一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法技术

本发明专利技术公开了一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，该方法的工艺步骤包括：步骤1、杏鲍菇菌种的活化；步骤2、杏鲍菇种子液的制备；步骤3、杏鲍菇种子液超声波电场组合处理；步骤4、杏鲍菇的液体初级发酵；步骤5、杏鲍菇的液体富硒发酵。本发明专利技术对杏鲍菇液态发酵工艺流程进行了优化，同时在发酵过程中加入硒源，得到了菌丝活性强、生长快、萌发点多、生物量大，同时有机硒含量高的杏鲍菇液体菌种，该菌种接种后发菌快、出菇整齐，生产效率高，产出的富硒杏鲍菇营养价值更高，因此本发明专利技术的方法具有很好的商业前景。

A Method of Producing Selenium-enriched Pleurotus eryngii Strain by Liquid Fermentation

The invention discloses a liquid fermentation method for producing selenium-rich Pleurotus eryngii strains. The technological steps of the method include: step 1, activation of Pleurotus eryngii strains; step 2, preparation of Pleurotus eryngii seed liquor; step 3, combination treatment of ultrasonic electric field of Pleurotus eryngii seed liquor; step 4, liquid primary fermentation of Pleurotus eryngii; step 5, liquid selenium-rich fermentation of Pleurotus eryngii. The present invention optimizes the technological process of liquid fermentation of Pleurotus eryngii and abalone mushroom, adds selenium source in the fermentation process, obtains liquid strain of Pleurotus eryngii with strong mycelial activity, fast growth, multiple germination points, large biomass and high content of organic selenium. After inoculation, the strain has fast bacteria, neat mushroom production, high production efficiency and higher nutritive value of the selenium-enriched Pleurotus eryngii. The method has good commercial prospects.

【技术实现步骤摘要】
一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法
本专利技术涉及一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，属于食用菌发酵领域。
技术介绍
杏鲍菇（Pleurotuseryngii）又叫刺芹侧耳，属于真菌门、担子菌亚门、真担子菌纲、层菌亚纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属。杏鲍菇菌肉肥厚，营养丰富，具有杏仁香味和鲍鱼味，故称杏仁鲍鱼菇。其子实体色泽雪白，质地脆嫩，也称“雪茸”，又有“平菇王”、“干贝菇”、“草原上的美味牛肝菌”之美誉。野生杏鲍菇主要分布于南欧、北非、中亚等地区，在我国主要分布在新疆、青海、四川北部。我国自20世纪90年代开始引种栽培杏鲍菇，经过多年的人工驯化栽培技术研究，目前我国的许多地区已经开始产业化生产。杏鲍菇是药食两用的珍稀食用菌，其主要营养成分包括蛋白质、多糖、脂肪、维生素和微量矿质元素等。与香菇、银耳和黑木耳干品相比，杏鲍菇蛋白质和微量矿质元素含量较高，而脂肪含量较低。杏鲍菇含有18种氨基酸，其中8种是人体必需氨基酸，占氨基酸总量的42%。杏鲍菇多糖是杏鲍菇的主要活性成分，具有降血压、降血脂、降低胆固醇、刺激抗体形成、增强人体免疫力的功能。此外杏鲍菇多糖还具有抑制肿瘤细胞生长、抗衰老、抗突变、抗氧化等作用。硒是人体必需的一种微量营养元素，在机体中与一些酶相结合，生成有生物特性的大分子化合物，这些化合物能够保护机体免受氧化损害，增强免疫力。例如，硒元素是谷胱甘肽过氧化物酶家族和硫氧还蛋白还原酶家族的活性中心，由谷胱甘肽过氧化物酶家族和硫氧还蛋白还原酶家族与硒元素结合之后，具有较强的清除氧自由基、防止脂膜过氧化的功能，是机体抗氧化体系的重要组成部分。此外，硒元素对于机体的细胞免疫和体液免疫能力的维持具有一定的支撑作用，从而实现了增强机体免疫能力的功能。由于人体无法自身合成硒，所以需要从外界摄取，因此目前关于富硒产品的开发也是一大热门。然而，硒在地表土壤中分布零散，普遍含量较低，并且大多以矿物晶格形态存在，很难被作物吸收利用。如果在土壤中施加大量硒，使作物富集更多的硒成为富硒粮食，很容易污染环境。实践证实，食用菌富硒能力较强，可以通过制造局部高浓度的硒环境，使菌体在生长过程中能够吸收环境中的硒元素，硒元素进入细胞内，细胞内的物质代谢可以将其结合到大分子活性物质（如多糖和蛋白质）上，转化为多糖硒和蛋白硒等有机形态的硒，从而提高了食用菌自身的硒含量。目前，食用菌作为富集硒元素的载体，因其栽培面积广，操作简便，富集效果显著，在我国正被广泛应用。众所周知，要发展食用菌产业，关键前提是优良菌种（或品种）先行，只有优良的菌种才能达到优质高产。长期以来杏鲍菇栽培大多利用固体菌种，固体菌种存在着生产较为繁琐、杂菌污染率高、生长周期长、菌龄不一致等问题，大大制约了杏鲍菇的产业化发展。而液体菌种具有制种周期短、产量高、品质好、定殖封面快、发菌周期短、菌龄一致、污染率低和生产成本低等诸多优点，适合食用菌规模化栽培，已成为食用菌制种产业的发展趋势。采用液态发酵的方法生产杏鲍菇液体菌种，不仅生产周期短，可以在短期内获得大量菌丝体，而且生产能力大，发酵液特性也稳定，便于大规模化生产，因此具有极大的开发潜力。传统上，杏鲍菇富硒培养主要是在杏鲍菇栽培过程中，在固体基料中加入硒源，常用的硒源为市售亚硒酸钠盐，杏鲍菇通过自身的生理生化反应，将硒源吸收入体内转化为有机硒富集在子实体中。但此种方法存在着菌体对硒的吸收率不高，有机硒含量较低的缺点。而结合液态发酵的方法，在杏鲍菇液体菌种的发酵过程中添加硒源，能大大提高硒的吸收率和有机硒的转化率，从而生产出有机硒含量高的液体菌种，用于栽培即可得到富硒杏鲍菇，因此是本专利技术的研究重点。
技术实现思路
为了解决目前杏鲍菇菌种生产上存在的问题以及传统富硒杏鲍菇栽培中有机硒含量较低的缺点，本专利技术提供了的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法。为达到上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，其特征在于，该方法的工艺步骤包括：步骤1、杏鲍菇菌种的活化将保藏的杏鲍菇菌种接种到PDA培养基斜面上，置于25℃培养箱中恒温培养3~4d，再转接到新鲜的PDA培养基斜面上，置于25℃培养箱中恒温培养，菌丝长满斜面后待用；步骤2、杏鲍菇种子液的制备将活化的杏鲍菇菌丝块切割成0.5~1cm2小块，无菌条件下接种到装有100mL种子液培养基的250mL锥形瓶中，每瓶放入3块，先置于25℃培养箱中恒温培养2d，再置于摇床上振荡培养4~6d，得到杏鲍菇种子液；步骤3、杏鲍菇种子液超声波电场组合处理将种子液先进行超声波辐照处理，超声频率为28kHz，功率为30W，超声30s间歇10s，一共处理45min；然后将种子液放置于60KV/m的均匀电场中处理2min；步骤4、杏鲍菇的液体初级发酵按照9%~11%的接种量将上述种子液接种到装有200mL初级发酵培养基的500mL锥形瓶中，置于摇床上振荡培养4~6d，得到杏鲍菇初级发酵液；步骤5、杏鲍菇的液体富硒发酵采用气升式发酵罐，将富硒发酵培养基配制好后装入发酵罐内，装料系数为65%~75%，通入空气搅拌1~2min，混合均匀，然后密封盖口，高压蒸汽灭菌1h，灭菌完成后，等到发酵罐内培养基温度降至30℃以下时，按照9%~11%的接种量将杏鲍菇初级发酵液从接种口接入发酵罐内，发酵培养5~7d，获得富硒杏鲍菇液体菌种。所述步骤2中，种子液培养基的配方为：马铃薯180~220g/L，葡萄糖10~14g/L，麦芽糖6~8g/L，番茄汁20~30mL/L，牛肉膏1~2g/L，KH2PO40.9~1.1g/L，MgSO40.4~0.6g/L，CaCl20.3~0.5g/L，pH自然。所述步骤3中，超声波辐照处理采用的设备为CY-5D超声波生物促进生长仪。所述步骤4中，初级发酵培养基的配方为：葡萄糖30~34g/L，玉米粉21~25g/L，胡萝卜7~10g/L，花生粕3~4g/L，米糠2.1~2.3g/L，茶籽粕2.5~3.1g/L，海藻粉1.7~2.5g/L，大豆油0.5~0.7mL/L，生育酚4~5mg/L，ZnSO4300~350mg/L，KNO30.8~1.2g/L，三十烷醇1.4~1.8mg/L，KH2PO41.8~2.2g/L，MgSO40.9~1.1g/L，pH值为6.0~6.4。所述步骤2和步骤4中摇床振荡培养的温度为24~26℃，转速为145~155r/min。所述步骤5中富硒发酵培养基的配方为：可溶性淀粉20~26g/L，燕麦麸皮18~24g/L，红糖6~10g/L，平菇菌糠6.6~8.0g/L，玉米芯2.2~3.0g/L，豆粕粉5.5~6.5g/L，富硒酵母粉2.6~3.0g/L，苦荞皮壳5.9~6.5g/L，胡麻茎杆粉3.3~3.9g/L，KH2PO41.8~2.2g/L，MgSO40.9~1.1g/L，醋酸钠0.5~0.7g/L，Na2SeO328~32mg/L，氰钴胺50~60mg/L，棕榈酸1.8~2.4g/L，初始pH值为6.4~6.6。所述步骤5中发酵培养参数为：培养温度24~26℃，搅拌机转速155~165r/min，前2d通气量为1:1（V/V/min），后3~5d通气量为1:0.5（V/V/min）。本专利技术具有以下有益效果：1、本专利技术优化本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，其特征在于，该方法的工艺步骤包括：步骤1、杏鲍菇菌种的活化将保藏的杏鲍菇菌种接种到PDA培养基斜面上，置于25℃培养箱中恒温培养3~4d，再转接到新鲜的PDA培养基斜面上，置于25℃培养箱中恒温培养，菌丝长满斜面后待用；步骤2、杏鲍菇种子液的制备将活化的杏鲍菇菌丝块切割成0.5~1cm2小块，无菌条件下接种到装有100mL种子液培养基的250mL锥形瓶中，每瓶放入3块，先置于25℃培养箱中恒温培养2d，再置于摇床上振荡培养4~6d，得到杏鲍菇种子液；步骤3、杏鲍菇种子液超声波电场组合处理将种子液先进行超声波辐照处理，超声频率为28kHz，功率为30W，超声30s间歇10s，一共处理45min；然后将种子液放置于60KV/m的均匀电场中处理2min；步骤4、杏鲍菇的液体初级发酵按照9%~11%的接种量将上述种子液接种到装有200mL初级发酵培养基的500mL锥形瓶中，置于摇床上振荡培养4~6d，得到杏鲍菇初级发酵液；步骤5、杏鲍菇的液体富硒发酵采用气升式发酵罐，将富硒发酵培养基配制好后装入发酵罐内，装料系数为65%~75%，通入空气搅拌1~2 min，混合均匀，然后密封盖口，高压蒸汽灭菌1h，灭菌完成后，等到发酵罐内培养基温度降至30℃以下时，按照9%~11%的接种量将杏鲍菇初级发酵液从接种口接入发酵罐内，发酵培养5~7d，获得富硒杏鲍菇液体菌种。...

【技术特征摘要】
1.一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，其特征在于，该方法的工艺步骤包括：步骤1、杏鲍菇菌种的活化将保藏的杏鲍菇菌种接种到PDA培养基斜面上，置于25℃培养箱中恒温培养3~4d，再转接到新鲜的PDA培养基斜面上，置于25℃培养箱中恒温培养，菌丝长满斜面后待用；步骤2、杏鲍菇种子液的制备将活化的杏鲍菇菌丝块切割成0.5~1cm2小块，无菌条件下接种到装有100mL种子液培养基的250mL锥形瓶中，每瓶放入3块，先置于25℃培养箱中恒温培养2d，再置于摇床上振荡培养4~6d，得到杏鲍菇种子液；步骤3、杏鲍菇种子液超声波电场组合处理将种子液先进行超声波辐照处理，超声频率为28kHz，功率为30W，超声30s间歇10s，一共处理45min；然后将种子液放置于60KV/m的均匀电场中处理2min；步骤4、杏鲍菇的液体初级发酵按照9%~11%的接种量将上述种子液接种到装有200mL初级发酵培养基的500mL锥形瓶中，置于摇床上振荡培养4~6d，得到杏鲍菇初级发酵液；步骤5、杏鲍菇的液体富硒发酵采用气升式发酵罐，将富硒发酵培养基配制好后装入发酵罐内，装料系数为65%~75%，通入空气搅拌1~2min，混合均匀，然后密封盖口，高压蒸汽灭菌1h，灭菌完成后，等到发酵罐内培养基温度降至30℃以下时，按照9%~11%的接种量将杏鲍菇初级发酵液从接种口接入发酵罐内，发酵培养5~7d，获得富硒杏鲍菇液体菌种。2.按照权利要求1所述的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，其特征在于，所述步骤2中，种子液培养基的配方为：马铃薯180~220g/L，葡萄糖10~14g/L，麦芽糖6~8g/L，番茄汁20~30mL/L，牛肉膏1~2g/L，KH2PO40.9~1.1g/L，MgSO40.4~0.6g/L，CaCl20.3~0.5g/L，pH自然。3.按照权利要求1所述的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种...

【专利技术属性】
技术研发人员：谷玉秋，沙淼，高雪，
申请(专利权)人：江苏高航农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32