一种含有人脐带间充质干细胞的培养上清的化妆品制造技术

本发明专利技术公开了一种含有人脐带间充质干细胞的培养上清的化妆品。该化妆品具体为含50‑150g/L甘油、30‑150g/L 1，3‑丙二醇、3‑15mg/L透明质酸钠、0.5‑2.0mg/L血管内皮生长因子、1‑3mg/L干细胞生长因子和1‑3g/L吡咯烷酮羧酸钠的人脐带间充质干细胞的培养上清。实验证明，在短期保湿试验和长期保湿试验中，该化妆品均具有较好的吸水、锁水功效，具有更好的保湿性；同时，以人脐带间充质干细胞的培养上清作为化妆品的基础配方，且不添加任何化工添加物(如着色剂、矿物油、铅、汞、乙醇等致敏成分)，可最大程度的保护了不同人群持续使用的安全性。本发明专利技术具有重要的应用价值。

A cosmetic containing culture supernatant of human umbilical cord mesenchymal stem cells

The invention discloses a cosmetic containing culture supernatant of human umbilical cord mesenchymal stem cells. The cosmetics were specifically supernatants of human umbilical cord mesenchymal stem cells containing 50 150 g/L glycerol, 30 150 g/L 1, 3 propylene glycol, 3 15 mg/L sodium hyaluronate, 0.5 2.0 mg/L vascular endothelial growth factor, 1 3 mg/L stem cell growth factor and 1 3 g/L sodium pyrrolidone carboxylate. Experiments show that the cosmetics have better water absorption and water-locking effects in short-term and long-term moisturizing tests, and have better moisturizing properties. At the same time, the supernatant of human umbilical cord mesenchymal stem cells is used as the basic formula of cosmetics without any chemical additives (such as colorants, mineral oils, lead, mercury, ethanol and other sensitizing ingredients). It protects the safety of continuous use by different groups of people. The invention has important application value.

【技术实现步骤摘要】
一种含有人脐带间充质干细胞的培养上清的化妆品
本专利技术属于日用化妆品
，具体涉及一种含有人脐带间充质干细胞的培养上清的化妆品。
技术介绍
皮肤是人体的天然外衣，一般由外至内分为表皮、真皮和皮下组织三大部分，而表皮又分为角质层、透明层、颗粒层、棘层和基底层。皮肤最外层的角质层，对于皮肤屏障功能的完整起着很重要的作用。角质层上有一层皮脂膜，是由皮脂、汗液和表皮细胞分泌物乳化而形成的半透明乳状薄膜，皮脂膜中的游离脂肪酸、乳酸盐、尿素和尿酸为天然的保湿因子，对皮肤起保湿作用。皮肤保湿功能降低会导致皮肤屏障功能下降，进而导致皮肤保湿功能进一步降低，从而形成恶性循环。因此对于正常皮肤屏障功能而言，保湿既能维持皮肤正常生理功能，延缓皮肤衰老，又是预防和治疗皮肤病的重要环节。随着人们对化妆品种类和功能的需求不断提高，化妆品的研发技术也在不断改进和提高，保湿功效作为皮肤护理类化妆品的最基本的功能之一，也越来越受到重视。皮肤的柔润及弹性与角质层中的水含量有着密切的关系，角质层的正常含水量维持在10％-20％之间，才能维持角质层正常的功能和肌肤的健康状态。因此，皮肤保湿是化妆品护肤抗衰老永恒的主题，而对护肤类产品的保湿功效评价也就成为产品开发和改良的重要指标。然而，目前市售各类保湿化妆产品鱼龙混杂，良莠不齐，许多美容化妆品由化学物质制成，其不良反应已逐渐引起人们的不安和重视。此外，现有市场出售的通过植物成分提取的天然保湿剂，由于产品中可能存在的天然生物大分子物质不易被皮肤吸收，会造成皮肤的额外负担。除此之外，由于产能或技术瓶颈等原因，目前阶段的保湿化妆产品基本都不具有生物活性，无法从根本上调节表皮细胞的新陈代谢和生存环境，无法有效改善干燥、老化皮肤的外观和触感，尤其皮肤敏感或孕妇等人群需谨慎使用。间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSCs)是中胚层来源的一类具有自我复制及多向分化潜能的干细胞，广泛存在于全身多种组织中，在组织修复、造血重建及免疫治疗等方面具有广阔的临床应用前景。随着对间充质干细胞生物学特性及功能的深入研究，已经可以从多种组织中分离出间充质干细胞。其中人脐带间充质干细胞具有无法比拟的优势，其来源丰富、易于获得、增殖能力强且排除了伦理道德方面的限制，已成为目前临床应用最广泛的细胞来源之一。
技术实现思路
本专利技术的目的为提供一种具有保湿和/或提高皮肤含水量的功能化妆品。本专利技术首先保护一种化妆品，该化妆品可包括间充质干细胞的培养上清；所述化妆品可具有保湿和/或提高皮肤含水量的功能。上述化妆品中，所述“间充质干细胞的培养上清”的制备方法可为：培养间充质干细胞，收集液相，得到间充质干细胞的培养上清。上述任一所述间充质干细胞可为人脐带间充质干细胞。上述制备方法中，所述培养使用的培养基可为人脐带间充质干细胞完全培养基。所述人脐带间充质干细胞完全培养基已在中国专利技术专利文献CN106906181A中公开。所述人脐带间充质干细胞完全培养基可包括人胰岛素、人血清白蛋白、转铁蛋白、表皮细胞生长因子、血小板衍生生长因子、IL-3和IL-6。所述人脐带间充质干细胞完全培养基可为含2-10μg/mL(如2-5μg/mL、5-10μg/mL、2μg/mL、5μg/mL或10μg/mL)的人胰岛素、0.1-1mg/mL(如0.1-0.5mg/mL、0.5-1mg/mL、0.1mg/mL、0.5mg/mL或1mg/mL)的人血清白蛋白、2-10μg/mL(如2-5μg/mL、5-10μg/mL、2μg/mL、5μg/mL或10μg/mL)的转铁蛋白、1-5ng/mL(如1-3ng/mL、3-5ng/mL、1ng/mL、3ng/mL或5ng/mL)的表皮细胞生长因子、1-5ng/mL(如1-3ng/mL、3-5ng/mL、1ng/mL、3ng/mL或5ng/mL)的血小板衍生生长因子、2-50ng/mL(如2-20ng/mL、20-50ng/mL、2ng/mL、20ng/mL、2-50ng/mL)的IL-3和2-50ng/mL(如2-30ng/mL、30-50ng/mL、2ng/mL、30ng/mL、50ng/mL)的IL-6的无血清基本培养基。所述无血清基本培养基可选自如下中任一：α-MEM培养基、DMEM培养基、DMEM/F12培养基、M199培养基、IMDM培养基、IMDM/F12培养基。其中，以α-MEM培养基为最优选。上述制备方法中，所述培养的条件可为35-39℃(如35-37℃、37-39℃、35℃、37℃或39℃)、3-7％C02(如3-5％C02、5-7％C02、3％C02、5％C02或7％C02)。上述制备方法中，所述培养间充质干细胞时，间充质干细胞的传代代数可为3-6代(如3代、4代、5代或6代)。上述任一所述人脐带间充质干细胞可以通过商购途径获得，也可以自行制备。上述任一所述人脐带间充质干细胞的制备方法可如下：(1)取足月妊娠分娩胎儿的脐带组织(长度为8～10cm)，去除脐带组织中的血管(可通过用PBS缓冲液充分清洗实现)，得到华通氏胶；(2)完成步骤(1)后，将所述华通氏胶剪成小块(体积可为1mm3)，然后置于上述任一所述人脐带间充质干细胞完全培养基，培养，得到贴壁细胞；(3)完成步骤(2)后，将所述贴壁细胞置于上述任一所述人脐带间充质干细胞完全培养基，培养至贴壁细胞的密度达到70％以上时(培养期间每隔3-4天使用人脐带间充质干细胞完全培养基进行换液)，传代3次，获得人脐带间充质干细胞。所述步骤(2)中，所述培养可为35-39℃(如35-37℃、37-39℃、35℃、37℃或39℃)、3-7％C02(如3-5％C02、5-7％C02、3％C02、5％C02或7％C02)培养箱中培养2-4天(如2天、3天或4天)。所述步骤(3)中，所述培养可为35-39℃(如35-37℃、37-39℃、35℃、37℃或39℃)、3-7％C02(如3-5％C02、5-7％C02、3％C02、5％C02或7％C02)培养。所述步骤(3)中，每次传代的操作步骤依次可如下：①弃上清液，加入PBS缓冲液清洗；②加入适量胰蛋白酶(浓度可为0.25％)，消化；③加入人脐带间充质干细胞完全培养基(目的为终止消化)，混匀，然后离心，收集沉淀；④取沉淀，加入适量人脐带间充质干细胞完全培养基重悬，得到重悬液；⑤培养重悬液，当贴壁细胞的密度达到70％以上时进行传代。所述步骤⑤中，所述培养可为35-39℃(如35-37℃、37-39℃、35℃、37℃或39℃)、3-7％C02(如3-5％C02、5-7％C02、3％C02、5％C02或7％C02)培养。上述任一所述“培养人脐带间充质干细胞，收集液相，得到人脐带间充质干细胞的培养上清”具体可如下：(1)将人脐带间充质干细胞(约1×107个)接种至上述任一人脐带间充质干细胞完全培养基(约10mL)，培养，得到培养体系4。(2)收集培养体系4的液相(命名为液相1)。(3)向完成步骤(2)的体系中加入PBS缓冲液，充分清洗；然后加入适量胰蛋白酶消化细胞至单细胞状态；再加入人脐带间充质干细胞完全培养基(目的为终止消化)，混匀，离心，收集沉淀；最后向沉淀中加入人脐带间充质干细胞完全培养基(约1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种化妆品，包括间充质干细胞的培养上清；所述化妆品具有保湿和/或提高皮肤含水量的功能。

【技术特征摘要】
1.一种化妆品，包括间充质干细胞的培养上清；所述化妆品具有保湿和/或提高皮肤含水量的功能。2.如权利要求1所述的化妆品，其特征在于：所述“间充质干细胞的培养上清”的制备方法为：培养间充质干细胞，收集液相，得到间充质干细胞的培养上清。3.如权利要求1或2所述的化妆品，其特征在于：所述间充质干细胞为人脐带间充质干细胞。4.如权利要求2或3所述的化妆品，其特征在于：所述培养使用的培养基为人脐带间充质干细胞完全培养基；所述人脐带间充质干细胞完全培养基包括人胰岛素、人血清白蛋白、转铁蛋白、表皮细胞生长因子、血小板衍生生长因子、IL-3和IL-6。5.如权利要求3或4所述的化妆品，其特征在于：所述人脐带间充质干细胞的制备方法如下：(1)取足月妊娠分娩胎儿的脐带组织，去除脐带组织中的血管，得到华通氏胶；(2)完成步骤(1)后，将所述华通氏胶剪成小块，然后置于权利要求4所述人脐带间充质干细胞完全培养基，培养，得到贴壁细胞；(3)完成步骤(2)后，将所述贴壁细胞置于权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢戌，刘静维，王跃，刘雪松，吴璇，
申请(专利权)人：北京康爱瑞浩生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11