一种具有吲哚胺2,3-双加氧酶结构抑制剂的纯化方法技术

本发明专利技术涉及一种具有吲哚胺2,3‑双加氧酶结构抑制剂的纯化方法。该方法将低纯度的式(I)化合物，用N,N'‑羰基二咪唑环合得到中间体，所得中间体析晶纯化除去异构体。将纯化的中间体水解，得到纯度较高的式(Ⅰ)化合物。

Purification of a structural inhibitor of indoleamine 2,3-dioxygenase

【技术实现步骤摘要】
一种具有吲哚胺2,3-双加氧酶结构抑制剂的纯化方法
本专利技术属于药物开发领域，具体涉及一种吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂的纯化方法。
技术介绍
吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenase,简写IDO)是一种与色氨酸代谢有关的蛋白酶。吲哚胺2,3-双加氧酶在体内不仅可以通过调节色氨酸，来参与调节神经系统和生理过程。还参与色胺等的代谢，5-羟色胺在吲哚胺2,3-双加氧酶的催化作用下可转化为5-羟吲哚乙酸，5-羟色胺在体内含量的减少很很可能导致抑郁症的发生。当今对吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂的研究还处于早期阶段，在医药领域方面的应用前景广阔。NewLink公司的NLG-919，Indoximod，Incyte公司的Epacadostat(INCB024360)，以及BMS，Flexus，Iomet,Iteos,Curadev等公司已经对IDO或TDO抑制剂展开深入的研究。吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂作为具有新药靶、新机制的药物，可应用于治疗肿瘤、阿尔茨海默病、抑郁症、白内障等多种重大疾病。CN1074304191A公开了一种吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂，其中代表性化合物化学名称为：(Z)-N-(3-溴-4-氟-苯基)-4-((2-(N-(环丙基磺酰基)-甲基亚磺酰亚胺)乙基)氨基)-N'-羟基-1，2，5-噁二唑-3-甲脒，结构如下：该化合物或其光学异构体对IDO具有很高的抑制活性，能够有效抑制IDO活性，也可用于抑制患者的免疫抑制。CN1074304191A还公开了用手性色谱柱拆分该化合物的方法。式(I)化合物是上述吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂的光学异构体，式(Ⅰ)化合物通过析晶、打浆等纯化方法很难达到纯化异构体的效果，因此急需开发一种式(Ⅰ)化合物的纯化方法。
技术实现思路
为解决式(Ⅰ)化合物的纯化问题，本专利技术提供了一种式(Ⅰ)化合物纯化方法，具体包括以下步骤：a、将式(I)化合物反应环合得到式(Ⅱ)化合物；b、式(Ⅱ)化合物在有机溶剂和不良溶剂的混合溶剂中纯化；c、式(Ⅱ)化合物经水解反应得到式(I)化合物。步骤a中，式(I)化合物在乙酸乙酯中和N,N'-羰基二咪唑反应环合得到式(Ⅱ)化合物。步骤a中式(Ⅰ)化合物手性异构体含量小于30％。步骤b中，所述不良溶剂选自甲基叔丁基醚、异丙醚、正己烷或正庚烷，优选甲基叔丁基醚；有机溶剂选自乙酸乙酯、乙酸异丙脂、乙酸丁酯或乙酸异丁酯；式(Ⅱ)化合物、有机溶剂和不良溶剂的投料比为1g：2～10ml：2～30ml，优选投料比为1g：2～5ml：3～10ml；纯化方法是式(Ⅱ)化合物加热溶于有机溶剂，加入不良溶剂降温析晶；纯化方法还可以是式(Ⅱ)化合物加热回流溶于有机溶剂，加入不良溶剂降温析晶。步骤c中，所述水解反应是指式(Ⅱ)化合物溶于四氢呋喃中，缓慢滴加氢氧化钠水溶液水解，经萃取，再干燥浓缩有机相得到式(I)化合物。本专利技术还提供一种式(Ⅱ)化合物的纯化方法，包括式(Ⅱ)化合物在有机溶剂和不良溶剂中析晶纯化；所述不良溶剂选自甲基叔丁基醚、异丙醚、正己烷或正庚烷，优选甲基叔丁基醚；有机溶剂选自乙酸乙酯、乙酸异丙脂、乙酸丁酯或乙酸异丁酯；式(Ⅱ)化合物、有机溶剂和不良溶剂的投料比为1g：2～10ml：2～30ml，优选投料比为1g：2～5ml：3～10ml；纯化方法是式(Ⅱ)化合物加热溶于有机溶剂，加入不良溶剂降温析晶；纯化方法还可以是式(Ⅱ)化合物加热回流溶于有机溶剂，加入不良溶剂降温析晶。其中，式(Ⅱ)化合物手性异构体含量小于30％。本专利技术工艺操作简单，能够高收率的纯化异构体含量小于30％的式(I)或式(Ⅱ)化合物,并且具有显著的异构体纯化效果。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步详细、完整地说明，但决非限制本专利技术，本专利技术也并非仅局限于实施例的内容。本专利技术的化合物Ⅰ的异构体检测方法是通过高效液相色谱仪来确定的。手性纯度的分析方法为：柱型号：CHIRALPAKIC，柱尺寸：0.46cmI.D.×25cmL×5μm，流动相：n-Hexane/IPA/Diethylamine＝70/30/0.1，流速：0.8ml/min，波长：254nm，柱温：35℃，进样量：10μl，进样浓度；1.0mg/mlinDCM10％EtOH20％Hexane70％。实施例一将异构体纯度为13.890％的式(Ⅰ)化合物(20mmol，10.5g)加入21ml乙酸乙酯中，加热溶解，回流条件下缓慢滴加甲基叔丁基醚31.5ml，回流搅拌2小时，自然降温析晶12小时，抽滤，甲基叔丁基醚洗涤，得到纯化的式(Ⅰ)化合物9g，摩尔收率为85.7％，式(Ⅰ)化合物异构体含量11.58％。实施例二将异构体纯度为1.700％的式(Ⅰ)化合物(20mmol，10.5g)加入30ml无水乙醇，回流打浆2小时，自然降温析晶12小时，抽滤，无水乙醇洗涤，得到纯化的式(Ⅰ)化合物9.5g，摩尔收率为90％，式(Ⅰ)化合物异构体含量1.450％。实施例三将异构体纯度为13.153％的式(Ⅰ)化合物(10mmol，5.25g)加入10.5ml丙酮溶解，回流条件缓慢加入25ml无水乙醇，回流搅拌2小时，自然降温析晶12小时，抽滤，无水乙醇洗涤，得到纯化的式(Ⅰ)化合物3.7g，摩尔收率为70％，式(Ⅰ)化合物异构体含量10.570％。实施例四第一步：式(Ⅱ)化合物的合成和纯化。将异构体纯度为12.891％的式(Ⅰ)化合物(20mmol，10.5g)加入160ml乙酸乙酯中，常温(15℃～30℃)条件下，加入N,N'-羰基二咪唑(30mmol，4.8g)，搅拌反应1.5小时，TLC检测反应完全，向反应液中加入1N盐酸洗涤，分液，有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽率，减压浓缩得白色固体式(Ⅱ)化合物。式(Ⅱ)化合物加入21ml的乙酸乙酯加热回流溶解，在回流的条件下加入甲基叔丁基醚31.5ml回流2小时自然降温析晶12小时，在10℃条件下搅拌2小时，抽滤，甲基叔丁基醚洗涤白色固体得到纯化的式(Ⅱ)化合物(9.0g)。式(Ⅱ)化合物异构体含量0.583％。第二步：式(I)化合物的合成。式(Ⅱ)化合物(9.0g)溶于90ml四氢呋喃溶液中，搅拌降温至0℃左右，控温0～10℃缓慢滴加氢氧化钠水溶液，约1小时滴加完毕，TLC检测反应完全，加入45ml饱和氯化钠水溶液，搅拌、分液，水相加入180ml乙酸乙酯萃取，合并有机相，180ml饱和氯化钠盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到式(Ⅰ)化合物(8.2g)，摩尔收率89.66％。式(Ⅰ)化合物异构体含量0.563％。实施例五第一步：式(Ⅱ)化合物的合成和纯化将异构体纯度为12.891％的式(Ⅰ)化合物(20mmol，10.5g)加入160ml乙酸乙酯中，常温(15℃～30℃)条件下，加入N,N'-羰基二咪唑(30mmol，4.8g)，搅拌反应1.5小时，TLC检测反应完全，向反应液中加入1N盐酸洗涤，分液，有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽率，减压浓缩得式(Ⅱ)化合物。式(Ⅱ)化合物加入21ml的乙酸乙酯加热回流溶解，在回流的条件下加入异丙醚31.5ml回流2小时自然降温析晶12小时，在10℃条件下搅拌2小时，抽率，异丙醚本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种式(I)化合物的纯化方法，包括以下步骤:

【技术特征摘要】
1.一种式(I)化合物的纯化方法，包括以下步骤:a、式(I)化合物环合得到式(Ⅱ)化合物；b、式(Ⅱ)化合物在有机溶剂和不良溶剂的混合溶剂中纯化；c、式(Ⅱ)化合物经水解反应得到式(I)化合物。2.根据权利要求1所述式(I)化合物的纯化方法，其特征在于，步骤a的式(Ⅰ)化合物手性异构体含量小于30％。3.根据权利要求1所述式(I)化合物的纯化方法，其特征在于，式(Ⅱ)化合物、有机溶剂和不良溶剂的投料比为1g：2～10ml：2～30ml，优选1g：2～5ml：3～10ml。4.根据权利要求1所述式(I)化合物的纯化方法，其特征在于，步骤b的纯化方法是式(Ⅱ)化合物加热溶于有机溶剂，加入不良溶剂降温析晶。5.根据权利要求1所述式(I)化合物的纯化方法，其特征在于，所述不良溶剂选自甲基叔丁基醚、异丙醚、正己烷或正庚烷，...

【专利技术属性】
技术研发人员：游军辉，王磊，刘建平，余俊，杜祖银，
申请(专利权)人：江苏豪森药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32