一种红景天苷的发酵生产方法技术

技术编号:21597440 阅读:45 留言:0更新日期:2019-07-13 15:46
本发明专利技术提供了一种利用苹果β‑葡萄糖苷酶作为新型催化剂,酶转化发酵生产及制备红景天苷的方法。采用基因重组技术,制备高效苹果β‑葡萄糖苷酶,加入的50mM~1000mM酪醇,10mM~500mM葡萄糖,在37~50℃下反应20~50h。获得红景天苷。

A Fermentation Method of Salidroside

【技术实现步骤摘要】
一种红景天苷的发酵生产方法
本专利技术涉及一种应用β-葡萄糖苷酶突变体发酵生产制备红景天苷的方法,属于基因工程及微生物发酵领域。
技术介绍
红景天苷(salidroside)是景天科红景天属植物的主要有效成分。红景天为多年生草本植物,主要生长在海拔1600~4000米的高寒、干燥、缺氧、强紫外线照射、昼夜温差大的地区,具有极强的环境适应能力和生命力。红景天苷具有增强免疫功能、保护心脑血管、增进性功能、增进记忆力及抗癌、抗抑郁多种生理药理活性,可以提高注意力、脑力和体力,进而影响中枢神经系统,对人体虚弱状态尤其有效,可以明显提高细胞或机体对外来有毒物质的免疫力,还可以阻止心脏过分紧张或心律失常,阻止肝脏中恶性肿瘤的生长和扩散。红景天苷传统的生产方法为利用植物红景天提取分离。即:以红景天根及根茎,粉碎成粗粉,用70%乙醇回流提取,分取提取液,减压回收乙醇,所得浓缩液加等量水搅拌均匀,静置,过滤,滤液减压浓缩,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,乙酸乙酯和正丁醇部分分别回收溶剂,得红景天苷粗品。由于环境恶化和人为过度采挖,野生红景天的数量迅速减少,人们也一直探索通过植物愈伤组织和细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高产苹果β‑葡萄糖苷酶的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌将苹果β‑葡萄糖苷酶突变体在大肠杆菌中重组表达获得;其中,所述苹果β‑葡萄糖苷酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种高产苹果β-葡萄糖苷酶的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌将苹果β-葡萄糖苷酶突变体在大肠杆菌中重组表达获得;其中,所述苹果β-葡萄糖苷酶突变体的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示,或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。2.如权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,编码所述苹果β-葡萄糖苷酶突变体基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示,或该序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸,且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列;或在特定条件下与SEQIDNO.2杂交的核苷酸序列。3.如权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌按如下方法制备:将苹果β-葡萄糖苷酶突变体装入载体pUC57中;用NdeI和EcoRI双酶切后割胶回收,与NdeI和EcoRI酶切的pET-24d(+)载体连接,转化大肠杆菌,得到基因工程菌。4.一种酶转化发酵生产红景天苷的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:步骤A,以权利要求1所述的基因工程菌发酵生产β-葡萄糖苷酶,得到重组β-葡萄糖苷酶发酵液...

【专利技术属性】
技术研发人员:孙敬方
申请(专利权)人:安徽正方生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:安徽,34

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1