一种线粒体DNA提取试剂盒和方法技术

本发明专利技术公开了一种线粒体DNA提取试剂盒和方法，涉及线粒体DNA提取技术领域。本发明专利技术提供的线粒体DNA提取试剂盒，包括蛋白酶K、悬浮液、裂解液和洗脱液；其中，悬浮液为PBS缓冲液；裂解液含有：Tris‑HCl、NaCl、EDTA、SDS以及RNA carrier；洗脱液含有：Tris‑HCl和EDTA。该线粒体DNA提取试剂盒通过合适的试剂搭配，可以直接以血浆作为样本，从中提取出高质量、高纯度的线粒体DNA，采用该试剂盒所提取出的线粒体DNA可以直接用于荧光定量PCR检测。

【技术实现步骤摘要】
一种线粒体DNA提取试剂盒和方法
本专利技术涉及线粒体DNA提取
，具体而言，涉及一种线粒体DNA提取试剂盒和方法。
技术介绍
众所周知，线粒体(mitochondrion)是一种存在于大多数细胞中的由两层膜包被的细胞器，是细胞中制造能量的结构，是细胞进行有氧呼吸的主要场所，被称为"powerhouse"。线粒体由外至内可划分为线粒体外膜(OMM)、线粒体膜间隙、线粒体内膜(IMM)和线粒体基质四个功能区。线粒体基质是线粒体中由线粒体内膜包裹的内部空间，其中含有参与三羧酸循环、脂肪酸氧化、氨基酸降解等生化反应的酶等众多蛋白质以及苹果酸脱氢酶。线粒体基质中一般还含有线粒体自身的DNA(即线粒体DNA)、RNA和核糖体(即线粒体核糖体)。线粒体DNA是线粒体中的遗传物质，呈双链环状。一个线粒体中可有一个或数个线粒体DNA分子。正常情况下，因为新城代谢的原因，血液中会有极少量的线粒体DNA存在。但是当组织细胞结构发生破坏，甚至线粒体结构发生破坏时，线粒体内基质物质释放，线粒体DNA会大量释放于血浆中，而且血浆中线粒体DNA的数量与组织细胞的损伤程度有相关性。而现在市面上没有提取血液中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种线粒体DNA提取试剂盒，其特征在于，其包括：蛋白酶K、悬浮液、裂解液和洗脱液；其中，所述悬浮液为PBS缓冲液；所述裂解液含有：Tris‑HCl、NaCl、EDTA、SDS以及RNA carrier；所述洗脱液含有：Tris‑HCl和EDTA。

【技术特征摘要】
1.一种线粒体DNA提取试剂盒，其特征在于，其包括：蛋白酶K、悬浮液、裂解液和洗脱液；其中，所述悬浮液为PBS缓冲液；所述裂解液含有：Tris-HCl、NaCl、EDTA、SDS以及RNAcarrier；所述洗脱液含有：Tris-HCl和EDTA。2.根据权利要求1所述的线粒体DNA提取试剂盒，其特征在于，所述裂解液含有：10-55mMTris-HCl、100-200mMNaCl、0.5-5.0mMEDTA、0.5％-2.5％SDS以及0.5-1.5mg/mlRNAcarrier。3.根据权利要求1或2所述的线粒体DNA提取试剂盒，其特征在于，所述洗脱液含有：5-10mMTris-HCl和0.08-0.12mMEDTA。4.根据权利要求1或2所述的线粒体DNA提取试剂盒，其特征在于，所述线粒体DNA提取试剂盒还包括：洗涤液1和洗涤液2。5.根据权利要求1所述的线粒体DNA提取试剂盒，其特征在于，所述线粒体DNA提取试剂盒针对的样品为血浆。6.一种线粒体DNA的提取方法，其特征在于，其包括：样本处理步骤：用悬浮液悬浮血浆样本经离心后获取的沉淀，得到悬浮线粒体液；消化步骤：往所述悬浮线粒体液中加入蛋白酶K和裂解液，进行消化，得到消化液；DNA沉淀步骤：往消化液中加入无水乙醇，混匀，室温静置后，获取DNA沉淀；洗涤步骤：用...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋勇，胥武剑，尹志强，杨志坚，张洪英，高峰，
申请(专利权)人：宋勇，胥武剑，尹志强，杨志坚，张洪英，高峰，
类型：发明
国别省市：江苏,32