The invention discloses an Escherichia coli fermenting L alanine and its application, which belongs to the field of bioengineering technology. The invention takes E. coli producing L alanine as the starting strain and adaptively evolves in high concentration glucose culture medium, obtains a new strain FMME A232 which can ferment L alanine under high concentration glucose, so that it can tolerate glucose with a concentration of up to 180-220g/L in the process of producing L alanine, compared with L alanine production in application No. 201337.9. In the process of amino acid fermentation, only 80-100g/L glucose can be tolerated, and its tolerance to high concentration glucose has been greatly improved, which makes it possible to simplify the fermentation process without adding glucose more than once, and the production of L-alanine can reach 171.0g/L by using the recombinant strain for 55h in the fermentor.
【技术实现步骤摘要】
一种耐受高浓度葡萄糖的L-丙氨酸生产菌株及其应用
本专利技术涉及一种耐受高浓度葡萄糖的L-丙氨酸生产菌株及其应用,属于生物工程
技术介绍
L-丙氨酸是最小的手性分子之一,在医药、食品、日化等领域用途广泛。在医药领域,L-丙氨酸常被添加到输液中,也是合成维生素B6和氨基丙醇的主要原料;在食品领域,L-丙氨酸可以作为天然甜味剂对改善调味剂的味感和有机酸的酸。L-丙氨酸的生产工艺主要包括酶催化法和发酵法。酶催化法是通过培养富有L-天冬氨酸-β-脱羧酶AsD(EC4.1.1.12)活力的微生物细胞,催化L-天冬氨酸得到L-丙氨酸。酶法转化工艺的特点是酶活力高,设备要求简易,提取工艺简单,但主要原材料L-天冬氨酸的价格高,其生产原料为富马酸,富马酸是经石油炼制生产的,石油资源属于不可再生资源。发酵法通常是通过代谢工程和合成生物学手段改造遗传背景清晰的大肠杆菌,实现L-丙氨酸的高产。本课题组通过对大肠杆菌K12进行代谢工程改造,同时通过两阶段控制进行补料发酵,实现发酵42h,L-丙氨酸产量达到153.9g/L(专利号:201810033877.9),达到了工业化水平。发酵法生产L-丙氨酸是以葡萄糖为碳源,葡萄糖为可持续再生生物质资源,生产成本降低。发酵法生产通常采用两阶段发酵,前期好氧发酵可以有利于菌体积累,后期厌氧发酵游离与产物L-丙氨酸积累,同时需要发酵过程中需多次补加葡萄糖,发酵工艺相对复杂,而培养基中添加高浓度葡萄糖会影响菌体生长与产品积累。
技术实现思路
本专利技术以高产L-丙氨酸的大肠杆菌E.coliΔ5D2(专利号:201810033877.9)为 ...
【技术保护点】
1.一种大肠杆菌FMME‑A232,其特征在于,所述大肠杆菌FMME‑A232于2018年9月17日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2018628,保藏地址为中国.武汉.武汉大学。
【技术特征摘要】
1.一种大肠杆菌FMME-A232,其特征在于,所述大肠杆菌FMME-A232于2018年9月17日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNO:M2018628,保藏地址为中国.武汉.武汉大学。2.权利要求1所述的大肠杆菌FMME-A232在食品和/或药品中的应用。3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述应用是使用大肠杆菌FMME-A232生产L-丙氨酸。4.一种发酵生产L-丙氨酸的方法,其特征在于,所述方法为利用权利要求1所述的大肠杆菌FMME-A232发酵生产L-丙氨酸。5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述利用权利要求1所述的大肠杆菌FMME-A232发酵生产L-丙氨酸,包括:将权利要求1所述的大肠杆菌FMME-A232菌株接种于种子培养基,33~37℃震荡培养12~16h,按照5~15%接种量接种于发酵培养基,前期好氧发酵,温度28~32℃,空气量1.0~1.5vv...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘立明,刘佳,陈修来,罗秋玲,张权,
申请(专利权)人:江南大学,
类型:发明
国别省市:江苏,32
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。