包括泌酸调节肽和免疫球蛋白片段的结合物以及其应用制造技术

本发明专利技术涉及包括泌酸调节肽、免疫球蛋白Fc区和非肽基聚合物的结合物，其中结合物通过非肽基聚合物共价连接泌酸调节肽与免疫球蛋白Fc区而获得，和用于预防或治疗肥胖的包括该结合物的药物组合物。本发明专利技术的包括泌酸调节肽和免疫球蛋白Fc的结合物减少食物摄入，抑制胃排空和促进脂解作用而没有副作用，与天然泌酸调节肽不同，并且与天然泌酸调节肽相比还显示优异的受体活化作用和长期可持续性。因此，它可广泛用于肥胖的治疗，具有安全性和有效性。

Compounds of acid-secreting regulatory peptides and immunoglobulin fragments and their applications

The present invention relates to a combination of acid-secreting regulatory peptide, immunoglobulin Fc region and non-peptide-based polymer, in which the conjugate is obtained by covalently linking acid-secreting regulatory peptide with immunoglobulin Fc region by non-peptide-based polymer, and a pharmaceutical composition including the conjugate for preventing or treating obesity. The invention comprises a combination of secretory acid regulatory peptide and immunoglobulin Fc, which reduces food intake, inhibits gastric emptying and promotes lipolysis without side effects, is different from natural secretory acid regulatory peptide, and shows excellent receptor activation and long-term sustainability compared with natural secretory acid regulatory peptide. Therefore, it can be widely used in the treatment of obesity, with safety and effectiveness.

【技术实现步骤摘要】
包括泌酸调节肽和免疫球蛋白片段的结合物以及其应用本申请是分案申请，原申请的申请日为2012年6月15日，中国申请号为201280039781.4，国际申请号为PCT/KR2012/004722，专利技术名称为“包括泌酸调节肽和免疫球蛋白片段的结合物以及其应用”。
本专利技术涉及包括泌酸调节肽和免疫球蛋白片段的结合物以及其应用。更具体地，本专利技术涉及包括泌酸调节肽、免疫球蛋白Fc区和非肽基聚合物的结合物，其中结合物可通过非肽基聚合物共价连接泌酸调节肽与免疫球蛋白Fc区而获得，和用于预防或治疗肥胖的包括该结合物的药物组合物。
技术介绍
近来，经济的增长和生活方式的变化导致饮食习惯改变。当代人超重和肥胖率升高的主要原因是食用高卡路里食品如快餐食品和缺乏锻炼。世界卫生组织(WHO)估测，世界上10亿以上人超重，并且其中至少3亿是临床上的肥胖。具体地，在欧洲每年250,000人并且在世界上每年250万以上人因超重而死亡(世界卫生组织，GlobalStrategyonDiet，PhysicalActivityandHealth，2004)。超重和肥胖使血压和胆固醇水平升高，从而引起多种疾病如心血管疾病、糖尿病和关节炎发生或恶化，并且也是儿童或青少年以及成年人动脉硬化、高血压、高脂血或心血管疾病发病率升高的主要原因。肥胖是引起世界上多种疾病的严重病症。据认为其通过个人努力克服，并且还认为肥胖患者缺乏自制。但是，肥胖难以治疗，因为肥胖是涉及食欲调节和能量代谢的复杂病症。就肥胖治疗而言，应当结合肥胖患者的努力治疗与食欲调节和能量代谢有关的异常表现。已经做出多种尝试以开发能够治疗异常表现的药物。基于这些努力，药物如利莫那班(Rimonabant，Sanofi-Aventis)、西布曲明(Sibutramin，Abbott)、Contrave(Takeda)和奥利司他(Orlistat，Roche)已被开发，但其具有严重副作用或极微弱抗肥胖效果的缺陷。例如，据报告，利莫那班(Sanofi-Aventis)显示中枢神经病症的副作用，西布曲明(Abbott)和Contrave(Takeda)显示心血管副作用，和奥利司他(Roche)显示服用1年仅减重4kg。不幸地，没有可为肥胖患者安全配药的肥胖治疗剂。已进行多项研究以开发不具有常规抗肥胖药物问题的肥胖治疗剂。近来，胰高血糖素衍生物已经受到大量关注。当血液中的葡萄糖水平由于其他药物或疾病、激素或酶缺乏而下降时，胰腺产生胰高血糖素。胰高血糖素刺激糖原在肝脏中分解，并且促进葡萄糖释放，以使血糖水平升高至正常范围。除增加血糖水平的作用以外，胰高血糖素还抑制食欲和激活脂肪细胞的激素敏感性脂酶(HSL)，以促进脂解，从而显示抗肥胖作用。胰高血糖素衍生物之一，类胰高血糖素肽-1(GLP-1)，正被开发为糖尿病患者的高血糖治疗剂，并且其发挥作用以刺激胰岛素合成和分泌，抑制胰高血糖素分泌，减缓胃排空，增加葡萄糖利用率，和抑制食物摄入。艾塞那肽-4(Exendin-4)从蜥蜴的毒素中分离，其与GLP-1共有约50％的氨基酸同源性，并且也被报告为激活GLP-1受体，从而缓解糖尿病患者的高血糖。但是，据报告包括GLP-1的抗肥胖药物显示副作用，如呕吐和恶心。因此，作为GLP-1的替代选择，大量关注已集中于泌酸调节肽——衍生自胰高血糖素前体即前胰高血糖素的肽，其与两种肽——GLP-1和胰高血糖素的受体——结合。泌酸调节肽是有效的抗肥胖治疗手段，因为其如同GLP-1抑制食物摄入，促进饱足感，并且如同胰高血糖素具有脂解活性。基于泌酸调节肽的双功能，其已被积极地研究作为治疗肥胖的药物。例如，韩国专利号925017公开了包括泌酸调节肽作为治疗超重人的活性成分的药物组合物，其通过口服、胃肠外、粘膜、直肠、皮下或经皮途径给予。但是，已经报告，包括泌酸调节肽的这种抗肥胖药物的体内半衰期短并且治疗效力微弱——即使以高剂量一日三次给予。因此，已经做出多种努力以通过对其修饰提高泌酸调节肽的体内半衰期或对肥胖的治疗作用。例如，双重激动剂泌酸调节肽(Merck)通过如下制备：用D-丝氨酸替代泌酸调节肽位置2的L-丝氨酸，以增加对二肽基肽酶-IV(DPP-IV)的耐受性；同时在C端连接胆固醇部分，以增加血液半衰期。ZP2929(Zealand)通过如下制备：用D-丝氨酸替代位置2的L-丝氨酸，以增强对DPP-IV的耐受性；用丙氨酸替代位置17的精氨酸，以增强对蛋白酶的耐受性；用赖氨酸替代位置27的蛋氨酸，以增强氧化稳定性；和用天冬氨酸和丙氨酸替代位置20和24的谷氨酰胺并且用丝氨酸替代位置28的天冬酰胺，以增强脱酰胺稳定性。但是，即使增加双重激动剂泌酸调节肽(Merck)的半衰期至显示半衰期比天然泌酸调节肽长8～12分钟，其仍具有很短的体内半衰期1.7hr，并且其给予剂量还高达若干mg/kg。不幸地，由于半衰期短和效力低，泌酸调节肽或其衍生物具有每日高剂量给予的缺陷。
技术实现思路
技术问题相应地，本专利技术人已进行了许多努力来发展增加泌酸调节肽的血液半衰期同时保持其体内活性的方法。因此，专利技术人发现通过利用非肽基聚合物连接载体与泌酸调节肽而制备的结合物显示提高的血液半衰期同时保持体内活性从而显示极好的抗肥胖作用，由此完成本专利技术。技术方案本专利技术的目的是提供包括泌酸调节肽、免疫球蛋白Fc区和非肽基聚合物的结合物，其中结合物可通过非肽基聚合物共价连接泌酸调节肽与免疫球蛋白Fc区而获得。本专利技术的另一个目的是提供用于肥胖的预防或治疗的包括结合物的药物组合物。本专利技术的另一个目的是提供预防或治疗肥胖的方法，包括将结合物或组合物施用给对象的步骤。本专利技术的另一个目的是提供结合物或组合物在制备用于肥胖预防或治疗的药物中的应用。有益效果本专利技术的包括泌酸调节肽和免疫球蛋白Fc的结合物减少食物摄入，抑制胃排空和促进脂解作用而没有副作用，与天然泌酸调节肽不同，并且与泌酸调节肽相比还显示极好的受体活化作用和长期可持续性。因此，它可广泛用于肥胖的治疗，具有安全性和有效性。与天然泌酸调节肽不同，本专利技术的新的肽减少食物摄入，抑制胃排空和促进脂解作用而没有副作用，并且还显示极好的受体活化作用。因此，它可广泛用于肥胖的治疗，具有安全性和有效性。附图说明图1是显示根据泌酸调节肽或泌酸调节肽衍生物的施用剂量的食物摄入变化的图。图2a是显示通过SOURCES纯化柱纯化单聚乙二醇化泌酸调节肽的结果的图。图2b是显示纯化的单聚乙二醇化泌酸调节肽的肽作图结果的图。图2c是显示通过SOURCE15Q纯化柱纯化包括泌酸调节肽和免疫球蛋白Fc的结合物的结果的图。图3a是显示通过SOURCES纯化柱纯化单聚乙二醇化泌酸调节肽衍生物(SEQIDNO.29)的结果的图。图3b是显示通过SOURCE15Q纯化柱纯化包括泌酸调节肽衍生物(SEQIDNO.29)和免疫球蛋白Fc的结合物的结果的图。图4a是显示通过SOURCES纯化柱纯化单聚乙二醇化泌酸调节肽衍生物(SEQIDNO.30)的结果的图。图4b是显示纯化的单聚乙二醇化泌酸调节肽衍生物(SEQIDNO.30)的肽作图结果的图。图4c是显示通过SOURCE15Q纯化柱纯化包括泌酸调节肽衍生物(SEQIDNO.30)和免疫球蛋白Fc的结合物的结本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.包括泌酸调节肽衍生物、免疫球蛋白Fc区和非肽基聚合物的结合物，其中所述结合物通过非肽基聚合物共价连接所述泌酸调节肽衍生物与免疫球蛋白Fc区而获得，其中所述泌酸调节肽衍生物选自SEQ ID NO.23、26、27、32、33和34的肽。

【技术特征摘要】
2011.06.17 KR 10-2011-00588521.包括泌酸调节肽衍生物、免疫球蛋白Fc区和非肽基聚合物的结合物，其中所述结合物通过非肽基聚合物共价连接所述泌酸调节肽衍生物与免疫球蛋白Fc区而获得，其中所述泌酸调节肽衍生物选自SEQIDNO.23、26、27、32、33和34的肽。2.根据权利要求1所述的结合物，其中所述泌酸调节肽衍生物能活化GLP-1受体和胰高血糖素受体。3.根据权利要求1所述的结合物，其中所述结合物具有抗肥胖作用。4.根据权利要求1所述的结合物，其中所述泌酸调节肽衍生物的氨基酸序列的位置16和20的氨基酸对形成环。5.根据权利要求1所述的结合物，其中所述泌酸调节肽衍生物选自SEQIDNO.23、26、27和33的肽。6.根据权利要求1所述的结合物，其中所述非肽基聚合物选自聚乙二醇、聚丙二醇、乙二醇和丙二醇的共聚物、聚氧乙烯化多元醇、聚乙烯醇、多糖、葡聚糖、聚乙烯乙醚、聚乳酸(PLA)、聚乳酸-乙醇酸(PLGA)、脂质聚合物、壳多糖、透明质酸、多糖和其组合。7.根据权利要求1所述的结合物，其中所述免疫球蛋白Fc区和泌酸调节肽的氨基和巯基分别连接在所述非肽基聚合物的两端。8.根据权利要求1所述的结合物，其中所述非肽基聚合物在两端具有能结合所述免疫球蛋白Fc区和所述蛋白质药物的反应基团。9.根据权利要求8所述的结合物，其中所述反应基团选自醛基、丙醛基、丁醛基、马来酰亚胺基团和琥珀酰亚胺衍生物。10.根据权利要求8所述的结合物，其中在两端的所述反应基团彼此相同或不同。11.根据权利要求1所述的结合物，其中所述免疫球蛋白Fc区是非糖基化的Fc区。12.根据权利要求1所述的结合物，其中所述免疫球蛋白Fc区选自CH1结构域、CH2结构域、CH3结构域和CH4结构域；CH1结构域和CH2结构域；CH1结构域和CH3结构域；CH2结构域和CH3结构域；一种或多...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑圣烨，金大振，朴晟喜，禹姈银，崔仁荣，权世昌，
申请(专利权)人：韩美科学株式会社，
类型：发明
国别省市：韩国,KR