使用ATG‑F培养并获得肿瘤杀伤细胞的方法技术
The use of ATG F and culture method to obtain tumor killer cells
The invention relates to a method for using ATG F and tumor killer cell culture method, the method by anti human T cells of rabbit immunoglobulin (ATG F) via CD2 pathway activation and co gamma interferon (INF gamma) and interleukin 2 (IL 2) cultured killer cells, the method compared with CD3 monoclonal antibody activated cell killing NK cell culture, effective proliferation, anti tumor activity is better, and the safety is good, can be widely used in clinical.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，特别涉及一种使用抗人T细胞兔免疫球蛋白(ATG-F)通过CD2途径激活并在γ-干扰素(INF-γ)及白介素-2(IL-2)协同下培养杀伤细胞的方法。
技术介绍
生物治疗是手术治疗、放射治疗及化学治疗外新的抗瘤疗法，通过提高人体自身对肿瘤的免疫功能，增加免疫细胞数量从而发挥对肿瘤的治疗作用。生物治疗分为细胞因子治疗、单克隆抗体治疗、过继性细胞免疫治疗、基因治疗等相关技术。过继性细胞治疗通过向患者输注大量的免疫活性的细胞，利用免疫细胞直接杀伤肿瘤细胞或分泌抗肿瘤的细胞因子。过继性细胞治疗(adoptive cell transfer，ACT)使用的细胞依据来源及培养方式不同主要分为：淋巴因子活化的杀伤细胞(lymphokine-activated killer，LAK)；肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte，TIL)；细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer，CIK)、以及最新的嵌合型抗原受体(chimeric antigen receptor，CAR)基因工程细胞。CIK细胞治疗作为生物治疗的一种广泛应用于恶性肿瘤的治疗，尤其在血液学恶性肿瘤治疗中，其副作用小，对复发难治血液疾病有效，在延长患者生存期，清除微小残留灶上有确切的疗效。细胞因子 诱导的杀伤细胞是将外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)分离并在体外培养，培养过程中通过的细胞因子刺激促进细胞增殖获得的主要由淋巴细胞组成的异质性细胞群。目前经典的...
【技术保护点】
一种使用ATG‑F培养并获得肿瘤杀伤细胞的方法，其特征在于，有以下步骤：1）单个核细胞的收集纯化取外周血白细胞，淋巴细胞分离液中离心分离，取单个核细胞层细胞，加入悬浮细胞培养液吹打分散，得到外周血单个核细胞； 2）细胞的培养取步骤1）得到的外周血单个核细胞用培养液稀释，添加IFN‑γ，在37℃、CO2 5%、饱和湿度中恒温培养；24小时后在细胞的培养液中加入IL‑2至终浓度 300IU‑1000IU/ml；添加抗人T细胞兔免疫球蛋白（ATG‑F）通过CD2途径激活免疫细胞，观察、确保细胞处于正常生长状态，每2‑3天补充一次含IL‑2的培养基，培养并监测细胞状态；3）总共持续培养10‑28天，得到ATG‑F激活的杀伤细胞。
【技术特征摘要】
1.一种使用ATG-F培养并获得肿瘤杀伤细胞的方法，其特征在于，有以下步骤：1）单个核细胞的收集纯化取外周血白细胞，淋巴细胞分离液中离心分离，取单个核细胞层细胞，加入悬浮细胞培养液吹打分散，得到外周血单个核细胞； 2）细胞的培养取步骤1）得到的外周血单个核细胞用培养液稀释，添加IFN-γ，在37℃、CO2 5%、饱和湿度中恒温培养；24小时后在细胞的培养液中加入IL-2至终浓度 300IU-1000IU/ml；添加抗人T细胞兔免疫球蛋白（ATG-F）通过CD2途径激活免疫细胞，观察、确保细胞处于正常生长状态，每2-3天补充一次含IL-2的培养基，培养并监测细胞状态；3）总共持续培养10-28天，得到ATG-F激活的杀伤细胞。2.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：娄世锋，张宇尘，
申请(专利权)人：重庆医科大学附属第二医院，
类型：发明
国别省市：重庆;50
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