一种荷叶黄酮苷的提取方法以及包括荷叶黄酮苷的药物制剂技术

本发明专利技术提供了一种荷叶黄酮苷的提取、纯化方法以及包括荷叶黄酮苷的制剂，属于中药提取技术领域，所述方法包括以下步骤：将荷叶粉加60～80℃的水，搅拌提取，分离提取液和滤渣，提取3次，甩滤液放冷至室温，调节pH为2‑3，放置2h，经错流过滤，得精滤液；调节精滤液的pH为5～6.5，用大孔树脂吸附、洗涤、洗脱，收集荷叶黄酮苷纯度≥99％的洗脱液，完成荷叶黄酮苷的提取、纯化；本发明专利技术中提纯获得的荷叶黄酮苷为槲皮素‑3‑O‑β‑D葡萄糖醛酸苷，其中槲皮素‑3‑O‑β‑D葡萄糖醛酸苷的纯度大于99.22％，收率高，成本低。本发明专利技术所述提取方法简便快捷，提取工艺能够实现自动化、智能化、绿色化和数字化量化。

A method for extracting lotus leaf flavonoid glycosides and a pharmaceutical preparation including lotus leaf flavonoid glycosides

The invention provides a method for extracting and purifying lotus leaf flavonoid glycosides and a preparation including lotus leaf flavonoid glycosides, which belongs to the field of traditional Chinese medicine extraction technology. The method comprises the following steps: adding lotus leaf powder to water at 60-80 degrees C, stirring and extracting, separating the extract and filter residue, extracting three times, discharging the filtrate to room temperature, adjusting the pH to 2 3, placing for 2 hours, and obtaining the semen filtrate through cross-flow filtration; The purity of lotus leaf flavonoid glycoside is more than 99% and the purity of lotus leaf flavonoid glycoside is higher than 99.22%. The purity of quercetin 3 O beta D glucuronide is higher than 99.22%. The purity of quercetin 3 O D glucuronide is higher than 99.22%. Low cost. The extraction method of the invention is simple and fast, and the extraction process can realize automation, intelligence, greening and digital quantization.

【技术实现步骤摘要】
一种荷叶黄酮苷的提取方法以及包括荷叶黄酮苷的药物制剂
本专利技术属于中药提取与应用
，尤其涉及一种荷叶黄酮苷的提取方法以及包括荷叶黄酮苷的药物制剂。
技术介绍
睡莲科植物莲(NelumbonuciferaeiGaertn)在中国多地都有种植，以江苏、浙江、安徽等省种植广泛，既可观赏，又可食用，也可药用的植物，在医药、食品、保健品等行业都有应用。荷叶中含黄酮、生物碱、多酚、挥发油、甾类、萜类、脂肪酸、脂肪醇、蛋白质、单宁等百余种化学成分，黄酮类和生物碱类化合物是其主要的药理活性成份。黄酮类有单葡萄糖醛酸苷(槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷，Q3GA)、双葡萄糖醛酸苷(槲皮素-3-O-β-D-双葡萄糖醛酸苷)，金丝桃苷(槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷)、异槲皮苷(异槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷)和紫云英苷(莰非醇-3-O-葡萄糖苷、山柰酚-3-葡萄糖苷)等约30种，余为多酚、挥发油等。目前，荷叶供大于求，使用量较少，且荷叶在医药、食品、保健品等行业的应用还处在比较初始阶段，开发的广度与深度远不能适应时代的需求。如何开发荷叶新用途，特别是用于多发病和某些重大疾病的防治，是药学工作者的使命。荷叶为睡莲科植物莲的干燥叶，性平味苦，无毒(小鼠的LD50＞5g/kg)，具有清解暑邪、轻宣透邪、升清降浊、醒脾开胃、止血散瘀的功效。荷叶黄酮苷用于降脂减肥、抗氧化、清除自由基、抗衰老、保肝和抑制肝纤维化、抗肝毒、抗菌消炎等，入心、肝、胆、脾、胃经。历代医书中多有记载，明代戴元礼的《秘传证治要决》中对于荷叶减肥功效记载：“荷叶服之，令人瘦劣”。《本草拾遗》中亦云：“久食令人瘦”。随着人民生活水平的提高，日摄入脂肪、糖的量日益增加，冠心病、AD症、高血脂、肥胖症患者也日渐增加，对药学研究工作者也提出了更高要求，降脂、减肥药物研发日益迫切。给高脂血症模型大鼠、小鼠灌胃单味荷叶水提取物的降脂减肥研究，观察对血清胆固醇及甘油三脂的影响，结果显示：荷叶水能使高脂血症大鼠的TC下降25.6％～39.3％，TG下降18.9％～39.2％，对HDL-C未见明显影响，但随TC、TG的降低，低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)显著下降，同时荷叶水煎剂能降低全血比黏度、红细胞压积(％)，从而改善血液浓粘状态。荷叶黄酮对高胆固醇表现出明显的抑制作用；体外培养肝细胞合成TC实验显示：荷叶黄酮在使肝细胞内TC降低的同时又使培养液TC明显升高。其作用主要表现在促进脂类代谢方面，对其合成的抑制作用较弱。主要活性部位集中在黄酮上，动物活动正常，无明显腹泻和抑制食欲的现象发生。近年来，许多药学工作者对荷叶中有效组分的提取、纯化及其质量、剂型、新适应症和作用机制等研究日益关注。但现有的荷叶黄酮苷提取方法，或提纯工艺较繁琐冗长，费时费事，生产成本高，或产品纯度不高，或收率较低，均不尽人意，尚无规模化生产。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种提取方法简单、成本低，提取收率高、获得产品纯度高的荷叶黄酮苷的提取方法及包括荷叶黄酮苷的药物组合物。基于上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：一种荷叶黄酮苷的提取方法，包括以下步骤：1)将荷叶粉加60～80℃的水，进行第一次搅拌提取，第一次甩滤，获得滤液1和滤渣1；2)将所述滤渣1加60～80℃水，进行第二次搅拌提取，第二次甩滤，获得滤液2和滤渣2；3)将所述滤渣2加60～80℃水，进行第三次搅拌提取，第三次甩滤，获得滤液3和滤渣3；4)合并所述滤液1、滤液2和滤液3，放冷至25～30℃，调节pH为2-3，放置2h，经错流过滤，得精滤液；5)调节所述精滤液的pH值为5～6.5后，用大孔树脂吸附、洗涤、洗脱，收集荷叶黄酮苷纯度≥99％的洗脱液，完成荷叶黄酮苷的提取与纯化；所述荷叶黄酮苷即是槲皮素-3-O-β-D葡萄糖醛酸苷。优选的，步骤1)中所述荷叶粉与水的质量比为1：(7～10)。优选的，步骤2)中所述滤渣1和步骤3)中所述滤渣2与水的质量比独立为1：(5～8)。优选的，步骤1)中所述第一搅拌提取的时间为12～18min。优选的，步骤2)中所述第二搅拌提取或步骤3)中所述第三搅拌提取的时间独立为5～10min。优选的，所述5)收集洗脱液后还包括调节所述洗脱液的pH值为1.5～3.5，用纯化水和30％乙醇洗涤，再以体积浓度50～95％的乙醇溶液洗脱实现浓缩。本专利技术还提供了上述方法提取获得的荷叶黄酮苷，所述荷叶黄酮苷即为槲皮素-3-O-β-D葡萄糖醛酸苷的纯度≥99％。本专利技术还提供了包括上述荷叶黄酮苷的药物制剂。本专利技术提供的荷叶黄酮苷的提取方法，荷叶粉通过三次搅拌提取甩滤，得粗滤液放冷至室温，调pH2-3，放置2h，经错流过滤得精滤液，调节精滤液的pH为5-6.5，过大孔树脂吸附、洗涤、洗脱，得荷叶黄酮苷即槲皮素-3-O-β-D葡萄糖醛酸苷，其纯度高≥99％；本专利技术所述提取方法简便快捷，提取工艺能够实现自动化、智能化、绿色化和数字化量化，相对于其他提取需多次过树脂柱或不同填料柱分离纯化的方法，能显著节能减排，省时省事，省厂房省设备，提高收率，降低成本，产物的质量稳定可控，便于工业化生产。进一步的，采用甩滤和错流过滤联用的方法进行过滤，提高过滤速度的同时，而且实现精密过滤。进一步的，本专利技术所述提取方法通过各个步骤参数设定，实现全过程质量在线控制体系，解决了生产的产品批内均一性和批间重复性差异大的问题，从根本上保证了产品质量稳定可控。附图说明图1为未分离纯化的荷叶粉的HPLC指纹图谱图；图2为荷叶黄酮苷(Q3GA)对照品的HPLC图；图3为实施例1中荷叶黄酮苷(Q3GA)的HPLC图；图4为荷叶黄酮苷(Q3GA)溶剂的HPLC图；图5为实施例4中荷叶黄酮苷(Q3GA)的HPLC图。具体实施方式本专利技术提供了一种荷叶黄酮苷的提取、纯化方法，包括以下步骤：1)将荷叶粉加60～80℃的水搅拌提取，第一次甩滤，得粗滤液1和滤渣1；2)将所述滤渣1加60～80℃水搅拌提取，第二次甩滤，得粗滤液2和滤渣2；3)将所述滤渣2再加60～80℃水搅拌提取，第三次甩滤，得粗滤液3和滤渣；所述滤渣可制沼气和绿肥；4)合并粗滤液1、2、3，放冷至室温，调节pH为2-3放置2-3h，经错流过滤，得精滤液，完成提取；5)调节所述精滤液的pH值为5～6.5后，用大孔树脂吸附、洗涤和洗脱，收集荷叶黄酮苷纯度≥99％的洗脱液，完成荷叶黄酮苷的纯化；所述荷叶黄酮苷即是槲皮素-3-O-β-D葡萄糖醛酸苷。在本专利技术中，将荷叶粉与水混合进行首次搅拌提取。在本专利技术中，所述荷叶粉与水的质量比优选为1：(7～10)，更优选为1：(8～9)；所述首次搅拌提取的时间优选为12～18min，更优选为13～17min，最优选为15min。本专利技术中所述水的温度优选为60～80℃，具体可选为65～79℃、68～75℃、70～73℃、69℃、71℃或78℃；本专利技术中所述首次搅拌提取的料液温度优选为55～60℃。本专利技术对所述荷叶粉的来源和粒度没有特殊限定，通常采用荷叶中粉即可，本专利技术对所述水没有特殊限定，采用本领域常规提取用纯化水即可。本专利技术在获得滤渣1后，加60～80℃水，进行第二次搅拌提取。在本专利技术中，所述滤渣1与水的质量比优选为1：(5～8)，更优选为1：本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种荷叶黄酮苷的提取方法，包括以下步骤：1)将荷叶粉与60～80℃的水混合，进行第一次搅拌提取，第一次甩滤，获得滤液1和滤渣1；2)将所述滤渣1与60～80℃水混合，进行第二次搅拌提取，第二次甩滤，获得滤液2和滤渣2；3)将所述滤渣2与60～80℃水混合，进行第三次搅拌提取，第三次甩滤，获得滤液3和滤渣3；4)合并所述滤液1、滤液2和滤液3，冷至25～30℃后，调pH为2～3，放置2h，错流过滤，得到精滤液；5)调节所述精滤液的pH值为5～6.5后，用大孔树脂吸附、洗涤、洗脱，收集荷叶黄酮苷纯度≥99％的洗脱液完成荷叶黄酮苷的提取与纯化；所述荷叶黄酮苷为槲皮素‑3‑O‑β‑D葡萄糖醛酸苷。

【技术特征摘要】
1.一种荷叶黄酮苷的提取方法，包括以下步骤：1)将荷叶粉与60～80℃的水混合，进行第一次搅拌提取，第一次甩滤，获得滤液1和滤渣1；2)将所述滤渣1与60～80℃水混合，进行第二次搅拌提取，第二次甩滤，获得滤液2和滤渣2；3)将所述滤渣2与60～80℃水混合，进行第三次搅拌提取，第三次甩滤，获得滤液3和滤渣3；4)合并所述滤液1、滤液2和滤液3，冷至25～30℃后，调pH为2～3，放置2h，错流过滤，得到精滤液；5)调节所述精滤液的pH值为5～6.5后，用大孔树脂吸附、洗涤、洗脱，收集荷叶黄酮苷纯度≥99％的洗脱液完成荷叶黄酮苷的提取与纯化；所述荷叶黄酮苷为槲皮素-3-O-β-D葡萄糖醛酸苷。2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤1)中所述荷叶粉与水的质量比为1：(7～10)。3.根据权利要求1或2所述的提取方法，其特征在于，步骤2)...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴祖栋，杨丽，齐炼文，邢宸，邢为藩，
申请(专利权)人：南京宸翔医药研究有限责任公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32