The invention discloses a method for inducing drug resistance of Staphylococcus. The method includes: (1) selection of Staphylococcus strains; (2) screening of antibiotics; (3) preparation of antibiotic standard solution; (4) determination of minimum inhibitory concentration: determination of minimum inhibitory concentration by microbroth dilution; (5) generation induction; (6) determination of drug resistance, determination of each generation of Staphylococcus by disk diffusion method. Resistance of coccus to cefazolin. The experimental operation of the present invention requires less instruments and equipment, and the difficulty of material processing in the later stage is greatly reduced, so the present invention can better solve the problems of operation difficulty and capital cost, and the present invention improves the induction efficiency, accuracy and success rate; the operation of the method in the present invention is more convenient and easy to understand than other methods.
【技术实现步骤摘要】
一种诱导葡萄球菌产生耐药性的方法
本专利技术属于生物制药
,特别涉及一种诱导葡萄球菌产生耐药性的方法。
技术介绍
目前,细菌出现耐药的情况越来越多,而在近二十年内,并没有新型抗生素药物的产生,现在生活中,抗生素的使用并没有得到很好的规范,而且现在研究的耐药菌多数从病科或者自然界分离提纯得到,对其进行耐药性分析需要耗费大量资金与试件,而且难以分析清楚其变异过程,故对人工微生物产生耐药性的研究就更加迫切,对耐药菌材料的需求也更加大。目前做细菌耐药性诱导的方法主要有:1)物理法,如伽马射线诱导、紫外照射,这种诱导方法诱导出来的变异不定向,后续还需要经过进一步的筛选,并且放射剂量不好控制,容易造成细菌死亡,而且对设备、试验条件要求高,对实验人员伤害也大;2)化学法,如药物浓度梯度平板法,这种方法需要制备大量的试样,而且操作误差控制也比较难,空间占用率也高,对材料消耗也比较大,后期材料处理也不够;3)生物法,如基因工程,这种技术能够很大程度的解决变异不定向的问题,但其操作成本高、技术要求高并且操作繁琐。
技术实现思路
本专利技术提供一种诱导葡萄球菌产生耐药性的方法,此方法可行性高,效果稳定,并且使用耗材少,操作简单。为实现上述目的,本专利技术采用下述技术方案。一种诱导葡萄球菌产生耐药性的方法,包括以下步骤:(1)葡萄球菌菌种的选择:从动物病料中分离提纯葡萄球菌或者从实验室中随机选取葡萄球菌菌种作为实验原代菌;(2)筛选抗生素:纸片扩散法进行实验原代菌的多种抗生素药敏实验,实验重复2~3次,筛选出实验原代菌的敏感抗生素,其敏感抗生素为头孢唑啉;(3)抗生素标准品的溶 ...
【技术保护点】
1.一种诱导葡萄球菌产生耐药性的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)葡萄球菌菌种的选择:从动物病料中分离提纯葡萄球菌或者从实验室中随机选取葡萄球菌菌种作为实验原代菌;(2)筛选抗生素:纸片扩散法进行实验原代菌的多种抗生素药敏实验,实验重复2~3次,筛选出实验原代菌的敏感抗生素,其敏感抗生素为头孢唑啉;(3)抗生素标准品的溶液配制:将0.0256g头孢唑啉溶解于普通营养肉汤中,并将此溶液定容至50ml,制得浓度为512ug/ml的头孢唑啉药液;将制得的头孢唑啉药液分装在5ml离心管中,在环境温度为‑20℃下保存;(4)最小抑菌浓度的测定:微量肉汤稀释法测定最小抑菌浓度;(5)传代诱导;(6)耐药性测定,采用纸片扩散法测定每一代葡萄球菌对头孢唑啉的耐药性。
【技术特征摘要】
1.一种诱导葡萄球菌产生耐药性的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)葡萄球菌菌种的选择:从动物病料中分离提纯葡萄球菌或者从实验室中随机选取葡萄球菌菌种作为实验原代菌;(2)筛选抗生素:纸片扩散法进行实验原代菌的多种抗生素药敏实验,实验重复2~3次,筛选出实验原代菌的敏感抗生素,其敏感抗生素为头孢唑啉;(3)抗生素标准品的溶液配制:将0.0256g头孢唑啉溶解于普通营养肉汤中,并将此溶液定容至50ml,制得浓度为512ug/ml的头孢唑啉药液;将制得的头孢唑啉药液分装在5ml离心管中,在环境温度为-20℃下保存;(4)最小抑菌浓度的测定:微量肉汤稀释法测定最小抑菌浓度;(5)传代诱导;(6)耐药性测定,采用纸片扩散法测定每一代葡萄球菌对头孢唑啉的耐药性。2.根据权利要求1所述的一种诱导葡萄球菌产生耐药性的方法,其特征在于,步骤(4)具体包括如下步骤:①将普通营养肉汤过夜培养的葡萄球菌菌液稀释10~100倍,制得接种悬液;②对步骤(3)制得512ug/ml的头孢唑啉药液进行倍比稀释,稀释成浓度分别为...
【专利技术属性】
技术研发人员:娄华,曾森,李嘉怡,陈仁贵,朱海琪,吴志胜,刘俊杰,刘霜霜,
申请(专利权)人:佛山科学技术学院,
类型:发明
国别省市:广东,44
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