一种香豆素糖苷类化合物的制备方法及其应用技术

本发明专利技术涉及香豆素糖苷类化合物的制备方法及其应用，可有效解决制备新型香豆素糖苷类化合物，实现制备抗菌药物的问题，该化合物是从小驳骨药材中分离得到的小驳骨酚苷C(genglycoside C，I)、小驳骨酚苷E(genglycoside E，II)、小驳骨酚苷F(genglycosideF，III)，本发明专利技术制备的具有抗菌活性的新型香豆素糖苷类化合物小驳骨酚苷C（Ⅰ）、小驳骨酚苷E（Ⅱ）、小驳骨酚苷F（Ⅲ），作为唯一活性成分有效用于制备抗根癌农杆菌农药，开拓了抗菌农药的新途径和小驳骨的药用价值及商业价值，具有很好的实际应用价值，经济和社会效益显著。

Preparation and application of coumarin glycosides

The invention relates to the preparation method and application of coumarin glycosides, which can effectively solve the problem of preparing new coumarin glycosides and realizing the preparation of antimicrobial drugs. The compound is genglycoside C (I), genglycoside E (II), genglycoside F (III), which is separated from small bark, and the preparation method of the compound. The new coumarin glycosides C(I), E(II) and F(III) prepared with antimicrobial activity were used as the only active ingredients in the preparation of Agrobacterium tumefaciens pesticides, which opened up a new way of Antimicrobial Pesticides and its medicinal and commercial value. They have good practical application value, economic and social benefits. Significant.

【技术实现步骤摘要】
一种香豆素糖苷类化合物的制备方法及其应用
本专利技术涉及农药，特别是一种香豆素糖苷类化合物的制备方法及其应用。
技术介绍
化学合成农药的广泛使用，不仅污染环境，而且加速了耐药菌的出现，甚至出现了多药耐药菌。植物源农药具有不同的结构特征，由于结构的复杂性和多样性，具有已应用于农药领域具有不能比拟的优势，如生物降解快，毒性低，不易产生抗性，对环境无污染等优点，越来越受到研究者的广泛关注。因此，从中草药中寻找高效低毒的具有抗菌活性新型农药，研制选择性强、毒副作用低的抗菌农药是药学科研工作者迫切解决的首要问题。我国丰富的中药资源为药学工作者开发新型抗菌农药提供了物质基础。小驳骨为爵床科植物小驳骨(GendarussavulgarisNees)的干燥地上部分。广泛分布于我国广西、广东、海南等省。具有祛瘀镇痛、续筋接骨之功效，主要用于跌打损伤、筋伤骨折、风湿骨痛、血瘀经闭及产后腹痛。在我国已有较长的应用历史，在《本草纲目拾遗》、《生草药性备要》、《岭南采药录》、《陆川本草》等医药古籍中均有记载。2010年作为新增药材，收载于《中华人民共和国药典》。近年来关于小驳骨化学成分及生物活性的研究受到国内外学者的广泛关注，化学成分主要包括生物碱、黄酮、香豆素、三萜等类型。生物活性研究表明，具有抗炎、止痛、保肝、抗氧化、免疫抑制、抗血管生成、抗人获得性免疫缺陷病毒、驱虫、抗焦虑、抗氧化作用、抗炎等作用。本专利技术所涉及的香豆素糖苷类化合物及其生物活性，迄今为止未见有专利或文献公开报道。
技术实现思路
针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本专利技术之目的就是提供一种香豆素糖苷类化合物的制备方法及其应用，可有效解决制备新型香豆素糖苷类化合物，实现制备抗菌药物的问题。本专利技术解决的技术方案是，一种香豆素糖苷类化合物，该化合物是从小驳骨药材中分离得到的小驳骨酚苷C(genglycosideC，I)、小驳骨酚苷E(genglycosideE，II)、小驳骨酚苷F(genglycosideF，III)，分子结构式分别为：其制备方法是，以小驳骨15–20kg为原料，以2–5倍原料重量、体积浓度为75％–95％的乙醇加热90–95℃回流提取3次，每次提取时间为1小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于3.6–4.8L的蒸馏水中，依次以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次3.6–4.8L，时间为1.5小时；将正丁醇萃取部位经AB-8大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用体积比为0:100、30:70、95:5乙醇-水混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用3.8–5.0L洗脱液，流速为5–10mLmin-1，将水洗脱液弃去，分别收集体积比为30:70、95:5乙醇-水的洗脱流份，分别减压浓缩干燥，得组分Fr.N1和组分Fr.N2；将组分Fr.N1经硅胶柱色谱分离，用体积比100︰3、100︰5、100︰7、100︰10、100︰20、100︰30、100︰50二氯甲烷-甲醇作洗脱液进行梯度洗脱，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，采用GF254薄层板，以体积比5︰2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，在365nm下观察显蓝色荧光的斑点，收集含有目标小驳骨酚苷C(Ⅰ)、小驳骨酚苷E(Ⅱ)、小驳骨酚苷F(Ⅲ)的流份，得亚组分Fr.N1-3；将亚组分Fr.N1-3经制备高效液相色谱纯化，用体积浓度为40％甲醇洗脱，收集16min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷E(Ⅱ)；收集18min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷F(Ⅲ)；收集21min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷C(Ⅰ)。本专利技术制备的具有抗菌活性的新型香豆素糖苷类化合物小驳骨酚苷C(Ⅰ)、小驳骨酚苷E(Ⅱ)、小驳骨酚苷F(Ⅲ)，作为唯一活性成分有效用于制备抗根癌农杆菌农药，开拓了抗菌农药的新途径和小驳骨的药用价值及商业价值，具有很好的实际应用价值，经济和社会效益显著。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术的具体实施方式作详细说明。本专利技术在具体实施中可由以下实施例给出。实施例1本专利技术在具体实施中，一种香豆素糖苷类化合物，该化合物以小驳骨20kg为原料，以2–5倍原料重量、体积浓度为95％的乙醇加热90℃回流提取3次，每次提取时间为1小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于4.8L的蒸馏水中，依次以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次4.8L，时间为1.5小时；将正丁醇萃取部位经AB-8大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用体积比为0:100、30:70、95:5乙醇-水混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用5.0L洗脱液，流速为10mLmin-1，将水洗脱液弃去，分别收集体积比为30:70、95:5乙醇-水的洗脱流份，分别减压浓缩干燥，得组分Fr.N1和组分Fr.N2；将组份Fr.N1经硅胶柱色谱分离，用体积比100︰3、100︰5、100︰7、100︰10、100︰20、100︰30、100︰50二氯甲烷-甲醇作洗脱液进行梯度洗脱，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，采用GF254薄层板，以体积比5︰2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，在365nm下观察显蓝色荧光的斑点，收集含有目标化合物小驳骨酚苷C(Ⅰ)、小驳骨酚苷E(Ⅱ)、小驳骨酚苷F(Ⅲ)的流份，即为亚组分Fr.N1-3；将亚组分Fr.N1-3经制备高效液相色谱纯化，用体积浓度为40％甲醇洗脱，收集16min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷E(Ⅱ)；收集18min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷F(Ⅲ)；收集21min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷C(Ⅰ)。实施例2本专利技术在具体实施中，一种香豆素糖苷类化合物，以小驳骨15kg为原料，以3倍原料重量、体积浓度为75％的乙醇加热95℃回流提取3次，每次提取时间为1小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于3.6L的蒸馏水中，依次以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次3.6L，时间为1.5小时；将正丁醇萃取部位经AB-8大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用体积比为0:100、30:70、95:5乙醇-水混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用3.8L洗脱液，流速为5mLmin-1，将水洗脱液弃去，分别收集体积比为30:70、95:5乙醇-水的洗脱流份，分别减压浓缩干燥，得组分Fr.N1和组分Fr.N2；将组份Fr.N1经硅胶柱色谱分离，用体积比100︰3、100︰5、100︰7、100︰10、100︰20、100︰30、100︰50二氯甲烷-甲醇作洗脱液进行梯度洗脱，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，采用GF254薄层板，以体积比5︰2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，在365nm下观察显蓝色荧光的斑点，收集含有目标化合物小驳骨酚苷C(Ⅰ)、小驳骨酚苷E(Ⅱ)、小驳骨酚苷F(Ⅲ)的流份，即为亚组分Fr.N1-3；将亚组分Fr.N1-3经制备高效液相色谱纯化，用体积浓度为40％甲醇洗脱，收集16min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷E(Ⅱ)；收集18min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷F(Ⅲ)；收集21min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷C(Ⅰ)。实施例3本专利技术在具体实施中，一种香豆素糖苷类化合物，以小驳骨18kg为原料，以4倍原料重量、体积浓度为85％的乙醇加热92℃回流提取3次，每次提取时间为1小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于4.5L的蒸馏水中，依次以石油醚、乙酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种香豆素糖苷类化合物，该化合物是从小驳骨药材中分离得到的小驳骨酚苷C(genglycoside C，I)、小驳骨酚苷E(genglycoside E，II)、小驳骨酚苷F(genglycosideF，III)，分子结构式分别为：

【技术特征摘要】
1.一种香豆素糖苷类化合物，该化合物是从小驳骨药材中分离得到的小驳骨酚苷C(genglycosideC，I)、小驳骨酚苷E(genglycosideE，II)、小驳骨酚苷F(genglycosideF，III)，分子结构式分别为：其制备方法是，以小驳骨15–20kg为原料，以2–5倍原料重量、体积浓度为75％–95％的乙醇加热90–95℃回流提取3次，每次提取时间为1小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于3.6–4.8L的蒸馏水中，依次以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次3.6–4.8L，时间为1.5小时；将正丁醇萃取部位经AB-8大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用体积比为0:100、30:70、95:5乙醇-水混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用3.8–5.0L洗脱液，流速为5–10mLmin-1，将水洗脱液弃去，分别收集体积比为30:70、95:5乙醇-水的洗脱流份，分别减压浓缩干燥，得组分Fr.N1和组分Fr.N2；将组分Fr.N1经硅胶柱色谱分离，用体积比100︰3、100︰5、100︰7、100︰10、100︰20、100︰30、100︰50二氯甲烷-甲醇作洗脱液进行梯度洗脱，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，采用GF254薄层板，以体积比5︰2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，在365nm下观察显蓝色荧光的斑点，收集含有目标小驳骨酚苷C、小驳骨酚苷E、小驳骨酚苷F的流份，得亚组分Fr.N1-3；将亚组分Fr.N1-3经制备高效液相色谱纯化，用体积浓度为40％甲醇洗脱，收集16min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷E；收集18min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷F；收集21min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷C。2.根据权利要求1所述的香豆素糖苷类化合物，其特征在于，该化合物以小驳骨20kg为原料，以2–5倍原料重量、体积浓度为95％的乙醇加热90℃回流提取3次，每次提取时间为1小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于4.8L的蒸馏水中，依次以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次4.8L，时间为1.5小时；将正丁醇萃取部位经AB-8大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用体积比为0:100、30:70、95:5乙醇-水混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用5.0L洗脱液，流速为10mLmin-1，将水洗脱液弃去，分别收集体积比为30:70、95:5乙醇-水的洗脱流份，分别减压浓缩干燥，得组分Fr.N1和组分Fr.N2；将组份Fr.N1经硅胶柱色谱分离，用体积比100︰3、100︰5、100︰7、100︰10、100︰20、100︰30、100︰50二氯甲烷-甲醇作洗脱液进行梯度洗脱，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，采用GF254薄层板，以体积比5︰2的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，在365nm下观察显蓝色荧光的斑点，收集含有目标化合物小驳骨酚苷C、小驳骨酚苷E、小驳骨酚苷F的流份，即为亚组分Fr.N1-3；将亚组分Fr.N1-3经制备高效液相色谱纯化，用体积浓度为40％甲醇洗脱，收集16min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷E；收集18min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷F；收集21min的洗脱峰，得化合物小驳骨酚苷C。3.根据权利要求1所述的香豆素糖苷类化合物，其特征在于，以小驳骨15kg为原料，以3倍原料重量、体积浓度为75％的乙醇加热95℃回流提取3次，每次提取时间为1小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于3.6L的蒸馏水中，依次以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次3.6L，时间为1.5小时；将正丁醇萃取部位经AB-8大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用体积比为0:100、30:70、95:5乙醇-水混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用3.8L洗脱液，流速为5mLmin-1，将水洗脱液弃去，分别收集体积比为30:70、95:5乙醇-水的洗脱流...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙彦君，高美玲，陈豪杰，冯卫生，李孟，杨静，万焱，王俊敏，张艳丽，韩瑞杰，赵晨，
申请(专利权)人：河南中医药大学，
类型：发明
国别省市：河南,41