一种β-葡萄糖苷酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种苹果β‑葡萄糖苷酶突变体及其应用，所述苹果β‑葡萄糖苷酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码基因如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术通过易错PCR的方法对野生型苹果β‑葡萄糖苷酶进行突变，获得最高酶活达198IU/ml的突变体菌株，是野生型菌株酶活力的9倍。

A Mutant of Beta-Glucosidase and Its Application

【技术实现步骤摘要】
一种β-葡萄糖苷酶突变体及其应用
本专利技术涉及一种β-葡萄糖苷酶突变体以及应用该突变体制备红景天苷的新方法，属于基因工程及微生物发酵领域。
技术介绍
红景天为多年生草本植物，主要生长在海拔1600～4000米的高寒、干燥、缺氧、强紫外线照射、昼夜温差大的地区，具有极强的环境适应能力和生命力。红景天提取物主要成份为红景天苷(Salidroside)和甙元酪醇、络塞维，具有增强免疫功能、保护心脑血管、增进性功能、增进记忆力及抗癌、抗抑郁的功效。传统的生产方法为红景天提取分离。以红景天根及根茎，粉碎成粗粉，用70％乙醇回流提取，分取提取液，减压回收乙醇，所得浓缩液加等量水搅拌均匀，静置，过滤，反复处理3次，滤液减压浓缩，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，乙酸乙酯和正丁醇部分分别回收溶剂，得酪醇粗品和红景天苷粗品。尽管化学合成红景天苷及其类似物技术已日趋成熟，但大多都需要进行选择性保护、活化或使用昂贵的金属催化剂，而生物合成具有反应条件温和，立体选择性高，反应过程简单，环境污染少等特点，在合成红景天苷方面显示出优越性。因此，红景天苷的生物合成途径和方法越来越受到关注。红景天苷的生物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种苹果β‑葡萄糖苷酶突变体，其特征在于，所述苹果β‑葡萄糖苷酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种苹果β-葡萄糖苷酶突变体，其特征在于，所述苹果β-葡萄糖苷酶突变体的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。2.编码如权利要求1所述苹果β-葡萄糖苷酶突变体的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示，或该序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸，且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；或在特定条件下与SEQIDNO.2杂交的核苷酸序列。3.含有编码如权利要求2所述苹果β-葡萄糖苷酶突变体基因的载体、工程菌或转基因细胞系。4.如权利要求3所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙敬方，
申请(专利权)人：安徽正方生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34