一种靶向间皮素的嵌合抗原受体修饰T细胞及其用途制造技术

本发明专利技术提供靶向间皮素的嵌合抗原受体修饰T细胞及其用途。具体而言，本发明专利技术提供的嵌合抗原受体从N端到C端依次含有膜蛋白信号肽、抗间皮素近膜端单链抗体、长50个氨基酸残基以上的铰链区、跨膜区、共刺激信号分子胞内结构域和免疫受体酪氨酸活化基序。本发明专利技术还包括表达本文所述嵌合抗原受体的T细胞，该T细胞可以特异性杀伤间皮素高表达的肿瘤细胞株，且对不表达的肿瘤细胞株杀伤作用较小或无，具有很好的特异性。

A chimeric antigen receptor targeting mesothelin modified T cells and its application

The invention provides chimeric antigen receptor modified T cells targeting mesothelin and its use. Specifically, the chimeric antigen receptor provided by the present invention contains membrane protein signal peptide, anti-mesothelin near-membrane single chain antibody, hinge region with more than 50 amino acid residues, transmembrane region, intracellular domain of costimulatory signal molecule and tyrosine activation sequence of immune receptor in turn from N-terminal to C-terminal. The invention also includes T cells expressing chimeric antigen receptors described in this paper. The T cells can specifically kill tumor cell lines with high expression of mesothelin, and have little or no killing effect on non-expressed tumor cell lines, thus having good specificity.

【技术实现步骤摘要】
一种靶向间皮素的嵌合抗原受体修饰T细胞及其用途
本专利技术属于基因工程学和免疫学，涉及一种靶向间皮素的嵌合抗原受体修饰T细胞及其用途。
技术介绍
癌症现在已成为人类健康的头号杀手，快速的生活节奏、巨大的工作压力、不健康的饮食习惯、糟糕的环境都是癌症发生的帮凶，使得癌症的高发率和年轻化趋势也越来越明显。目前常用的治疗手段效果十分有限，仍需探索一个更加有效的治疗方法，来提高癌症患者的生存率和生存质量。针对恶性肿瘤的免疫治疗近年来发展迅速，取得了令人瞩目的临床疗效。自2011年，Nature及临床肿瘤最顶级杂志JCO分别发表相同题目“肿瘤免疫治疗的时代已经来临”的评论文章(Nature.2011；480(7378):480；JClinOncol.2011；29(36):4828)，肿瘤免疫细胞治疗迎来新一轮的研究热潮。嵌合抗原受体T细胞疗法作为肿瘤免疫治疗的重要分支之一，在恶性血液肿瘤中已经取得了非常好的疗效，对复发难治性B细胞白血病的完全缓解率超过90％。嵌合抗原受体是一种人工合成受体，它通常包含胞外抗原结合域、跨膜铰链区和胞内信号转导区。通过将识别肿瘤相关抗原(tumorassocia本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种嵌合抗原受体，其特征在于，从N端到C端，该嵌合抗原受体依次含有膜蛋白信号肽、抗间皮素近膜端的单链抗体、长50个氨基酸残基以上的铰链区、跨膜区、共刺激信号分子胞内结构域和免疫受体酪氨酸活化基序。

【技术特征摘要】
1.一种嵌合抗原受体，其特征在于，从N端到C端，该嵌合抗原受体依次含有膜蛋白信号肽、抗间皮素近膜端的单链抗体、长50个氨基酸残基以上的铰链区、跨膜区、共刺激信号分子胞内结构域和免疫受体酪氨酸活化基序。2.如权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗间皮素单链抗体为间皮素III区的特异性抗体；优选地，所述间皮素III区的氨基酸序列如SEQIDNO:12所示；更优选地，所述抗间皮素III区的单链抗体的氨基酸序列如SEQIDNO:3所示。3.如权利要求1或2所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体具有以下一个或多个特征：所述信号肽选自CD8信号肽、CD28信号肽和CD4信号肽；优选地，所述信号肽是CD8信号肽，其氨基酸序列如SEQIDNO:1所示；所述长50个氨基酸残基以上的铰链区选自CD8α铰链区、IgD铰链区、IgG1FcCH2CH3铰链区和IgG4FcCH2CH3铰链区；优选地，所述铰链区是CD8α铰链区或IgG4FcCH2CH3铰链区；更优选地，所述CD8铰链区的氨基酸序列如SEQIDNO:5所示；所述IgG4FcCH2CH3铰链区的氨基酸序列如SEQIDNO:6所示；所述跨膜区选自CD28跨膜区、CD8跨膜区、CD3ζ跨膜区、CD134跨膜区、CD137跨膜区、ICOS跨膜区和DAP10跨膜区中的一种或多种；优选地，所述跨膜区为CD8跨膜区，其氨基酸序列如SEQIDNO:7所示；所述共刺激信号分子胞内结构域选自CD28、CD134/OX40、CD137/4-1BB、LCK、ICOS和DAP10胞内结构域中的一种或多种；优选地，所述共刺激信号分子胞内结构域是CD28胞内结构域，其氨基酸序列如SEQIDNO:8所示，或所述共刺激信号分子胞内结构域是CD137胞内结构域，其氨基酸序列如SEQIDNO:9所示；和所述免疫受体酪氨酸活化基序为CD3ζ和/或FcεRIγ的酪氨酸活化基序；优选地，所述免疫受...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱其军，金华君，江芏青，王超，崔连振，李林芳，
申请(专利权)人：上海细胞治疗研究院，上海细胞治疗工程技术研究中心集团有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31