具有1,2,3-三氮唑结构片段的生物碱化合物在制备促血管生成药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了具有1,2,3‑三氮唑结构片段的生物碱化合物在如下1)‑3)至少一项中的应用：1).制备促血管生成的药物；2).制备治疗缺血性疾病的药物；3).制备促进创伤愈合的药物。本发明专利技术涉及的5‑(1‑(4‑氟苄基)‑1H‑1,2,3‑三唑‑4‑基)‑2‑甲基‑N‑(2‑吗啉代乙基)苯甲酰胺能作为一种先导化合物，为研制开发有关促进血管生成从而治疗缺血性疾病及促进创伤愈合的药物奠定了基础。

Application of alkaloids with 1,2,3-triazole fragments in the preparation of angiogenic drugs

【技术实现步骤摘要】
具有1,2,3-三氮唑结构片段的生物碱化合物在制备促血管生成药物中的应用
本专利技术涉及一种生物碱化合物的应用，尤其是具有1,2,3-三氮唑结构片段的生物碱化合物在制备促血管生成药物中的应用。
技术介绍
血管生成(AngiogenesiS)是指在已有微血管基础上形成以毛细血管为主的新生血管系统。血管内皮细胞存在于血管内壁，对维持血管的完整结构及功能具有重要作用。自噬反应广泛存在于机体各细胞中，参与细胞内的物质转化，清除错误折叠的蛋白和衰老或损伤的细胞器，通过自我消化可为饥饿期的细胞提供能量来源。自噬反应受多种信号通路调控，与血管内皮细胞的增殖、迁移和血管生成有关。促血管生成对许多疾病的治疗是十分有益的，如对骨折及创伤病人，利用药物促进其创伤局部的血管生成，可以改善局部血液供应，加快愈合；对缺血性疾病的治疗：如动脉粥样硬化，糖尿病血管病变和周围动脉闭塞性疾病日益增多，部分血管病变范围过重，手术治疗效果不佳，利用化合物刺激血管生成已经成为一种新兴的治疗策略。1,2,3-三氮唑结构是一种非常重要的结构单元，它作为合成抗生素侧链的连接物，是许多抗生素(如β-内酰胺类抗生素)不可缺少的中间体：作为青霉烷砜类β-内酰胺酶抑制剂的泰唑巴坦的关键中间体就是1,2,3-三氮唑，该药物在临床上广泛应用于治疗多种细菌包括需氧菌和厌氧菌引起的感染，它具有毒性低、稳定性好、抑酶活性强的特点。除此以外1,2,3-三氮唑还可合成多种复杂的化合物，具有易于制备、稳定性良好和可形成多种非共价键作用等诸多优点，在药物有机合成领域具有广泛的应用前景。目前，研究人员通过对三氮唑结构衍生物的生物活性进行试验，发现该类衍生物具有杀菌消炎、抗肿瘤、抗结核、抗利什曼原虫、抗病毒和抗微生物等诸多优点。已有研究报道，具有1,2,3-三氮唑结构片段的生物碱化合物5-(1-(4-氟苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺其结构式为：对Keap1-Nrf2的蛋白-蛋白相互作用具有一定的抑制活性，由此可能对肿瘤、炎症、抗帕金森病及抗老年痴呆症具有预防和/或治疗作用，见专利号为ZL201610281376.3。但经权威机构检索查新，有关该三氮唑化合物在促进血管生成中的作用及应用，目前国内外尚未见报道。
技术实现思路
基于上述现有技术，提出下述专利技术：本专利技术的第一方面，提供具有1,2,3-三氮唑结构片段的生物碱化合物在如下1)-3)至少一项中的应用：1).制备促血管生成的药物；2).制备治疗缺血性疾病的药物；3).制备促进创伤愈合的药物。优选的，所述1,2,3-三氮唑结构片段的生物碱化合为5-(1-(4-氟苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺。优选的，所述5-(1-(4-氟苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺的有效剂量为5-20μM。优选的，所述5-(1-(4-氟苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺的有效剂量为10μM。优选的，所述5-(1-(4-氟苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺通过诱导内皮细胞的自噬来促进内皮细胞迁移与血管生成。优选的，所述5-(1-(4-氟苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺通过诱导内皮细胞的自噬降解血管生成抑制因子-人重组干扰素10(IP10)来促进内皮细胞迁移与血管生成。优选的，所述缺血性疾病包括动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、周围动脉闭塞性疾病、肢体缺血疾病、缺血性脑血管病、缺血性心血管病和缺血性肠病。优选的，所述创伤愈合包括骨折愈合、溃疡愈合和伤口缝合。有益效果本专利技术为研究内皮细胞血管生成和内皮细胞自噬之间的关联提供了一个强有力的化学工具，本专利技术涉及的5-(1-(4-氟苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺(以下简称JL025)能作为一种先导化合物，为研制开发有关促进血管生成从而治疗缺血性病变及促进创伤愈合的药物奠定了基础。附图说明图1JL025具有促进内皮细胞的迁移和成血管的能力。图中，A：光学显微镜下成血管与内皮细胞的迁移；B：JL025对血管长度的影响；C：JL025对伤口愈合的影响(*，P<0.05；**，P<0.01)。图2JL025体内促进血管生成。图中，A：Matrigel胶表面血管与激光扫描共聚焦显微镜下的血管密度；B：试验组中血管生成面积与基质胶面积比(*，P<0.05；**，P<0.01)。图3JL025对内皮细胞增殖不产生影响。图4JL025能够诱导内皮细胞自噬的发生。图中，A：激光扫描共聚焦显微镜下的免疫荧光图片；B：不同JL025浓度下LC3点状聚集阳性细胞数；C：不同JL025浓度下单个细胞LC3点状聚集数；D：不同JL025浓度下LC3-Ⅱ的相对水平；图5JL025通过自噬调节血管生成。图中，A：光学显微镜下成血管与内皮细胞的迁移；B：试验组对血管长度的影响；C：试验组对伤口愈合的影响；D：Matrigel胶表面血管与激光扫描共聚焦显微镜下的血管密度；E：试验组中血管生成面积与基质胶面积比(*，P<0.05；**，P<0.01)。图6JL025通过抑制血管生成抑制因子-干扰素诱导蛋白10(IP10)蛋白水平促进血管生成。图中，A：不同JL025浓度下细胞上清中的IP10含量；B：westernblot检测不同JL025浓度下内皮细胞中IP10蛋白表达水平；C：不同JL025浓度下IP10的相对含量水平；D：光学显微镜下成血管与内皮细胞的迁移；E：试验组对血管长度的影响；F：试验组对伤口愈合的影响(*，P<0.05；**，P<0.01)。图7JL025通过自噬途径降解IP10。图中，A：加入3-MA后westernblot检测试验结果；B：加入3-MA的试验组中IP10蛋白表达水平；C：干扰掉ATG5westernblot检测试验结果；D：干扰掉ATG5的试验组中IP10蛋白表达水平；E：加入3-MA的试验组中细胞上清中的IP10含量；F：干扰掉ATG5的试验组中细胞上清中的IP10含量(*，P<0.05；**，P<0.01)。具体实施方式应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。正如
技术介绍
部分介绍的，自噬反应受多种信号通路调控，与血管内皮细胞的增殖、迁移和血管生成有关，对促进血管生成重要作用。本专利技术研究了JL025对内皮细胞自噬的影响，以及内皮细胞自噬与内皮细胞的迁移和血管生成的影响。由此提出了本专利技术。为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本申请的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本申请的技术方案。本专利技术实施例中，所用到的部分试验材料如下：本专利技术中所使用的JL025采用申请号为：201610281376.3“一种具有1,2,3-三氮唑结构片段的生物碱化合物及其用途”专利中所公开的如下方法制备：(1)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.具有1,2,3‑三氮唑结构片段的生物碱化合物在如下1)‑3)至少一项中的应用：1).制备促血管生成的药物；2).制备治疗缺血性疾病的药物；3).制备促进创伤愈合的药物。

【技术特征摘要】
1.具有1,2,3-三氮唑结构片段的生物碱化合物在如下1)-3)至少一项中的应用：1).制备促血管生成的药物；2).制备治疗缺血性疾病的药物；3).制备促进创伤愈合的药物。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述1,2,3-三氮唑结构片段的生物碱化合为5-(1-(4-氟苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述5-(1-(4-氟苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺的有效剂量为5-20μM。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述5-(1-(4-氟苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺的有效剂量为10μM。5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟宁，牟鑫，江成世，张华，宫岩，
申请(专利权)人：济南大学，
类型：发明
国别省市：山东,37