抗CD20抗原的嵌合抗原受体及其应用制造技术

本发明专利技术属于基因工程领域，具体涉及一种抗CD20抗原的嵌合抗原受体及其应用。抗CD20抗原的嵌合抗原受体，其特征在于，由识别CD20抗原的多肽(scFv)，铰链区，跨膜区和胞内信号域依次连接组成；所述识别CD20抗原的多肽(scFv)的氨基酸序列如SEQ ID NO.14所示。本发明专利技术提供的抗CD20抗原的嵌合抗原受体在免疫细胞中表达后，可以有效的清除表达CD20抗原的肿瘤靶细胞，能维持靶向CD20分子通过结合细胞表面的CD20分子达到杀灭B淋巴细胞的效果并且能够加强CAR‑T的增殖和杀伤肿瘤的能力，并且对抗原阴性的细胞无毒副作用，能够用于肿瘤的靶向治疗。

Chimeric antigen receptor against CD20 antigen and its application

The invention belongs to the field of genetic engineering, in particular to a chimeric antigen receptor against CD20 antigen and its application. The chimeric antigen receptor for anti-CD20 antigen is characterized by sequential connections of the polypeptide (scFv), hinge region, transmembrane region and intracellular signal domain recognizing CD20 antigen, and the amino acid sequence of the polypeptide (scFv) recognizing CD20 antigen is shown in SEQ ID NO.14. The chimeric antigen receptor of the anti-CD20 antigen provided by the invention can effectively remove the tumor target cells expressing CD20 antigen after being expressed in immune cells, maintain the effect of killing B lymphocyte by binding CD20 molecule on cell surface, strengthen the proliferation and killing ability of CAR T, and have no toxic and side effects on antigen-negative cells. It can be used for targeted therapy of tumors.

【技术实现步骤摘要】
抗CD20抗原的嵌合抗原受体及其应用
本专利技术属于基因工程领域，涉及抗CD20抗原的嵌合抗原受体及其应用，还涉及包含抗CD20抗原的嵌合抗原受体的慢病毒载体和应用。
技术介绍
慢性淋巴细胞白血病(chroniclymphocyticleukemia，CLL)是一种成熟B淋巴细胞克隆增殖性肿瘤，以淋巴细胞在外周血、骨髓、脾脏和淋巴结聚集为特征。许多高危患者治疗时容易复发、并且治疗存在一定的困难。非霍奇金淋巴瘤(NHL)是具有很强异质性的一组独立疾病的总称，在常见恶性肿瘤排位中在前10位以内。目前发病率在不同年龄阶段呈明显上升的趋势。CD20抗原是一种B细胞分化抗原，仅位于前B细胞和成熟B细胞，它在95％以上的B细胞性淋巴瘤中表达，而在造血干细胞、血浆细胞和其他正常组织中不表达，成为治疗淋巴细胞肿瘤的理想靶点。目前临床上常用利妥昔与一线化疗药联合的方式治疗非霍奇金淋巴瘤或慢性淋巴细胞白血病。利妥昔单抗是靶向CD20分子通过结合细胞表面的CD20分子达到杀灭B淋巴细胞的单克隆抗体。虽然利妥昔单抗是治疗非霍奇金淋巴瘤或慢性淋巴细胞白血病的非常有效的药物，然而大多数患者经过药物治疗后依然会复本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.抗CD20抗原的嵌合抗原受体，其特征在于，由识别CD20抗原的多肽(scFv)，铰链区，跨膜区和胞内信号域依次连接组成；所述识别CD20抗原的多肽(scFv)的氨基酸序列如SEQ ID NO.14所示或将所述识别CD20抗原的多肽(scFv)经过改造后得到的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.抗CD20抗原的嵌合抗原受体，其特征在于，由识别CD20抗原的多肽(scFv)，铰链区，跨膜区和胞内信号域依次连接组成；所述识别CD20抗原的多肽(scFv)的氨基酸序列如SEQIDNO.14所示或将所述识别CD20抗原的多肽(scFv)经过改造后得到的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述铰链区的氨基酸序列如SEQIDNO:21或SEQIDNO:22所示。3.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述跨膜区的氨基酸序列如SEQIDNO:23或SEQIDNO:24所示。4.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述胞内信号域为CD28和/或CD137和/或CD3；所述CD28的氨基酸序列如SEQIDNO:25，所述CD137的氨基酸序列如SEQIDNO:26，所述CD3的氨基酸序列如SEQIDNO:27。5.根据权利要求1-4任一项所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体的氨基酸序列由SEQIDNO.14、SEQIDNO:21、SEQIDNO:23、SEQIDNO:25、SEQIDNO:26和SEQIDNO:27序列依次串联而成。6.权利要求1-4任一项所述的嵌合抗原受体的慢病毒载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)合成抗CD20抗原的嵌合抗原受体的嵌合抗原受体的基因序列：合成依次含前导肽、抗人抗CD20抗原的不同的单链抗体(ScFv)、铰链区、跨膜区和胞内信号域；所述铰链区核酸序列如SEQIDNO:9或SEQIDNO:8、跨膜区核酸序列如SEQIDNO:10或31、胞内信号域核酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：重庆精准生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50