The invention relates to the preparation method and application of coumarin glycosides, which can effectively solve the preparation of novel coumarin glycosides with hepatoprotective activity and realize the application in the preparation of hepatoprotective drugs. The novel coumarin glycosides with hepatoprotective activity are genglycoside A (I) separated from the bark bone. The preparation method of the present invention is simple and reproducible, and the obtained compounds have high purity, which is conducive to further pharmacological and clinical research. The prepared new coumarin glycosides with liver protection activity, such as barbatoside A, barbatoside B, barbatoside D, are effective. It is used to prepare hepatoprotective drugs. It opens up a new way of hepatoprotective drugs and the medicinal and commercial value of small barbed bone. It has remarkable economic and social benefits.
【技术实现步骤摘要】
一种香豆素糖苷类化合物的制备方法及其应用
本专利技术涉及医药，特别是具有抗保护活性的新型香豆素糖苷类化合物的一种香豆素糖苷类化合物的制备方法及其应用。
技术介绍
肝脏将人体内多种内源性或者外源性毒性物质通过氧化、还原、水解等多种途径将其转化成无毒或者低毒的物质，是重要的代谢器官。肝脏易受病毒、药物、毒物及免疫病理因素的影响，如长期生活在有毒的环境中或过量饮酒都会诱发各类肝脏疾病，进而导致肝损伤的发生。肝损伤是形成肝炎、肝硬化和肝癌疾病的直接原因，临床发病率逐年升高，它已经成为严重危害全球人类健康的主要疾病之一。目前发病的重要原因普遍被认为是机体免疫应答和氧化应激反应，但对肝脏损伤的确切发病机制尚不明确，对于肝损伤尚无有效的治疗措施。传统中药在我国已有几千年的应用历史，是研究保肝药物的重要资源。小驳骨为爵床科植物小驳骨(GendarussavulgarisNees)的干燥地上部分。广泛分布于我国广西、广东、海南等省。具有祛瘀镇痛、续筋接骨之功效，主要用于跌打损伤、筋伤骨折、风湿骨痛、血瘀经闭及产后腹痛。在我国已有较长的应用历史，在《本草纲目拾遗》、《生草药性备要》、...
【技术保护点】
1.一种香豆素糖苷类化合物小驳骨酚苷A(genglycoside A，I)、小驳骨酚苷B(genglycoside B，Ⅱ)、小驳骨酚苷D(genglycoside D，Ⅲ)，分子结构式分别为：
【技术特征摘要】
1.一种香豆素糖苷类化合物小驳骨酚苷A(genglycosideA，I)、小驳骨酚苷B(genglycosideB，Ⅱ)、小驳骨酚苷D(genglycosideD，Ⅲ)，分子结构式分别为：其制备方法是，以小驳骨15–20kg为原料，以2–5倍原料重量、体积浓度为75％–95％的乙醇在90–95℃下加热回流提取3次，每次提取时间为1小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于3.6–4.8L的蒸馏水中，依次以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次3.6–4.8L，时间为1.5小时；将正丁醇萃取部位经AB-8大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用体积比为0:100、30:70、95:5乙醇-水混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用3.8–5.0L洗脱液，流速为5–10mLmin-1，将水洗脱液弃去，分别收集体积比为30:70、95:5乙醇-水的洗脱流份，减压浓缩分别得组分Fr.N1和组分Fr.N2；将组分Fr.N1经硅胶柱色谱分离，用体积比100︰3、100︰5、100︰7、100︰10、100︰20、100︰30、100︰50二氯甲烷-甲醇作洗脱液进行梯度洗脱，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，采用GF254薄层板，以体积比5︰2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以三氯化铁-铁氰化钾试剂作为显色剂，分别收集含有目标化合物小驳骨酚苷D(Ⅲ)和小驳骨酚苷A(I)的流份，即为亚组分Fr.N1-1和亚组分Fr.N1-3；将亚组分Fr.N1-1经SephadexLH-20凝胶柱色谱纯化，甲醇洗脱，每2mL为一流份，收集含有小驳骨酚苷D(Ⅲ)的流份，用甲醇重结晶即为小驳骨酚苷D(Ⅲ)；将亚组分Fr.N1-3经高效液相色谱纯化，体积浓度为40％甲醇洗脱，收集12min的洗脱峰，即为小驳骨酚苷A(I)；将组份Fr.N2经SephadexLH-20凝胶柱色谱纯化，甲醇洗脱，每10mL为一流份，收集含有化合物Ⅱ的流份，得到个亚组份Fr.N2-1，再经硅胶柱色谱纯化，用体积比100︰3、100︰5、100︰7、100︰10、100︰30的二氯甲烷-甲醇作洗脱液进行梯度洗脱，合并含有目标化合物小驳骨酚苷B(Ⅱ)的流份，减压浓缩后用甲醇重结晶即为化合物小驳骨酚苷B(Ⅱ)。2.根据权利要求1所述的香豆素糖苷类化合物的制备方法，其特征在于，由小驳骨20kg为原料，以2–5倍原料重量、体积比浓度95％的乙醇90℃加热回流提取3次，每次提取时间为1小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于4.8L的蒸馏水中，依次以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次4.8L，时间为1.5小时；将正丁醇萃取部位经AB-8大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用体积比为0:100、30:70、95:5乙醇-水混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用5.0L洗脱液，流速为10mLmin-1，将水洗脱液弃去，分别收集体积比为30:70、95:5乙醇-水的洗脱流份，减压浓缩后，分别为组分Fr.N1和组分Fr.N2；将组分Fr.N1经硅胶柱色谱分离，用体积比100︰3、100︰5、100︰7、100︰10、100︰20、100︰30、100︰50二氯甲烷-甲醇作洗脱液进行梯度洗脱，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，采用GF254薄层板，以体积比5︰2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以三氯化铁-铁氰化钾试剂作为显色剂，，分别收集含有化合物小驳骨酚苷D(Ⅲ)和小驳骨酚苷A(I)的流份，即为亚组分Fr.N1-1和亚组分Fr.N1-3；将亚组分Fr.N1-1经SephadexLH-20凝胶柱色谱纯化，甲醇洗脱，每2mL为一流份，收集含有化合物小驳骨酚苷D(Ⅲ)的流份，用甲醇重结晶即为化合物小驳骨酚苷D(Ⅲ)；将亚组分Fr.N1-3经制备高效液相色谱纯化，体积浓度为40％甲醇洗脱，收集12min的洗脱峰，即为化合物小驳骨酚苷A(I)；将组份Fr.N2经SephadexLH-20凝胶柱色谱纯化，甲醇洗脱，每10mL为一流份，收集含有化合物小驳骨酚苷B(Ⅱ)的流份，得到个亚组份Fr.N2-1，再经硅胶柱色谱纯化，用体积比100︰3、100︰5、100︰7、100︰10、100︰30的二氯甲烷-甲醇作洗脱液进行梯度洗脱，合并含有化合物小驳骨酚苷B(Ⅱ)的流份，减压浓缩后用甲醇重结晶即为化合物小驳骨酚苷B(Ⅱ)。3.根据权利要求1所述的香豆素糖苷类化合物的制备方法，其特征在于，由小驳骨15kg为原料，以3倍原料重量、体积浓度为75％的乙醇95℃加热回流提取3次，每次提取时间为1小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于3.6L的蒸馏水中，依次以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次3.6L，时间为1.5小时；将正丁醇萃取部位经AB-8大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用体积比为0:100、30:70、95:5乙醇-水混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用3.8L洗脱液，流速为5mLmin-1，将水洗脱液弃去，分别收集体积比为30:70、95:5乙醇-水的洗脱流份，减压浓缩后，分别为组分Fr.N1和组分Fr.N2；将组分Fr.N1经硅胶柱色谱分离，用体积比100︰3、100︰5、100︰7、100︰10、100︰20、100︰30、100︰50二氯甲烷-甲醇作洗脱液进行梯度洗脱，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，采用GF254薄层板，以体积比5︰2的二氯甲烷...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙彦君，高美玲，陈豪杰，冯卫生，韩瑞杰，崔卫东，赵晨，弓建红，王俊敏，刘延霆，陈辉，郝志友，赵悦亮，
申请(专利权)人：河南中医药大学，
类型：发明
国别省市：河南,41
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。