具有活性氧和pH双重响应性及电荷反转特性的智能基因载体的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种具有活性氧和pH双重响应性及电荷反转特性的智能基因载体的制备方法，属于生物医用高分子基因缓控释技术领域，是一种利用原子转移自由基聚合方法(ATRP)，将具有不同功能组分的链段聚合成一整段阳离子高分子，再使用功能化小分子进行修饰，实现具备双重响应性及电荷反转的特性，并通过主客体作用，引入具有光敏和聚集诱导性质的苯硼酸化的四苯基乙烯衍生物，最终与脱氧核糖核酸(DNA)通过正负电荷相互作用自组装成纳米粒子。本发明专利技术简便易行、成本低廉，可广泛应用于材料学、生物学、医学等领域，既可以控制DNA的释放，可控的光调节活性氧的生成，并可通过荧光来追踪载体。

【技术实现步骤摘要】
具有活性氧和pH双重响应性及电荷反转特性的智能基因载体的制备方法
本专利技术属于生物医用高分子基因缓控释
，是一种利用原子转移自由基聚合方法(ATRP)，将具有不同功能组分的链段聚合成一整段阳离子高分子，进而与脱氧核糖核酸(DNA)通过正负电荷相互作用自组装成纳米粒子。
技术介绍
原子转移自由基聚合技术(ATRP)，是以简单的有机卤化物为引发剂、过渡金属配合物为卤原子载体，通过氧化还原反应，在活性种与休眠种之间建立可逆的动态平衡，从而实现了对聚合反应的控制。ATRP聚合体系的引发剂主要是卤代烷RX(X＝Br,Cl)，苄基卤化物，α-溴代酯，α-卤代酮，α-卤代腈等，另外也有采用芳基磺酰氯、偶氮二异丁腈等。原子转移自由基聚合技术是近几年迅速发展并有着重要应用价值的一种活性聚合技术，可有效地对聚合物的分子结构进行设计，制备出各种不同性能、不同功能的新型聚合物材料,即所谓的“量体裁衣”。它可以通过分子设计制得多种具有不同拓扑结构(线型、梳状、网状、星形、树枝状大分子等)、不同组成和不同功能化的结构确定的聚合物及有机/无机杂化材料。与离子聚合等传统活性聚合技术相比，它具有单体覆盖面广，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有活性氧和pH双重响应性及电荷反转特性的智能基因载体的制备方法，其特征是包括以下步骤：1)将2‑(二乙氨基)丙烯酸乙酯(DEAEA)、2‑(5,5‑二甲基‑1,3‑二恶烷‑2‑基)乙基丙烯酸酯(DMDEA)和甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)三种单体以原子转移自由基聚合技术(ATRP)进行共聚形成高分子(PD‑PDM‑PG)；2)将步骤1)所得高分子产物(PD‑PDM‑PG)以4‑溴甲基苯硼酸频哪醇酯和乙二胺化β‑环糊精分别对PD和GMA端进行修饰，得到高分子聚合物(BP‑PDM‑PG)，最后通过主客体作用，引入四苯基乙烯，得到最终纳米载体(BP‑PDM‑PG(TPE))。

【技术特征摘要】
1.一种具有活性氧和pH双重响应性及电荷反转特性的智能基因载体的制备方法，其特征是包括以下步骤：1)将2-(二乙氨基)丙烯酸乙酯(DEAEA)、2-(5,5-二甲基-1,3-二恶烷-2-基)乙基丙烯酸酯(DMDEA)和甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)三种单体以原子转移自由基聚合技术(ATRP)进行共聚形成高分子(PD-PDM-PG)；2)将步骤1)所得高分子产物(PD-PDM-PG)以4-溴甲基苯硼酸频哪醇酯和乙二胺化β-环糊精分别对PD和GMA端进行修饰，得到高分子聚合物(BP-PDM-PG)，最后通过主客体作用，引入四苯基乙烯，得到最终纳米载体(BP-PDM-PG(TPE))。2.根据权利要求1所述的具有活性氧和pH双重响应性及电荷反转特性的智能基因载体的制备方法，其特征是：步骤1)中是将DEAEA、DMDEA和GMA按摩尔比1:2:1进行投料，并根据聚合度依次加入1当量的引发剂2-溴异丁酰溴、1.5当量的联吡啶和1当量的溴化亚铜(CuBr)，溶解于适量无水二甲基甲酰胺(DMF)中，氮气保护下80℃反应24小时，反应粗产物经过冷却，柱洗脱和沉淀纯化处理后，得到共聚高分子产物(PD-PDM-PG)。3.根据权利要求1所述的具有活性氧和pH双重响应性及电荷反转特性的智能基因载体...

【专利技术属性】
技术研发人员：高辉，朱华杰，安金霞，黄泳糠，
申请(专利权)人：天津理工大学，
类型：发明
国别省市：天津,12