层粘连蛋白511产生促进剂、表皮基底膜稳定剂和/或表皮干细胞减少抑制或增加促进剂的筛选方法技术

本发明专利技术的目的在于提供简单地进行使MCSP阳性表皮基底干细胞增殖的药剂、或减少抑制的药剂的筛选的方法。提供以层粘连蛋白511的表达作为指标的层粘连蛋白511表达促进剂的筛选方法。另外，提供包含选自褐藻、红藻和绿藻中的至少1种的提取物的皮肤屏障、弹性、湿润和炎症的改善剂。

Screening methods for laminin 511 to produce promoters, epidermal basement membrane stabilizers and/or epidermal stem cells to reduce or increase inhibitors

The aim of the present invention is to provide a simple method for screening agents that can proliferate MCSP-positive epidermal basal stem cells or reduce inhibition. To provide a screening method for the expression promoter of laminin 511 with the expression of laminin 511 as an indicator. In addition, skin barrier, elasticity, moisture and inflammation improvers containing at least one extract from brown algae, red algae and green algae are provided.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】层粘连蛋白511产生促进剂、表皮基底膜稳定剂和/或表皮干细胞减少抑制或增加促进剂的筛选方法
本专利技术涉及表皮基底膜中的表皮干细胞的减少抑制或增加促进的

技术介绍
表皮是存在于皮肤最外层的皮肤组织。表皮主要由角质层、颗粒层、有棘层、和基底层构成。存在于基底层的基底细胞分裂，向外层移动。在该移动的过程中细胞发生去核而扁平化从而分化成角质层，角质层最终剥落。据说该周转的时间约为45天左右。但是，在老化的皮肤中，周转速度变慢，表皮整体变薄。已知其结果是产生屏障功能降低、水分含量降低等皮肤功能的降低。基底细胞是富于分裂性的细胞，但并不是无限地反复增殖，而是分裂一定次数就不再分裂。基底细胞通过存在于基底膜上的表皮基底干细胞的一部分分化而被重新供给。然而，已知随着老化表皮基底干细胞数减少，如果表皮基底干细胞数减少，则会表现表皮薄化、表皮干燥、屏障功能降低等老化征候。近年，开发了作为表皮基底干细胞标志物的MCSP抗体，通过使用该抗体，能够识别表皮基底干细胞。在各年龄男女的非露光部皮肤使用MCSP抗体进行表皮基底细胞可视化显示，随着老化MCSP阳性的表皮基底干细胞数减少(非专利文献1)。要求开发具有MCSP阳性表皮基底干细胞数的增加促进作用或减少抑制作用的药剂。现有技术文献非专利文献非专利文献1：GiangrecoA,etal.,JInvestDermatol.2010,130(2):604-8
技术实现思路
专利技术所要解决的课题本专利技术的目的在于提供MCSP阳性表皮基底干细胞数的增加促进或减少抑制方法。用于解决课题的手段本专利技术者们对于MCSP阳性表皮基底干细胞进行了深入研究，结果发现了MCSP阳性表皮基底干细胞与存在于基底膜附近的层粘连蛋白511的相关性。即，首次发现了，如果基底膜附近的层粘连蛋白511减少，则MCSP阳性表皮基底干细胞数也相应地减少，通过使层粘连蛋白511的表达量增加，能够增加MCSP阳性表皮基底干细胞数。另外发现，层粘连蛋白是层粘连蛋白α、β和γ的复合体，从而能够以层粘连蛋白α5、β1、和γ1的表达量作为指标来确定层粘连蛋白511的存在量。基于该见解，完成了涉及以层粘连蛋白511的表达作为指标的层粘连蛋白511表达促进剂的筛选方法的专利技术。由于层粘连蛋白511表达促进剂能够将基底膜稳定化，因而层粘连蛋白511表达促进剂的筛选方法也可以说是基底膜稳定剂的筛选方法。另外，如果层粘连蛋白511的存在量增加、基底膜稳定化，则产生表皮基底干细胞的增加作用或减少抑制作用，因此层粘连蛋白511表达促进剂的筛选方法也可以说是表皮基底干细胞的增加促进剂或减少抑制剂的筛选方法。更具体地涉及下述专利技术：[1]层粘连蛋白511表达促进剂的筛选方法，以表皮细胞中的层粘连蛋白511的表达量作为指标。[2]根据项目1所述的方法，包括：在包含候选药剂的培养基中培养表皮细胞的工序，测定表皮细胞中的层粘连蛋白511的表达量的工序，和在与对照中的层粘连蛋白511表达量相比，层粘连蛋白511的表达增加的情况下，判定候选药剂具有层粘连蛋白511表达促进效果的工序。[3]根据项目1或2所述的方法，所述层粘连蛋白511的表达量由层粘连蛋白511的蛋白质的量、或选自层粘连蛋白α5的mRNA量、层粘连蛋白β1的mRNA量和层粘连蛋白γ1的mRNA量中的1种以上mRNA量确定。[4]根据项目1～3的任一项所述的方法，层粘连蛋白511的表达量由层粘连蛋白α5的mRNA量、层粘连蛋白β1的mRNA量和层粘连蛋白γ1的mRNA量的合计量确定。[5]根据项目1～4的任一项所述的方法，所述层粘连蛋白511表达促进剂是表皮基底膜稳定剂。[6]根据项目1～5的任一项所述的方法，表皮基底膜稳定剂是表皮干细胞的减少抑制或增加促进剂。[7]根据项目1～6的任一项所述的方法，表皮细胞包含表皮干细胞。[8]根据项目1～7的任一项所述的方法，表皮干细胞包含表皮基底干细胞。[9]根据项目1～8的任一项所述的方法，表皮细胞包含MCSP表达细胞。[10]根据项目1～9的任一项所述的方法，表皮细胞还包含表达整联蛋白的细胞。[11]根据项目1～10的任一项所述的方法，表皮细胞来源于胎儿。[12]层粘连蛋白511的表达促进剂，以选自褐藻、红藻和绿藻中的至少1种的提取物或1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮作为有效成分。[13]利用层粘连蛋白511的表达促进的表皮基底膜稳定剂，以选自褐藻、红藻和绿藻中的至少1种的提取物或1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮作为有效成分。[14]利用层粘连蛋白511的表达促进的表皮干细胞的减少抑制或增加剂，以选自褐藻、红藻和绿藻中的至少1种的提取物或1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮作为有效成分。[15]细胞外基质分解酶的活性抑制剂，包含1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮。[16]根据项目15所述的细胞外基质分解酶的活性抑制剂，细胞外基质分解酶是基质金属蛋白酶或乙酰肝素酶。[17]根据项目15所述的细胞外基质分解酶的活性抑制剂，细胞外基质分解酶是基质金属蛋白酶9。[18]层粘连蛋白511分解抑制剂，包含项目15～17的任一项所述的细胞外基质分解酶的活性抑制剂。[19]表皮基底膜稳定剂，包含项目15～17的任一项所述的细胞外基质分解酶的活性抑制剂。[20]表皮基底干细胞减少抑制或增加促进剂，包含项目15～17的任一项所述的细胞外基质分解酶的活性抑制剂。[21]表皮中的层粘连蛋白511的表达的增进方法，包括施与选自褐藻、红藻和绿藻中的至少1种的提取物或1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮的步骤。[22]表皮基底膜的稳定化方法，施与选自褐藻、红藻和绿藻中的至少1种的提取物或1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮，通过层粘连蛋白511的表达促进作用，来使表皮基底膜稳定化。[23]表皮基底干细胞的减少抑制或增加促进方法，施与选自褐藻、红藻和绿藻中的至少1种的提取物或1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮，通过层粘连蛋白511的表达促进作用，来抑制表皮基底干细胞的减少或促进其增加。[24]美容方法，施与选自褐藻、红藻和绿藻中的至少1种的提取物或1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮，使表皮中的层粘连蛋白511的表达增进。[25]美容方法，施与选自褐藻、红藻和绿藻中的至少1种的提取物或1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮，使表皮中的层粘连蛋白511的表达增进，通过层粘连蛋白511的表达促进作用而使表皮基底膜稳定化。[26]美容方法，施与选自褐藻、红藻和绿藻中的至少1种的提取物或1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮，使表皮中的层粘连蛋白511的表达增进，通过层粘连蛋白511的表达促进作用而抑制表皮基底干细胞的减少或促进其增加。[27]选自褐藻、红藻和绿藻中的至少1种的提取物或1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮的应用，用于制造用于层粘连蛋白511的表达促进的化妆品或药品。[28]选自褐藻、红藻和绿藻中的至少1种的提取物或1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮的应用，用于制造用于使表皮基底膜稳定化的化妆品或药品。[29]选自褐藻、红藻和绿藻中的至少1种的提取物或1-(2-羟基乙基)-2-咪唑烷酮的应用，用于制造用于表皮基底干细胞的减少抑制或增加促进的化妆品或药品。[30]介由层粘连蛋白511本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.层粘连蛋白511表达促进剂的筛选方法，以表皮细胞中的层粘连蛋白511的表达量作为指标。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.10.21 JP 2016-2070271.层粘连蛋白511表达促进剂的筛选方法，以表皮细胞中的层粘连蛋白511的表达量作为指标。2.根据权利要求1所述的方法，包括：在包含候选药剂的培养基中培养表皮细胞的工序，测定表皮细胞中的层粘连蛋白511的表达量的工序，和在与对照中的层粘连蛋白511表达量相比，层粘连蛋白511的表达量增加的情况下，判定候选药剂具有层粘连蛋白511表达促进效果的工序。3.根据权利要求1或2所述的方法，所述层粘连蛋白511的表达量由层粘连蛋白511的蛋白质的量、或选自层粘连蛋白α5的mRNA量、层粘连蛋白β1的mRNA量和层粘连蛋白γ1的mRNA量中的1种以上mRNA量确定。4.根据权利要求1～3的任一项所述的方法，层粘连蛋白511的表达量由层粘连蛋白α5的mRNA量、层粘连蛋白β1的mRNA量和层粘连蛋白γ1的mRNA量的合计量确定。5.根据权利要求1～4的任一项所述的方法，所述层粘连蛋白511表达促进剂是表皮基底膜稳定剂。6.根据权利要求1～5的任一项所述的方法，表皮基底膜稳定剂是表皮干细胞的减少抑制或增加促进剂。7.根据权利要求1～6的任一项所述的方法，表皮细胞包含表皮干细胞。8.根据权利要求1～7的任一项所述的方法，表皮干细胞包含表皮基底干细胞。9.根据权利要求1～8的任一项所述的方法，表皮细胞包含MCSP表达细胞。10.根据权利要求1～9的任一项所述的方法，表皮细胞还包含...

【专利技术属性】
技术研发人员：入山俊介，丹野纱织，
申请(专利权)人：株式会社资生堂，
类型：发明
国别省市：日本,JP