一种具有低聚半乳糖合成能力的β-葡萄糖苷酶及其表达菌株和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种具有低聚半乳糖合成能力的β‑葡萄糖苷酶及其表达菌株和应用，其中具有低聚半乳糖合成能力的β‑葡萄糖苷酶，名称为BglD1，其原始来源于中国南海西沙群岛海底沉积物，具有如下氨基酸序列之一：(1)序列表中的SEQ ID No：2；(2)序列表中的SEQ ID No：2经取代、缺失或添加一个或几个氨基残基且编码相同功能蛋白质的氨基酸序列。本发明专利技术具有低聚半乳糖合成能力的β‑葡萄糖苷酶具有β‑葡萄糖苷酶和β‑半乳糖苷酶活性，可通过转糖苷作用合成低聚半乳糖，产物键型主要为β(1→3)和β(1→4)糖苷键。

A beta-glucosidase with galactoligosaccharide synthesis ability and its expression strain and Application

The invention discloses a beta-glucosidase with galactoligosaccharide synthesis ability and its expression strain and application, in which the beta-glucosidase with galactoligosaccharide synthesis ability, named BglD1, originally derived from seabed sediments of Xisha Islands, South China Sea, has one of the following amino acid sequences: (1) SEQ ID No:2 in the sequence table; (2) SEQ ID in the sequence table. No:2 is replaced, deleted or added with one or more amino residues encoding the same functional protein amino acid sequence. The beta-glucosidase with the synthesis ability of galacto-oligosaccharides has the activity of beta-glucosidase and beta-galactosidase, and can synthesize galacto-oligosaccharides through transglycoside reaction. The product bond types are mainly beta(1_3) and beta(1_4) glycoside bonds.

【技术实现步骤摘要】
一种具有低聚半乳糖合成能力的β-葡萄糖苷酶及其表达菌株和应用
本专利技术涉及一种具有低聚半乳糖合成能力的β-葡萄糖苷酶及其表达菌株和应用，属于生物

技术介绍
β-葡萄糖苷酶(EC3.1.2.21，β-glucosidase)属于水解酶类，主要水解糖苷或寡糖中的β-1,4-糖苷键，同时释放出末端非还原性的葡萄糖或其它糖苷配体。根据氨基酸序列及空间结构的相似性，被归类于糖苷水解酶1家族(GH1)、3家族、5家族、9家族、30家族以及116家族(http://www.cazy.org/)。GH1家族β-葡萄糖苷酶具有宽泛的底物催化特性，可兼具β-半乳糖苷酶、β-木糖酶、β-甘露糖酶等酶活力，因而具有重要的工业应用价值。低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides,GOS)是一种重要的益生元，是具有天然属性的功能性低聚糖，并已被广泛应用于婴幼儿奶粉、发酵乳、糖果、面包等食品中。低聚半乳糖的组成为Gal-(Gal)n-Glc/Gal(n＝0-6)，结构式如下式Ⅰ所示。目前GOS的生产主要以乳糖为原料，GH2和GH42家族的β-半乳糖苷酶为催化剂，反应过程中，酶将乳糖水本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有低聚半乳糖合成能力的β‑葡萄糖苷酶，名称为BglD1，其特征在于：具有如下氨基酸序列之一：(1)序列表中的SEQ ID No：2；(2)序列表中的SEQ ID No：2经取代、缺失或添加一个或几个氨基残基且编码相同功能蛋白质的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种具有低聚半乳糖合成能力的β-葡萄糖苷酶，名称为BglD1，其特征在于：具有如下氨基酸序列之一：(1)序列表中的SEQIDNo：2；(2)序列表中的SEQIDNo：2经取代、缺失或添加一个或几个氨基残基且编码相同功能蛋白质的氨基酸序列。2.权利要求1所述β-葡萄糖苷酶的编码基因，名称为BglD1，其特征在于：具有如下核苷酸序列之一：(1)序列表中的SEQIDNo：1；(2)SEQIDNo：1经取代、缺失或添加一个或几个核苷酸且编码相同功能蛋白质的核苷酸序列；(3)编码序列表中SEQIDNo：2蛋白质序列的多核苷酸序列。3.权利要求1所述β-葡萄糖苷酶的表达菌株，其特征在于：所述菌株的分类命名为：EscherichiacoliBL21(DE3)/pET22b(+)-BglD1，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，地址：中国.武汉.武汉大学，保藏日期：2019年2月25日，保藏编号：CCTCCNO：M2019111。4.含有权利要求2所述β-葡萄糖苷酶的编码基因的重组表达载体，其特征在于其构建方法包括如下步骤：步骤1：以含有所述β-葡萄糖苷酶编码基因的Bacillussp.细菌基因组DNA为模板，以P1和P2为引物进行PCR扩增，得到PCR扩增产物，所述引物为：P1：5′-TTCCATATGGCAATTATACAATTTCCA-3′P2：5′...

【专利技术属性】
技术研发人员：房伟，肖亚中，邓鹏军，方泽民，刘娟娟，
申请(专利权)人：安徽大学，
类型：发明
国别省市：安徽,34