一种靶向Muc1的嵌合抗原受体修饰T细胞及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种靶向Muc1的嵌合抗原受体修饰T细胞及其用途。具体而言，本发明专利技术提供的嵌合抗原受体从N端到C端依次含有膜蛋白信号肽、抗Muc1近膜端的单链抗体、长50个氨基酸残基以上的铰链区、跨膜区、共刺激信号分子胞内结构域和免疫受体酪氨酸活化基序。本发明专利技术还包括表达本文所述嵌合抗原受体的T细胞，该T细胞能识别并结合Muc1抗原近膜端，通过高效活化增殖，分泌细胞因子，杀伤Muc1阳性的肿瘤细胞。本发明专利技术提供的T细胞可以用于多种Muc1阳性恶性肿瘤的治疗。

【技术实现步骤摘要】
一种靶向Muc1的嵌合抗原受体修饰T细胞及其用途
本专利技术属于基因工程学和肿瘤学，涉及一种特异性靶向Muc1抗原的嵌合抗原受体修饰细胞及其抗肿瘤效果。
技术介绍
嵌合抗原受体T细胞(chimericantigenreceptorTcell，CAR-T)治疗技术无疑是肿瘤免疫细胞治疗领域中一颗冉冉升起的巨星。CAR-T技术是通过基因工程技术将识别某抗原分子的抗体可变区基因序列与T淋巴细胞免疫受体的胞内区序列拼接后，通过逆转录病毒或慢病毒载体、转座子或转座酶系统或直接mRNA转导到淋巴细胞内，并表达融合蛋白于细胞表面，使T淋巴细胞能通过非MHC限制性的方式识别特定抗原，增强其识别和杀伤肿瘤的能力。CAR的结构自1989年以色列Eshhar研究小组首次提出后，经过近30年的发展，已经被证实经过CAR结构修饰的T细胞在肿瘤免疫治疗中具有较好的疗效。第一代CAR受体包含了胞外特异识别肿瘤抗原的片段(single-chainvariablefragment，scFv)，胞内激活信号由CD3ζ信号链来传递。但是第一代CAR受体缺乏T细胞的共刺激信号，导致T细胞只能发挥瞬间效应，在体内存在时间短、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种嵌合抗原受体，其特征在于，从N端到C端，该嵌合抗原受体依次含有膜蛋白信号肽、抗Muc1近膜端的单链抗体、长50个氨基酸残基以上的铰链区、跨膜区、共刺激信号分子胞内结构域和免疫受体酪氨酸活化基序。

【技术特征摘要】
1.一种嵌合抗原受体，其特征在于，从N端到C端，该嵌合抗原受体依次含有膜蛋白信号肽、抗Muc1近膜端的单链抗体、长50个氨基酸残基以上的铰链区、跨膜区、共刺激信号分子胞内结构域和免疫受体酪氨酸活化基序。2.如权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述Muc1近膜端的氨基酸序列如SEQIDNO:10所示；优选地，所述抗Muc1单链抗体的氨基酸序列如SEQIDNO:3所示。3.如权利要求1或2所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体具有以下一个或多个特征：所述膜蛋白信号肽选自CD8信号肽、CD28信号肽和CD4信号肽；优选地，所述信号肽是CD8信号肽，其氨基酸序列如SEQIDNO:1所示；所述长50个氨基酸残基以上的铰链区选自CD8α铰链区、IgD铰链区、IgG1FcCH2CH3铰链区和IgG4FcCH2CH3铰链区；优选地，所述铰链区是CD8α铰链区或IgG4FcCH2CH3铰链区；更优选地，CD8α铰链区的氨基酸序列如SEQIDNO:4所示；所述IgG4FcCH2CH3铰链区的氨基酸序列如SEQIDNO:5所示；所述跨膜区选自CD28跨膜区、CD8跨膜区、CD3ζ跨膜区、CD134跨膜区、CD137跨膜区、ICOS跨膜区和DAP10跨膜区中的一种或多种；优选地，所述跨膜区为CD8跨膜区，其氨基酸序列如SEQIDNO:6所示；所述共刺激信号分子胞内结构域选自CD28、CD134/OX40、CD137/4-1BB、LCK、ICOS和DAP10胞内结构域中的一种或多种；优选地，所述共刺激信号分子胞内结构域是CD28胞内结构域，其氨基酸序列如SEQIDNO:7所示，或所述共刺激信号分子胞内结构域是CD137胞内结构域，其氨基酸序列如SEQIDNO:8所示；和所述免疫受体酪氨酸活化基序为CD3ζ和/或FcεRIγ的酪氨酸活化基序；优选地，所述免疫受体酪氨酸活化基序为CD3ζ酪氨酸活化基序，其氨基酸序列如SEQIDNO:9所示。4.如权利要求1－3中任一项所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体从N端到C端依次含有CD8信号肽、抗Muc1近膜端的scFv、CD8铰链区、CD8跨膜区、CD137胞内结构域和CD3ζ酪氨酸活化基序；或所述嵌合...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱其军，金华君，何周，王超，李林芳，
申请(专利权)人：上海细胞治疗研究院，上海细胞治疗集团有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31