促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的多肽及其用途制造技术

本发明专利技术涉及多肽及其用途，具体涉及促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的多肽及其用途。本发明专利技术促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的多肽的氨基酸序列选自SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6中的至少一种。本发明专利技术的多肽具有与HIP/PAP相当或更优的促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的活性，并且本发明专利技术多肽具有分子量小、易于合成、免疫原性低等优点，因此本发明专利技术的多肽具有广阔的应用前景。

Polypeptides Promoting Hepatocyte Proliferation and/or Inhibiting Hepatocyte Apoptosis and Their Use

The present invention relates to polypeptides and their uses, in particular to polypeptides that promote hepatocyte proliferation and/or inhibit hepatocyte apoptosis and their uses. The amino acid sequence of the polypeptide promoting hepatocyte proliferation and/or inhibiting hepatocyte apoptosis is selected from at least one of SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6. The polypeptide of the invention has the same or better activity as HIP/PAP in promoting hepatocyte proliferation and/or inhibiting hepatocyte apoptosis, and the polypeptide of the invention has the advantages of small molecular weight, easy synthesis and low immunogenicity, so the polypeptide of the invention has broad application prospects.

【技术实现步骤摘要】
促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的多肽及其用途
本专利技术涉及多肽及其用途，具体涉及促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的多肽及其用途。
技术介绍
肝脏是人体内最大的内脏器官(约占人体总质量的2.5％)，同时也是中心代谢器官。发挥肝功能的主要是实质细胞，它们占到肝脏细胞总量的80％。肝细胞发挥了一系列作用，包括制造血浆、合成载体蛋白、对消化物的解毒、共轭及荷尔蒙的分泌、调节血脂与氨基酸的合成及代谢等。细胞凋亡(apoptosis)是细胞在特定环境下的主动自杀过程。细胞凋亡是Kerr等人1972年在研究肝脏局部缺血时观察到细胞调亡和死亡的两个不同图型。细胞凋亡的特征是细胞皱缩，细胞膜呈胞状突起，形成凋亡小体，核碎片和核DNA降解等异常现象。细胞凋亡是临床许多疾病病理变化的主要特征，特别是在肝脏疾病中，肝细胞凋亡是引起肝脏损害的重要因素。肝细胞凋亡在肝脏病变机制中起着重要作用，死亡受体通路的紊乱被认为是激发急/慢性肝损伤发生的重要原因之一。近年来研究表明肝细胞凋亡广泛参与了多种肝病的病理过程，包括肝衰竭、病毒性肝炎、肝纤维化、肝硬化、酒精性肝病、非酒精性脂肪肝和自身免疫性肝病等。肝衰竭(liverfailure，LF)是由病毒、药物、酒精等多种因素引起的重型肝脏损害，导致其解毒、排泄、合成等功能发生严重障碍或失代偿，出现以凝血功能障碍、重度黄疸、腹水、肝性脑病甚至消化道出血等为主要表现的一组临床症候群，病死率极高，是肝病科临床常见的危急重症之一。《2012年版肝衰竭诊疗指南》根据其病理特征和疾病进程的不同，将肝衰竭分为急性肝衰竭(acuteliverfailure，ALF)、亚急性肝衰竭(subacuteliverfailure，SALF)、慢加急性(亚急性)肝衰竭(acute-on-chronicliverfailure，ACLF)和慢性肝衰竭(chronicliverfailure，CLF)。肝衰竭是临床急危重症，至今仍缺乏疗效确切的特效药物，因而成为世界性的难治病种之一，尽管人工肝和肝移植是行之有效的治疗方法，但是其昂贵的费用、肝源的紧缺及排斥反应等导致该治疗方法无法在我国得到广泛的推广使用。人HIP/PAP蛋白，又称再生蛋白3α(Regeneratingislet-derivedproteinIII-alpha)，是由胰腺分泌的165个氨基酸组成的蛋白质。研究表明，HIP/PAP蛋白能防御肝细胞免于肿瘤坏死因子介导的程序性死亡，同时也是一种促有丝分裂剂，能促进肝细胞有丝分裂，从而促进肝细胞再生。现在人HIP/PAP蛋白一般经由重组表达系统(例如大肠杆菌)表达，纯化方法复杂，制备成本高。多肽是由多个氨基酸通过一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基脱水缩合而形成的化合物，其也可以来源于蛋白质水解的中间产物。多肽一般指由少于50个氨基酸脱水缩合而形成的化合物，而50个氨基酸以上的多肽通常称为蛋白质。多肽类药物具有分子量小、易于合成、副作用小、特异性强等特点，很少引起严重的免疫反应。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处而提供用于促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的多肽及其用途。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的多肽，其氨基酸序列选自SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6中的至少一种。本专利技术促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的多肽，其可以是SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6中任意一氨基酸序列所示的多肽，也可以是这6种多肽中任意两种以上(包括两种)多肽的组合。上述SEQIDNO:1～SEQIDNO:6所示的多肽均衍生自人HIP/PAP蛋白。专利技术人在大量研究中发现，大部分衍生自人HIP/PAP蛋白的多肽片段都不具备生物活性，但意外的发现SEQIDNO:1～SEQIDNO:6所示的多肽具有与HIP/PAP相当或更优的促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的活性。作为本专利技术所述促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的多肽的优选实施方式，所述多肽的氨基酸序列如SEQIDNO:4所示。研究表明，如SEQIDNO:1～SEQIDNO:6所示的多肽以及HIP/PAP中，如SEQIDNO:4所示的多肽促进肝细胞增殖和抑制肝细胞凋亡的作用最强，且其活性明显高于HIP/PAP。另外，本专利技术还提供了上述多肽在制备用于促进肝细胞增殖或治疗由于肝细胞凋亡导致的疾病的产品中的用途。作为本专利技术所述用途的优选实施方式，所述产品为药物。作为本专利技术所述用途的优选实施方式，所述药物为液体剂型。作为本专利技术所述用途的优选实施方式，所述促进肝细胞增殖为体内促进肝再生或体外促进肝细胞生长。作为本专利技术所述用途的优选实施方式，所述由于肝细胞凋亡导致的疾病为肝衰竭、病毒性肝炎、肝纤维化、肝硬化、酒精性肝病、非酒精性脂肪肝或自身免疫性肝病。更优选地，所述肝衰竭为急性肝衰竭。本专利技术的专利技术人通过体外细胞实验证实本专利技术SEQIDNO:1～SEQIDNO:6所示的多肽具有促进肝细胞增殖和抑制肝细胞凋亡的活性，因此本专利技术的多肽可以用于促进肝细胞增殖或治疗肝细胞凋亡导致的疾病。研究显示，肝细胞凋亡的疾病包括肝衰竭，病毒性肝炎，胆汁淤积性肝损伤，酒精性肝损伤，非酒精性脂肪性肝炎，肝硬化，和毒素或药物介导的肝损伤等，由于本专利技术的多肽具有抑制肝细胞凋亡的活性，因此可以用于治疗上述疾病。本专利技术的多肽在急性肝衰竭动物模型中显示对急性肝衰竭的良好治疗效果，进一步证实其可用于肝细胞凋亡相关疾病的治疗。最后，本专利技术还提供了一种促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的药物，所述药物含有上述多肽。作为本专利技术所述促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的药物的优选实施方式，所述药物还包括药学上可接受的载体。本领域的技术人员可根据药物的剂型等对药学上可接受的载体进行常规选择。药物的剂型包括但不限于液体剂型、气体剂型、固体剂型等，作为本专利技术所述促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的药物的优选实施方式，所述药物为液体剂型。本专利技术的药物可通过静脉注射或皮下注射来进行给药。作为本专利技术所述促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的药物的优选实施方式，所述促进肝细胞增殖为体内促进肝再生或体外促进肝细胞生长。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术提供了促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的多肽，这些多肽长度为9至27个氨基酸，而HIP/PAP蛋白质的长度为165个氨基酸，本专利技术的多肽长度显著短于HIP/PAP蛋白质，但具有与HIP/PAP相当或更优的促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的活性，并且本专利技术多肽具有分子量小、易于合成、免疫原性低等优点，因此本专利技术的多肽具有广阔的应用前景。附图说明图1为本专利技术多肽与HIP/PAP促进肝细胞增殖的活性比较结果图；图2为本专利技术多肽与HIP/PAP抑制肝细胞凋亡的活性比较结果图；图3为本专利技术多肽与HIP/PAP治疗小鼠急性肝衰竭的生存率比较结果图。具体实施方式为更好地说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明。实施例1多肽本专利技术促进肝细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列选自SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6中的至少一种。

【技术特征摘要】
1.促进肝细胞增殖和/或抑制肝细胞凋亡的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列选自SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6中的至少一种。2.如权利要求1所述的多肽在制备用于促进肝细胞增殖或治疗由于肝细胞凋亡导致的疾病的产品中的用途。3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述产品为药物。4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述药物为液体剂型。5.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述促进肝细胞增殖为体内促进肝再生或体外促进肝细胞生长。6.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋燕，许元生，张时群，王晔，陈伟柱，
申请(专利权)人：广州领晟医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44