一种靶细胞的识别与杀伤方法技术

本发明专利技术公开了一种靶细胞的识别与杀伤方法，包括：培育具有高表达NKg2d的NK细胞；培育具有高活性的CTL细胞；将具有高表达NKg2d的NK细胞和具有高活性的CTL细胞注入异常靶细胞样本，在其微环境下，NK细胞分泌的部分NKg2d嵌合在同种CTL细胞表面，恢复CTL细胞的识别与杀伤能力，实现CTL细胞对MHC‑1类分子阳性的靶细胞识别、杀伤和清除，同时应用NK细胞的非MHC‑1限制性特点，对非MHC‑1类分子阴性的靶细胞进行识别、杀伤以及清除。

A Target Cell Recognition and Killing Method

The invention discloses a method for identifying and killing target cells, which includes: cultivating NK cells with high expression of NKg2d; cultivating CTL cells with high activity; injecting NK cells with high expression of NKg2d and CTL cells with high activity into abnormal target cell samples; under its microenvironment, part of NKg2d secreted by NK cells is chimerized on the surface of the same CTL cells to restore the recognition and killing of CTL cells. The killing ability of CTL cells is to recognize, kill and remove MHC class 1 molecule-positive target cells. At the same time, the non-MHC class 1 molecule-negative target cells of NK cells are identified, killed and cleared by using the non-MHC class 1 restrictive characteristics of NK cells.

【技术实现步骤摘要】
一种靶细胞的识别与杀伤方法
本专利技术涉及细胞领域，尤其涉及一种靶细胞的识别与杀伤方法。
技术介绍
存在异常靶细胞的样本中，CTL细胞表面的识别受体NKg2d容易脱落导致其对异常靶细胞的识别性能下降，难以杀伤低表达MHC-1类分子的异常靶细胞。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种靶细胞的识别与杀伤方法，以识别与杀伤异常靶细胞。本专利技术的目的采用如下技术方案实现：一种靶细胞的识别与杀伤方法，包括：培育具有高表达NKg2d的NK细胞；培育具有高活性的CTL细胞；将具有高表达NKg2d的NK细胞和具有高活性的CTL细胞注入异常靶细胞样本，以使部分NKg2d粘连于所述CTL细胞。进一步地，培育具有高表达NKg2d的NK细胞之前还包括：从样本中提取出NK细胞样本和CTL细胞样本。进一步地，从样本中提取出NK细胞样本和CTL细胞样本之后还包括：将所述NK细胞样本和所述CTL细胞样本进行分离、培育和扩增。相比现有技术，本专利技术的有益效果在于：将具有高表达NKg2d的NK细胞和具有高活性的CTL细胞注入异常靶细胞样本，以使部分NKg2d粘连于CTL细胞，从而使CTL细胞释放颗粒酶，溶酶体，穿孔素，Fas，IFN等，实现CTL细胞对MHC-1类分子阳性的靶细胞识别、杀伤和清除，同时应用NK细胞的非MHC-1限制性特点，对非MHC-1类分子阴性的靶细胞进行识别、杀伤以及清除。附图说明图1为本专利技术实施例提供的靶细胞的识别与杀伤方法。具体实施方式下面，结合附图以及具体实施方式，对本专利技术做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。如图1所示，本专利技术实施例提供的靶细胞的识别与杀伤方法，包括：步骤S101：培育具有高表达NKg2d的NK细胞。较佳的，培育NK细胞之前，从样本中提取出NK细胞样本和CTL细胞样本，其中，样本与靶细胞来自同一主体，样本中的NK细胞正常表达NKg2d，CTL细胞表面有NKg2d。提取出NK细胞样本和CTL细胞样本后，将NK细胞样本和所述CTL细胞样本进行分离、培育和扩增，通过现有培育方法培育出高表达NKg2d的NK细胞。步骤S102：培育具有高活性的CTL细胞。具体的，培育高活性的CTL细胞以使CTL细胞与NKg2d有效结合。步骤S103：将具有高表达NKg2d的NK细胞和具有高活性的CTL细胞注入异常靶细胞样本，以使部分NKg2d粘连于所述CTL细胞。具体的，异常靶细胞易寄生或聚集在实体组织或器官，异常靶细胞样本中的CTL细胞性能下降，表面的NKg2d脱落，不能杀伤变异细胞。将具有高表达NKg2d的NK细胞和具有高活性的CTL细胞先后注入异常靶细胞样本，在异常靶细胞样本环境内，NK细胞分泌的部分NKg2d自适应搭载或自动嵌合于同种CTL细胞表面，以提高CTL细胞对异常靶细胞的识别能力，同时释放颗粒酶，溶酶体，穿孔素，Fas，IFN等，利用CTL细胞的靶向性对MHC-1类分子阳性的靶细胞识别、杀伤及清除；同时利用NK细胞的非MHC-1限制性特点，对非MHC-1类分子阴性的靶细胞进行识别、杀伤以及清除，从而对不同类型与性质的靶细胞识别、杀伤和清除。本专利技术提供的靶细胞的识别与杀伤方法，将具有高表达NKg2d的NK细胞和具有高活性的CTL细胞注入异常靶细胞样本，以使部分NKg2d粘连于CTL细胞，恢复CTL细胞的识别与杀伤能力，从而使CTL细胞释放颗粒酶，溶酶体，穿孔素，Fas，IFN等，实现CTL细胞对MHC-1类分子阳性的靶细胞识别、杀伤和清除，同时应用NK细胞的非MHC-1限制性特点，对非MHC-1类分子阴性的靶细胞进行识别、杀伤以及清除。上述实施方式仅为本专利技术的优选实施方式，不能以此来限定本专利技术保护的范围，本领域的技术人员在本专利技术的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本专利技术所要求保护的范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种靶细胞的识别与杀伤方法，其特征在于，包括：培育具有高表达NKg2d的NK细胞；培育具有高活性的CTL细胞；将具有高表达NKg2d的NK细胞和具有高活性的CTL细胞注入异常靶细胞样本，以使部分NKg2d粘连于所述CTL细胞表面。

【技术特征摘要】
1.一种靶细胞的识别与杀伤方法，其特征在于，包括：培育具有高表达NKg2d的NK细胞；培育具有高活性的CTL细胞；将具有高表达NKg2d的NK细胞和具有高活性的CTL细胞注入异常靶细胞样本，以使部分NKg2d粘连于所述CTL细胞表面。2.根据权利要求1所述的靶细胞的识别与杀伤方...

【专利技术属性】
技术研发人员：周双念，
申请(专利权)人：深圳市双科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44