其制备方法及用途。该融合蛋白通过将一个或多个CTP序列连接到tPA或其变体的C端来实现。与现有技术tPA类药物或分子相比，该融合蛋白溶栓效果更好，与PAI‑1的亲和力显著降低，热稳定性更高，半衰期更长，能够减少纤维蛋白原消耗率，降低潜在出血风险，具有更高的安全性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种组织型纤溶酶原激活剂tpa或其突变体的ctp融合蛋白及其制备工艺以及其在医疗上的应用。

技术介绍

1、组织型纤溶酶原激活剂(tissue plasminogen activator，tpa)是纤溶酶原激活剂的一种，主要由血管内皮细胞合成和释放，存在于哺乳动物的血浆中，是一种丝氨酸蛋白酶。tpa高效特异的与血栓中的纤维蛋白结合，所产生的tpa-纤维蛋白复合物能够快速高效地激活血凝块中的纤溶酶原，产生纤溶酶，使纤维蛋白降解成可溶性产物，达到溶解血栓，使栓塞的血管重新畅通的目的。tpa与纤维蛋白特异性结合后，其激活纤溶酶原的活性相较于游离状的tpa提高100倍，同时由于正常血液中极少有纤维蛋白生成，因此tpa不会使正常人发生系统性纤溶状态。高效、特异的溶栓性能使tpa成为治疗栓塞性疾病的理想药物。但由于tpa容易与血液中的纤溶酶原激活抑制剂(pai)形成复合物而丧失活性，同时因为可与肝细胞膜上的特异性受体结合而导致其半衰期仅4～6分钟，这就使得其用于溶栓时具有一定的局限性。由于存在以上问题影响溶栓效率，为达到治疗效果，tp本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种组织型纤溶酶原激活剂的重组蛋白，结构为tPA-(L-CTP)n，其中L为柔性肽接头或不存在，n为1～4的整数，tPA为天然tPA或具有相似功能的tPA变体，CTP为人hCGβ羧基末端肽序列或其突变体，CTP通过或不通过柔性肽接头连接到tPA的C端。

2.根据权利要求1所述的重组蛋白，其特征在于，所述的CTP的氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。

3.根据权利要求1所述的重组蛋白，其特征在于，所述的tPA是具有相似功能的tPA变体TNK-tPA或TNKA-tPA，所述的TNK-tPA的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述的TNKA-tPA的氨基酸序...

【技术特征摘要】

1.一种组织型纤溶酶原激活剂的重组蛋白，结构为tpa-(l-ctp)n，其中l为柔性肽接头或不存在，n为1～4的整数，tpa为天然tpa或具有相似功能的tpa变体，ctp为人hcgβ羧基末端肽序列或其突变体，ctp通过或不通过柔性肽接头连接到tpa的c端。

2.根据权利要求1所述的重组蛋白，其特征在于，所述的ctp的氨基酸序列如seq idno:1所示。

3.根据权利要求1所述的重组蛋白，其特征在于，所述的tpa是具有相似功能的tpa变体tnk-tpa或tnka-tpa，所述的tnk-tpa的氨基酸序列如seq id no:2所示，所述的tnka-tpa的氨基酸序列如seq id no:3所示。

4.根据权利要求1所述的重组蛋白，其特征在于，l为柔性肽接头，所述的柔性接头含有1～20个氨基酸，选自甘氨酸、丝氨酸、丙氨酸和苏氨酸；优选所述的柔性肽接头的氨基酸序列为(ggggs)m，其中m为1～4的整数；更优选所述的柔性肽接头氨基酸序列如seq id no:4所示。

5.根据权利要求1所述的重组蛋白，其特征在于，n为1或2。

6.根据权利要求1所述的重组蛋白，...

【专利技术属性】
技术研发人员：武卫党，马晓莉，杨紫薇，陈怡凝，田冠芳，陈玥雯，梁士民，闫凤英，
申请(专利权)人：天津药物研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：